Razumevanje "številke prehoda"

Koncept "števila prehodov" je osrednjega pomena za celične kulture in se nanaša na število subkulturacij ali prenos na sveže gojišče po prvi oživitvi iz kriokonzervacije ali prejemu iz referenčne celične banke. Ta metrika je ključnega pomena pri spremljanju linije in zgodovine celične kulture.

Pregled procesa

• V rutinski praksi gojenja celičnih kultur se celice, ko dosežejo določeno gostoto, prenesejo v novo gojišče, da se ohrani rast in prepreči prevelika koncentracija. Vsak tak prenos se zabeleži kot prehod.
• Tradicionalno, ko smo od vlagatelja prejeli celično linijo, na primer pri prehodu 60, smo nadaljevali s to številko prehoda in jo z vsako podkulturo povečali. Ta praksa je ob ohranjanju zgodovinske nitke pogosto vodila k visokim številkam prehodov že od samega začetka. Zaradi obsežne in pogosto desetletja trajajoče uporabe nekaterih celičnih linij, na primer linije HeLa, ki je bila vzpostavljena leta 1951, ni mogoče določiti skupnega števila prehodov od začetka celične linije.
• Da bi izboljšali jasnost in kakovost naših postopkov gojenja celic, smo v začetku leta 2023 spremenili ta pristop. Zdaj, ko začnemo gojiti kulturo iz nove viale, ne glede na številko prehoda od vlagatelja, za vsako izdelano serijo ponastavimo in začnemo šteti na novo od prvega prehoda

Utemeljitev

Pasažiranje je pomemben postopek za zagotavljanje zdravja in uporabnosti celičnih kultur za raziskave. Ko se celice prekomerno razrastejo, pride do zaviranja stika, kar zmanjša njihovo stopnjo razmnoževanja, kar lahko negativno vpliva na rezultate poskusov. Za ublažitev teh težav družba Cytion izvaja strog nadzor nad gostoto celic, pri kateri poteka subkultiviranje, in tako med proizvodnjo svojih celičnih linij ohranja nizko število prehodov. Ta previdnostni ukrep pomaga preprečevati škodljive učinke prekomernega pasažiranja, kot so morfološke anomalije, spremembe hitrosti rasti in genetski zdrs, zaradi katerih se lahko celice močno razlikujejo od svojega prvotnega stanja. Daljša obdobja subkultiviranja lahko povečajo tudi tveganje mikrobne kontaminacije.

Naša obljuba

Zagotavljamo, da so celice, dobavljene raziskovalcem, čim bolj podobne prvotni genetski sestavi in fenotipskim značilnostim, kar povečuje zanesljivost eksperimentalnih podatkov. Poleg tega družba Cytion z natančnim dokumentiranjem vsakega prehoda prispeva k sledljivosti in ponovljivosti raziskav, kar je zaveza, ki odraža visoke standarde prakse na področju celičnih kultur. Raziskovalce spodbujamo, da vodijo natančne zapise o številkah prehodov, tako na posodah za gojenje kot v svojih laboratorijskih zvezkih, kot referenco za zdravje in zgodovino svojih celičnih kultur.