Células U87MG - Investigação sobre glioblastoma utilizando a U87MG e o seu impacto nos estudos sobre o cancro do cérebro
AU-87 MG, a linha celular primária de glioblastoma humano, é amplamente utilizada na investigação biológica. Em particular, estas células são utilizadas nos domínios da neurociência e da imuno-oncologia.
Caraterísticas gerais e origem da linha celular U-87 MG
Esta secção descreve a origem e as caraterísticas gerais da linha de células U87. Ficará a saber O que são as células U-87 MG? Qual é a origem da célula U87? Qual é a forma completa da U-87 MG? Qual é o tamanho das células U87? Qual é a morfologia da linha de células U87?
- A linha celular U87 é uma linha celular de glioblastoma, astrocitoma. Foi criada em 1966 na Universidade de Uppsala. As células foram obtidas de um homem caucasiano de 44 anos que sofria de glioblastoma. Esta linha celular é formalmente designada por U 87 MG, que significa Glioma Maligno Uppsala 87.
- As células U 87 MG apresentam uma morfologia semelhante à das células epiteliais.
- O tamanho das células U 87 MG varia entre 12 e 14 µm de diâmetro.
- Esta linha celular de glioblastoma humano é hipodiplóide e possui um número modal de cromossomas de 44 em aproximadamente 48% da população celular. No entanto, existem também ploidias mais elevadas em 5,9% da população celular.
Informações sobre a cultura de células U-87 MG
Antes de trabalhar com células U 87 MG, deve informar-se sobre os seguintes pontos-chave para a cultura destas células de glioblastoma. Em particular, deve saber: Qual é o tempo de duplicação da população de células U 87 MG? Que meios são utilizados para a cultura de células U87? Qual é a densidade de sementeira da linha de células U 87 MG?
Pontos-chave para a cultura de células U-87 MG
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Tempo de duplicação da população: |
As células U 87 MG têm um tempo de duplicação da população que varia entre 18 e 38 horas. |
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Aderente ou em suspensão: |
A U 87 MG é uma linha celular aderente. As células possuem uma forma alongada e crescem em monocamadas. |
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Densidade de sementeira: |
Recomenda-se a sementeira da linha celular de glioblastoma U 87 MG a uma densidade celular de 1 x104 células/cm2. As células U87 aderentes são lavadas com 1 x PBS e incubadas com solução de Accutase. Em seguida, as células dissociadas são centrifugadas e recuperadas. As células são cuidadosamente ressuspendidas e adicionadas a novos frascos com meio de crescimento. |
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Meio de cultura: |
A linha de células U 87 MG é cultivada em EMEM (meio essencial mínimo de Eagle) aumentado com 1,0 g/L de L-glucose, 2,0 mM de L-glutamina, 2,2 g/L de NaHCO3, 1% de NEAA, 1 mM de piruvato de sódio e 10% de solução de FBS. O meio deve ser renovado a cada 2 a 3 dias. |
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Condições de crescimento: |
As células U-87 MG requerem uma incubadora humidificada com um fornecimento de 5% de CO2 e a uma temperatura de 37°C para um crescimento ótimo. |
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Armazenamento: |
As células U87 são mantidas na fase de vapor do azoto líquido ou a uma temperatura inferior a -150°C para manter a viabilidade máxima das células de glioblastoma. |
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Processo e meio de congelação: |
Os meios de congelação CM-1 ou CM-ACF são adequados para congelar as células U 87 MG. Recomenda-se um processo de congelação lento, uma vez que evita que as células sofram qualquer choque e protege a viabilidade celular. |
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Processo de descongelação: |
Os frascos congelados da linha de células U-87 MG são descongelados num banho de água a 37°C. As células são adicionadas ao meio de crescimento, ressuspendidas e dispensadas para cultura em novos frascos. Contrariamente a isto, as células U87 podem ser centrifugadas para remover o meio de congelação e depois cultivadas. |
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Nível de biossegurança: |
O nível de biossegurança 1 é necessário para o manuseamento de culturas de células U 87 MG. |
Vantagens e desvantagens das células U-87 MG
Quando pensamos numa linha celular, a primeira coisa que nos vem à cabeça é: Quais são as vantagens de utilizar células U-87 MG? Quais são as desvantagens das células U87?
Vantagens
As linhas celulares U 87 MG são amplamente utilizadas na investigação. Algumas das vantagens associadas a esta linha celular são
Vantagens
- Fácil de cultivar: As células U 87 MG são fáceis de manter em cultura. Não requerem requisitos de cultura de células exigentes ou complicados
- Homogeneidade: A U-87 MG é uma linha celular homogénea. A maioria das células de uma população possui a mesma composição genética e, por isso, partilha caraterísticas semelhantes. Estas células são utilizadas para estudar processos celulares, rastreio de medicamentos e testes
- Bem caracterizada: Esta linha celular de glioblastoma está bem caracterizada em termos de caraterísticas de crescimento, morfologia e expressão genética, o que a torna uma ferramenta de investigação valiosa
Desvantagens
- Aplicabilidade limitada: A U 87 MG é uma linha celular de glioblastoma, pelo que as suas aplicações se limitam principalmente ao estudo dos glioblastomas e dos mecanismos moleculares subjacentes. Pode não ser adequada para a investigação de outros tipos de cancro.
