Celična linija A375 - vodnik za raziskave melanoma

A375 je celična linija človeškega melanoma, ki se pogosto uporablja v toksikoloških in imunoonkoloških raziskavah. Raziskovalci uporabljajo to celično linijo za preučevanje biologije raka in signalnih poti, testiranje ali presejanje potencialnih protirakavih sredstev ter razvoj novih in učinkovitih zdravil.

Izvor in splošne značilnosti celic A375

Poznavanje izvora in splošnih značilnosti celične linije vam lahko pomaga pri načrtovanju njene uporabe v raziskavah. Ta del članka obravnava izvor in značilnosti celične linije A375. Kaj je na primer celična linija A375? Kakšne so značilnosti celične linije A375? Od kod izvirajo celice A375? Kakšna je morfologija melanomskih celic A375? Kakšna je velikost celic A375?

Celična linija kožnega raka A375 izvira iz eksplantacijske kulture solidnega tumorja 54-letne ženske z malignim melanomom [1].
Celice A375 imajo epitelijsko morfologijo.
Velikost celic A375 je v primerjavi z drugimi celičnimi linijami razmeroma majhna. Njihov premer je približno 12 µm.
Melanomske celice A375 so hipotriploidne. Modalno število kromosomov za to celično linijo je 62. Običajno ima vsaka celica devet označevalnih kromosomov in po eno kopijo normalnih kromosomov N2, N6 in N22.

Zdravnik pregleda izrastke na koži odrasle osebe in ugotovi, ali gre za kožnega raka.

Celice A375: Informacije o celični kulturi

Celične kulture A375 je enostavno vzdrževati. Nimajo nobenih zahtev glede gojenja celic. To poglavje vam bo pomagalo izvedeti potrebne informacije o celičnih kulturah. Na primer, kakšen je čas podvojitve A375. Kakšno je gojišče celične linije A375? Kakšna je gostota naselitve A375? Ali so celice melanoma A375 adherentne?

Ključne točke za gojenje celic A375

Čas podvojitve populacije:	Čas podvojitve populacije A375 je 20 ur.
Prilepljene ali v suspenziji:	A375 je adherentna celična linija človeškega melanoma.
Gostota naselitve:	za celične kulture A375 je idealna gostota^celic1 x¹⁰⁴ celic/cm2. Adherentne celice se sperejo z 1 x fosfatno pufrsko fiziološko raztopino (PBS) in inkubirajo z raztopino za prehod (Accutase). Nato smo celicam dodali gojišče in jih centrifugirali. Zbrane celice so bile ponovno suspendirane v gojišču in razdeljene v nove bučke za rast.
Gojišče za rast:	DMEM se priporoča kot idealno gojišče za A375, če je dopolnjeno z 10 % fetalnega govejega seruma (FBS), 4,5 g/L glukoze, 1,5 g/L NaHCO3, 4 mM L-glutamina in 1,0 mM natrijevega piruvata. Gojišče A375 je treba obnavljati 2-3 dni na teden.
Pogoji rasti:	Celice melanoma A375 gojimo v vlažnem inkubatorju (37 °C) s 5-odstotnim dovajanjem CO2.
Shranjevanje:	Zamrznjene celice A375 je treba hraniti pod -150 °C v parni fazi tekočega dušika ali v električnem zamrzovalniku.
Postopek zamrzovanja in medij:	Za zamrzovanje celične linije A375 se uporabljajo mediji CM-1 ali CM-ACF. Za zaščito vitalnosti celic je bil izbran počasen postopek zamrzovanja, ki omogoča postopno zniževanje temperature za 1 °C.
Postopek odtaljevanja:	Vialo z zamrznjenimi melanomskimi celicami A375 40 do 60 sekund hitro mešamo v vodni kopeli, dokler ne ostane le majhen ledeni skupek. Celice se dodajo s svežim medijem in centrifugirajo, da se odstranijo elementi zamrzovalnega medija. Dobljeni celični pelet ponovno suspendiramo in prelijemo v nove bučke.
Raven biološke varnosti:	S kulturami A375 ravnamo in jih vzdržujemo v laboratorijskem okolju 1. stopnje biološke varnosti.

Konfluentna plast adherentnih celic A375 pri 20-kratni povečavi.

Prednosti in omejitve celične linije A375

Tako kot druge celične linije ima tudi melanomska celična linija A375 edinstveno kombinacijo prednosti in omejitev, zato je dragoceno orodje za raziskave melanomskega raka. V tem razdelku je navedenih le nekaj pomembnih prednosti in slabosti celične linije A375.

Prednosti

Pomembne prednosti celic A375 so navedene v nadaljevanju:

Model tumorja melanoma: Celična linija A375 je bila pridobljena iz malignega tumorja melanoma, zato je neprecenljiv tumorski model za raziskovanje biologije melanoma in terapevtskih posegov. Te celice imajo melanomu podobne lastnosti, kot sta visoka stopnja proliferacije in invazivnost.
Tumorigenost: Celice A375 so zelo tumorogene, kar pomeni, da lahko tvorijo tumorje. Celice A375 naj bi ustvarjale agresivne amelanotske melanome pri švicarskih miših NIH, zdravljenih s serumom proti timocitom (imunosupresivno sredstvo).
Dobro karakterizirane: A375 je genetsko dobro opisana celična linija. Ima specifične genetske mutacije kot melanom. Mutacije A375 vključujejo spremembo gena A375 BRAF, zaradi česar je občutljiva na specifične zaviralce BRAF. Zaradi tega genetskega profila so celice A375 odlično orodje za raziskovanje raka za preučevanje osnovnih molekularnih poti in ciljnih terapij.

