Varnostni nasveti za tekoči dušik za varno shranjevanje celic

V laboratorijih za celične kulture je tekoči dušik bistvenega pomena za dolgoročno shranjevanje in ohranjanje dragocenih celičnih linij. V družbi Cytion dajemo prednost kakovosti naših celičnih linij in varnosti laboratorijskega osebja, ki ravna s kriogenimi materiali. V tem izčrpnem vodniku so opisani ključni varnostni ukrepi in najboljše prakse za delo s tekočim dušikom pri shranjevanju celic.

Osnovna osebna zaščitna oprema za ravnanje s tekočim dušikom

Pri delu s tekočim dušikom za ohranjanje celičnih linij, kot so celice HeLa ali MCF-7, je ustrezna osebna varovalna oprema nujna. Za zaščito pred brizganjem in hlapi, ki lahko povzročijo hude poškodbe oči in obraznega tkiva, je obvezen vizir za ves obraz. Toplotno izolirane kriogene rokavice morajo segati do podlakti, saj standardne laboratorijske rokavice ne zagotavljajo zadostne zaščite pred ekstremnim mrazom. Kot zunanji zaščitni sloj je treba nositi laboratorijski plašč, ki ga je najbolje dopolniti s plastičnim predpasnikom, odpornim na brizganje, ki zagotavlja dodatno zaščito pred nenamernim razlitjem. Pri prenosu celic iz našega zamrzovalnega medija CM-1 v skladišče s tekočim dušikom se prepričajte, da je vaša osebna zaščitna oprema v dobrem stanju, brez znakov obrabe ali poškodb. Ne pozabite, da lahko že majhna izpostavljenost tekočemu dušiku povzroči takojšnjo poškodbo tkiva, zato je celovita osebna varovalna oprema nujna pri vsakem stiku s sistemi za shranjevanje LN2.

Zahteve za prezračevanje in spremljanje kisika

Pri shranjevanju dragocenega raziskovalnega materiala, kot so celice U937 in celice RAJI, v tekočem dušiku je ključnega pomena ustrezno prezračevanje. Pri izhlapevanju tekočega dušika se ta hitro razširi - en liter tekočega dušika proizvede približno 700 litrov dušikovega plina, ki lahko v zaprtih prostorih hitro izpodrine kisik. Vaš prostor za shranjevanje tekočega dušika mora biti opremljen z mehanskimi prezračevalnimi sistemi in napravami za spremljanje kisika. Za prostore, v katerih se shranjuje več celičnih linij in velike količine zamrzovalnega medija CM-1 - 500 ml, priporočamo namestitev stalnih monitorjev kisika z zvočnimi alarmi, ki se sprožijo pri 18-odstotni koncentraciji kisika. Prostor za shranjevanje mora imeti prezračevalne točke z visoko stopnjo prezračevanja, saj je dušikov plin pri segrevanju nekoliko lažji od zraka. Nikoli se ne zanašajte samo na naravno prezračevanje - mehanske prezračevalne sisteme je treba redno pregledovati in vzdrževati v skladu s specifikacijami proizvajalca, da se zagotovi stalna stopnja izmenjave zraka.

Varnostni protokol za dve osebi

Pri ravnanju s tekočim dušikom za kriokonzervacijo občutljivih celičnih linij, kot so celice HUVEC ali človeške mezenhimske matične celice - kostni mozeg, vedno delajte v paru. Ta partnerski sistem je še posebej pomemben med ključnimi postopki, kot so prenos vzorcev v skladišče, polnjenje kriogenih posod ali ravnanje z velikimi količinami zamrzovalnega medija CM-1. Druga oseba služi kot varnostni opazovalec in se lahko takoj odzove v primeru izrednih dogodkov, kot so razlitje, izčrpavanje kisika ali telesne poškodbe. Postaviti jo je treba v bližino izhoda iz laboratorija, pri čemer mora ohranjati vizualni stik in se izogibati neposrednemu delovnemu območju. Oba člana ekipe morata biti v celoti usposobljena za postopke v sili in poznati lokacijo varnostne opreme. Postopke ravnanja s tekočim dušikom načrtujte med rednim delovnim časom, ko je prisotno podporno osebje, in nikoli ne poskušajte izvajati kriogenih postopkov zunaj delovnega časa ali med vikendi.

Zahteve za obvezno usposabljanje za ravnanje z LN2

Pred ravnanjem s sistemi za shranjevanje tekočega dušika, ki vsebujejo dragocene vzorce, kot so celice HeLa, ali pred delovanjem z zamrzovalnim medijem CM-ACF, ki ne vsebuje seruma, je obvezno celovito usposabljanje. To usposabljanje mora zajemati pravilne tehnike ravnanja, razumevanje kriogenih nevarnosti in postopke za ukrepanje v nujnih primerih. Osebje, ki dela z našimi celičnimi linijami, mora pokazati usposobljenost za varne postopke polnjenja, pravilno uporabo osebne varovalne opreme in razumevanje tveganj zaradi izčrpavanja kisika. Usposabljanje mora vključevati praktične vaje z manjšimi količinami pod nadzorom, preden se začne ravnati z večjimi količinami. O opravljenem usposabljanju je treba voditi dokumentacijo in načrtovati redne obnovitvene seje. Novi člani osebja morajo spremljati izkušeno osebje vsaj tri celotne postopke ravnanja z LN2, preden začnejo delati samostojno kot del ekipe. Ne pozabite, da se mora tudi izkušeno osebje redno usposabljati, da bodo varnostni protokoli ostali sveži in aktualni.

Sistemi za spremljanje kisika in alarmni sistemi

Pri shranjevanju kritičnih raziskovalnih materialov, kot so človeške mezenhimske matične celice - maščobno tkivo in človeške mezenhimske matične celice - Whartonsov žele v tekočem dušiku, so zanesljivi sistemi za spremljanje kisika nujni. Namestiti je treba fiksne monitorje kisika z alarmi, ki se sprožijo pri 18-odstotni koncentraciji kisika (v/v). Ti sistemi zahtevajo strateško namestitev: blizu nivoja tal, kjer se sprva zbirajo plini, težji od zraka, na delovni višini in v bližini posod za shranjevanje LN2. Pri shranjevanju vzorcev v zamrzovalnem mediju CM-ACF - brez seruma - 500 ml zagotovite, da so skladiščni prostori opremljeni z zvočnimi in vizualnimi alarmi, ki jih je mogoče prepoznati prek hrupa laboratorijskega ozadja. Izvajajte mesečni urnik testiranja vseh sistemov za spremljanje kisika, vzdržujte zapise o umerjanju in vzpostavite jasne postopke evakuacije, ko se sprožijo alarmi. Osebje ne sme nikoli poskušati razveljaviti ali onemogočiti teh varnostnih sistemov, ne glede na trajanje načrtovanega dela s tekočim dušikom.