Aplicações de investigação com células U-87 MG
A linha celular de glioblastoma U87MG é amplamente utilizada em estudos sobre o cancro, em especial na investigação do glioblastoma. Algumas das aplicações de investigação das células U 87 MG são
- Investigação em biologia do cancro: A linha de células U87 é utilizada para estudar o crescimento e o desenvolvimento do cancro, os mecanismos moleculares subjacentes, as vias de sinalização e o microambiente tumoral. Um estudo publicado em 2020 utilizou um modelo in vitro de glioblastoma, a linha celular U-87 MG, para investigar o gene BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) como alvo terapêutico. Os resultados mostraram que o gene BMAL1 inibe a proliferação, migração e invasão de células de glioblastoma, suprimindo a ciclina B1, a metaloproteinase-9 e a expressão do gene fosfo-AKT [1]. Outra pesquisa realizada em 2019 utilizou a linhagem de células U87 e investigou que a expressão do fator de transcrição do fator de necrose tumoral alfa (LITAF) induzida por lipopolissacarídeo regulado negativamente pode aumentar a radiossensibilidade das células de glioma por meio da regulação positiva da via FOXO-1. O LITAF é também conhecido como gene 7 induzido por p53 (PIG7) [2].
- Descoberta e desenvolvimento de medicamentos: As células U-87 MG podem ser utilizadas para efeitos de rastreio e ensaio de medicamentos, permitindo aos investigadores identificar novos medicamentos anticancerígenos potenciais e avaliar a sua eficácia e toxicidade. Uma investigação utilizou a linha celular de glioblastoma U 87 MG para avaliar o potencial anticancerígeno e antioxidante do extrato de Inula helenium (L.) [3]. Da mesma forma, outra publicação mencionou o uso da linha celular U87 para testar o efeito citotóxico e apoptótico dos extratos vegetais [4]. Além disso, uma pesquisa publicada em 2018, estudou o efeito citotóxico de alcalóides sesquiterpênicos extraídos de plantas Nuphar em linhas celulares U 87 MG sensíveis e resistentes a medicamentos [5].
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Linha celular U-87 MG: Publicações de investigação
Aqui estão algumas publicações de investigação proeminentes que apresentam a linha celular U 87 MG.
Este artigo publicado no Neuroreport 2018 propôs que a hipóxia poderia aumentar a migração e invasão de células de glioblastoma humano, regulando a via de sinalização PI3K / Akt / mTOR / HIF-1α.
Este estudo foi publicado na Frontiers in Pharmacology em 2020. Os resultados da pesquisa afirmam que um flavonoide, Eriodictyol, exerce efeitos anticâncer na linha de células U87 e suprime a proliferação e metástase celular. O composto medeia as suas propriedades antitumorais através da modulação da via PI3K/Akt/NF-κB.
Esta pesquisa em Medicina Complementar e Alternativa Baseada em Evidências (2018) sugere que uma fórmula de ervas chinesas chamada pílula Xihuang pode induzir apoptose em células U87, visando a cascata Akt / mTOR / FOXO1 ativada por ROS.
LITAF aumenta a radiossensibilidade das células de glioma humano através da via FoxO1
Este trabalho de investigação foi publicado na revista Cellular and Molecular Neurobiology em 2019. O estudo propôs que um fator de transcrição, LITAF, regula negativamente e aumenta a radiossensibilidade das células de glioma, regulando a via de sinalização FOXO-1.
Este artigo foi publicado na revista Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Os investigadores utilizaram células U 87 MG para investigar o efeito citotóxico das nanopartículas de PLGA carregadas com curcumina.
Recursos para células U-87 MG: Protocolos, vídeos e muito mais
A linha celular de glioblastoma U87MG é utilizada em muitos laboratórios de investigação do cancro. Alguns recursos que apresentam esta linha celular são:
- Transfecção da linha de células U87: Este documento descreve um protocolo de transfecção para células U 87 MG.
- Transfecção da linha celular U 87 MG: Este vídeo é um tutorial que explica passo a passo o protocolo de transfecção de células U87.
O recurso para o protocolo de cultura de células U87 está listado abaixo:
- Células U87 MG: Esta ligação contém informações básicas sobre a linha de células U87 MG. Inclui breves protocolos de divisão, congelação e descongelação de células.
Informações sobre a investigação do glioma U87 MG: Perguntas frequentes
Referências
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 Suprime a Proliferação, Migração e Invasão de Células U87MG através da Regulação Negativa da Ciclina B1, Fosfo-AKT e Metaloproteinase-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF aumenta a radiossensibilidade das células de glioma humano através da via FoxO1. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., atividades antioxidantes e anticâncer do extrato de Inula helenium (L.) na linha celular de glioblastoma humano U-87 MG. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh e A. Ghasempour, citotoxicidade e indução de apoptose em câncer de mama, câncer de pele e células de glioblastoma por extratos vegetais. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Citotoxicidade de alcalóides sesquiterpênicos de plantas Nuphar para linhas celulares sensíveis e resistentes a medicamentos. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.