Compreender o "número de passagem"
O conceito de "número de passagem" é fundamental para a cultura de células e refere-se ao número de vezes que uma linha celular foi subcultivada ou transferida para um novo meio de crescimento após o seu renascimento inicial a partir da criopreservação ou da receção de um banco de células de referência. Esta métrica é fundamental para seguir a linhagem e o historial de uma cultura de células.
Descrição geral do processo
- Na prática rotineira de cultura de células, quando as células atingem uma determinada densidade, são transferidas para um novo meio para sustentar o crescimento e evitar a sobreconfluência. Cada uma destas transferências é registada como uma passagem.
- Tradicionalmente, quando recebíamos uma linha celular, por exemplo, na passagem 60 do depositante, continuávamos a partir deste número de passagem, aumentando a cada subcultura. Esta prática, embora mantendo uma linha histórica, conduzia frequentemente a números de passagem elevados desde o início. Dada a utilização extensiva e muitas vezes durante décadas de certas linhas celulares, como a linha HeLa criada em 1951, não é possível determinar o número total de passagens desde o início da linha celular.
- Para aumentar a clareza e a qualidade dos nossos processos de cultura de células, revimos esta abordagem no início de 2023. Agora, quando iniciamos uma cultura a partir de um novo frasco, independentemente do número de passagem do depositante, reiniciamos e começamos a contar novamente a partir da passagem um para cada lote fabricado
Fundamentação
A passagem é um procedimento vital para garantir a saúde e a utilidade das culturas de células para investigação. Quando as células crescem demasiado, sofrem uma inibição de contacto, reduzindo a sua taxa de proliferação, o que pode afetar negativamente os resultados experimentais. Para mitigar estes problemas, a Cytion implementa controlos rigorosos sobre as densidades celulares em que ocorre a subcultura, mantendo assim baixos números de passagem durante o fabrico das suas linhas celulares. Esta precaução ajuda a evitar os efeitos adversos da passagem excessiva, tais como anomalias morfológicas, alterações na taxa de crescimento e deriva genética, que podem fazer com que as células difiram acentuadamente do seu estado original. Períodos prolongados de subcultura podem também aumentar o risco de contaminação microbiana.
A nossa promessa
Asseguramos que as células fornecidas aos investigadores estão tão próximas quanto possível da composição genética e das caraterísticas fenotípicas originais, aumentando a fiabilidade dos dados experimentais. Além disso, ao documentar meticulosamente cada passagem, a Cytion contribui para a rastreabilidade e reprodutibilidade da investigação, um compromisso que reflecte os elevados padrões de prática em cultura de células. Os investigadores são encorajados a manter registos precisos dos números de passagem, tanto nos recipientes de cultura como nos seus cadernos de laboratório, como referência para a saúde e a história das suas culturas de células.