Objavljeno: 2023 | Zadnji pregled: maj 2026

Razumevanje »številke pasáže«

Pojem »številka pasáže« je osrednjega pomena za celično kulturo in se nanaša na število krat, ko je bila celična linija subkultivirana ali prenesena v novo gojišče po prvotni oživitvi iz krioprezervacije ali prejemu iz referenčne celične banke. Ta merilo je ključnega pomena za sledenje linije in zgodovine celične kulture.

Pregled postopka

V rutinski praksi celične kulture se celice, ko dosežejo določeno gostoto, prenesejo v novo gojišče, da se ohrani rast in prepreči prekomerno zgoščevanje. Vsak tak prenos se zabeleži kot pasáža.
Tradicionalno smo, ko smo na primer od deponenta prejeli celično linijo v 60. pasu, nadaljevali s tem številom pasov in ga povečevali z vsako subkulturo. Ta praksa je sicer ohranjala zgodovinsko nit, vendar je pogosto vodila do visokih številk pasov že od samega začetka. Glede na obsežno in pogosto desetletja dolgo uporabo nekaterih celičnih linij, kot je linija HeLa, ustanovljena leta 1951, ni mogoče določiti skupnega števila pasaz od začetka celične linije.
Da bi izboljšali jasnost in kakovost naših postopkov celične kulture, smo ta pristop na začetku leta 2023 spremenili. Zdaj, ko začnemo kulturo iz nove viale, ne glede na številko pasáže od deponenta, ponastavimo in začnemo šteti na novo od pasáže ena za vsako proizvedeno serijo.

Utemeljitev

Prenos je ključni postopek za zagotavljanje zdravja in uporabnosti celičnih kultur za raziskave. Ko se celice preveč razrastejo, pride do inhibicije stika, kar zmanjša njihovo stopnjo proliferacije, kar lahko negativno vpliva na rezultate poskusov. Da bi ublažili te težave, v podjetju Cytion izvajajo stroge kontrole gostote celic, pri kateri poteka subkultiviranje, s čimer ohranjajo nizko število pasazov med proizvodnjo svojih celičnih linij. Ta previdnostni ukrep pomaga preprečiti škodljive učinke prekomernega pasiranja, kot so morfološke anomalije, spremembe hitrosti rasti in genetski drift, ki lahko povzročijo, da se celice znatno razlikujejo od svojega prvotnega stanja. Daljša obdobja subkultiviranja lahko povečajo tudi tveganje mikrobne kontaminacije.

Naša obljuba

Zagotavljamo, da so celice, dobavljene raziskovalcem, čim bližje prvotni genetski sestavi in fenotipskim značilnostim, kar povečuje zanesljivost eksperimentalnih podatkov. Poleg tega Cytion s skrbnim dokumentiranjem vsakega pasiranja prispeva k sledljivosti in ponovljivosti raziskav, kar odraža visoke standarde prakse v celični kulturi. Raziskovalce spodbujamo, da vodijo natančne evidence številk pasaz, tako na posodah za gojenje kot v laboratorijskih beležkah, kot referenco za zdravje in zgodovino njihovih celičnih kultur.

Nasveti in pogoste napake

Upoštevanje pravilnega protokola je bistveno, vendar je prav tako pomembno razumevanje pogostih pasti. Postopki celične kulture so občutljivi na majhna odstopanja v tehniki, časovnem poteku in kakovosti reagentov. Naslednji nasveti odražajo najboljše prakse, ki jih priporoča znanstvena ekipa podjetja Cytion na podlagi obsežnih izkušenj s celično kulturo.

Reagente pred uporabo vedno predgrejte na 37 °C, da zmanjšate toplotni šok za celice.
Delajte hitro, a previdno – zmanjšajte čas, ki ga celice preživijo zunaj inkubatorja.
Uporabljajte certificirana reagenta, testirana na mikoplazmo, da se izognete kontaminaciji, ki lahko ogrozi rezultate poskusa.
Zabeležite vsak korak, vključno s številko pasaže, datumom in opazovanji morfologije celic.
Preden preidete na večji obseg, protokol preverite z majhnim pilotnim poskusom, da ne boste zapravili dragih reagentov.

Priporočeni reagenti Cytion

Cytion ponuja vrsto validiranih reagentov za celične kulture, ki so posebej zasnovani za podporo temu protokolu. Vsi reagenti so testirani glede na učinkovitost z običajno uporabljenimi celičnimi linijami in so na voljo s popolno dokumentacijo. Obiščite cytion.com/Media-Reagents, da si ogledate celotno ponudbo.