Omejitve

Omejitve, povezane s celicami A375, so:

Omejitve in vitro: A375 je in vitro model tumorja. Čeprav posnema značilnosti melanoma, ne more v celoti predstavljati kompleksnosti melanomskih tumorjev. Zato je pri posploševanju ugotovitev in vitro na klinične študije potrebna previdnost.

Kupite celice A375 zdaj

430,00 €*

Vsebina: 1.5 milliliter

Cene brez davkov in stroškov dostave

cryovial

Številka izdelka: 300110

Raziskovalna uporaba celične linije A375

Celična linija A375 se pogosto uporablja za raziskave raka. V nadaljevanju so navedena nekatera pogosta področja, na katerih se uporabljajo celice A375.

Raziskave raka: Celice A375 se pogosto uporabljajo pri raziskavah melanoma. Raziskovalci so te celice uporabili za raziskovanje biologije kožnega raka, procesov in osnovnih mehanizmov celične signalizacije, vključno s proliferacijo, migracijo in invazijo celic. To lahko raziskovalcem pomaga tudi pri iskanju novih molekularnih terapevtskih ciljev. V študiji, ki jo je leta 2019 izvedel Lin Zhu s sodelavci, so uporabili zelo agresivne melanomske celice A375 in ugotovili vlogo mikroRNA-3662 na rast in invazijo melanomskih celic A375. Ugotovitve študije navajajo, da mikroRNA-3662 cilja na gen ZEB1 in uravnava rast melanomskih celic in vitro in in vivo v modelu tumorja A375 [2]. Podobno je bilo v raziskavi, izvedeni leta 2018, ugotovljeno, da sta poti PI3K/AKT in MAPK/ERK vključeni v proliferacijo in metastaziranje celične linije A375 [3].
Odkrivanje in preskušanje zdravil: Celična linija A375 je uporaben in vitro tumorski model za testiranje in presejanje potencialnih protirakavih zdravil. Raziskovalci ocenjujejo toksičnost in učinkovitost novih kemoterapevtskih zdravil, spojin in drugih terapij z uporabo teh melanomskih celic A375. V študiji so na primer preučevali protirakave lastnosti mikro- in nanovsebin, pridobljenih iz grenivke, na celicah človeškega melanomskega raka A375. Rezultati so pokazali, da mikro- in nanovesikli povzročijo zastoj celičnega cikla in apoptozo ter ovirajo izražanje genov pri celični proliferaciji, migraciji in invaziji [4].

Celice A375: Objave

Tukaj je navedenih nekaj pomembnih raziskovalnih publikacij, v katerih so predstavljene celice A375.

Vitamin D in njegovi nizkokalcemični analogi modulirajo protirakave lastnosti cisplatina in dakarbazina v celični liniji človeškega melanoma A375

Ta študija je bila objavljena v reviji Journal of Oncology leta 2019. V študiji je bilo predlagano, da sočasno zdravljenje z vitaminom D in analogi izboljša protirakavo delovanje cisplatina in dakarbazina v melanomskih celicah A375.

In vitro vrednotenje protimelanomskih učinkov (celična linija A375) izvlečkov gela in celih listov izbranih vrst aloe

Ta raziskava je bila objavljena v reviji Journal of Herbal Medicine leta 2022. V tej študiji so bili raziskani protimelanomski učinki gela aloe vere v melanomskih celicah A375.

Član družine fermitina 2 spodbuja napredovanje melanoma s povečanjem vezave p-α-Pix na Rac1 za aktivacijo poti MAPK

Ta študija v reviji Oncogene (2021) predlaga, da član družine fermitina 2 (FERMT2 ali kindlin-2) spodbuja napredovanje melanoma z aktiviranjem MAPK prek vezave s p-α-Pix in Rac1.

FARP1 omogoča proliferacijo celic z modulacijo signalne poti MAPK v kožnem melanomu

Ta študija v reviji The American Journal of Dermatopathology (2019) predlaga, da lahko FARP1 olajša razvoj in napredovanje kožnega melanoma. Tako je lahko koristna terapevtska tarča.

Citotoksični in apoptotični potencial izvlečkov Phyllodium elegans na celičnih linijah človeškega raka

Ta raziskovalni članek je bil objavljen v reviji Bioengineered (2019). V tej študiji je bila raziskana citotoksična in apoptotična aktivnost rastlinskega izvlečka Phyllodium elegans na celičnih linijah človeškega karcinoma, vključno z A375.

Viri za celično linijo A375: Viri: protokoli, videoposnetki in drugo

V nadaljevanju je navedenih nekaj spletnih virov, v katerih so predstavljene celice A375.

Transfekcija celic A375: V tem videoposnetku se boste po korakih naučili transfekcije celic A375.
Gojenje celic: Ta video vsebuje zelo koristne informacije o gojenju celičnih linij.

Protokoli za gojenje celic A375 so navedeni tukaj.

Celična linija A375: Ta povezava vsebuje koristne informacije o gojenju in vzdrževanju celične linije A375, vključno z mediji za A375 ter ravnanjem z zamrznjenimi in razmnoževalnimi kulturami A375.

Pogosto zastavljena vprašanja (FAQ) za celice A375

Reference

Avram, S., et al., Standardizacija modelov človeškega melanoma A375 na horioalantoidni membrani piščančjega zarodka in Balb/c golih miših. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 cilja na ZEB1 in zmanjšuje invazijo zelo agresivne celične linije melanoma A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C inhibits melanoma A375 cell proliferation and metastasis via suppressing PI3K/Akt and MAPK/ERK pathways. Life sciences, 2018. 206: p. 35-44.
Stanly, C., et al., Grapefruit-derived micro and nanovesicles show distinct metabolome profiles and anticancer activities in the A375 human melanoma cell line. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.