Células NCI-H460 - Navegar na investigação do cancro do pulmão com conhecimentos sobre as NCI-H460
As célulasNCI-H460 são células de cancro do pulmão de células não pequenas derivadas de seres humanos, normalmente utilizadas na investigação do carcinoma do pulmão e da toxicologia. Esta linha celular é uma ferramenta valiosa para estudar vários aspectos da biologia do cancro que envolvem o desenvolvimento do tumor, o crescimento e a resistência aos medicamentos. Além disso, as células NCI-H460 são um modelo adequado para o desenvolvimento de reagentes anticancerígenos.
Células NCI-H460: Origem e caraterísticas gerais
A origem e as caraterísticas gerais de uma linha celular contribuem em grande medida para as suas aplicações na investigação. Esta secção do artigo ajudá-lo-á a conhecer a origem e as caraterísticas mais importantes das células NCI-H460 de cancro do pulmão. Ficará a saber: O que são as células NCI-H460? Qual é o tipo de linha celular NCI-H460? Qual é a morfologia da NCI-H460?
- A linha celular NCI-H460 teve origem no derrame pleural de um homem europeu com cancro do pulmão de grandes células. Foi criada em 1982 por A.F. Gazdar e colegas.
- As células de cancro do pulmão NCI-H460 possuem uma morfologia epitelial.
- A NCI-H460 é uma linha celular tumorigénica com um cariótipo hipotriplóide. O número cromossómico modal para estas células é 57. As células NCI-H460 também possuem 58 números cromossómicos modais a taxas comparáveis.
- Estas células de cancro do pulmão têm muitas mutações NCI-NCI-H460 como os tumores do pulmão de células não pequenas, como a mutação KRAS NCI-H460, que estão envolvidas na proliferação celular, crescimento, invasão e metástases.
Informações sobre a cultura de células NCI-H460
Deve conhecer os seguintes pontos-chave para o manuseamento e manutenção adequados da linha de células NCI-H460. Irá informá-lo sobre o tempo de duplicação das células NCI-H460, o meio de cultura NCI-H460 e os procedimentos básicos de cultura de células de cancro do pulmão NCI-H460.
Pontos-chave para a cultura de células NCI-H460
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Tempo de duplicação: |
O tempo de duplicação das células NCI-H460 é de aproximadamente 33 horas. |
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Aderente ou em suspensão: |
As células de cancro do pulmão NCI-H460 são aderentes. |
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Rácio de subcultura: |
O rácio de divisão recomendado para a linha de células NCI-H460 é de 1:2 e 1:4. Após a remoção do meio antigo, as células aderentes são lavadas com 1 x tampão fosfato salino. Em seguida, as células são incubadas com a solução de passagem Accutase durante 8 a 10 minutos à temperatura ambiente. As células dissociadas são ressuspensas num meio de cultura e centrifugadas. As células colhidas são novamente ressuspensas e colocadas num novo frasco para cultura. |
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Meio de cultura: |
O RPMI 1640 é utilizado como meio de cultura NCI-H460. É suplementado com 10% de soro fetal bovino, 2,1 mM de glutamina estável e 2,0 g/L de NaHCO3. O meio deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana. |
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Condições de crescimento: |
As culturas NCI-H460 são mantidas a uma temperatura de 37°C numa incubadora humidificada com um fornecimento contínuo de 5% de CO2. |
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Armazenamento: |
As células de cancro do pulmão NCI-H460 podem ser armazenadas a longo prazo na fase de vapor do azoto líquido ou a uma temperatura inferior a -150°C num congelador elétrico de temperatura ultrabaixa. |
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Processo e meio de congelação: |
O meio CM-1 ou CM-ACF é utilizado para congelar e armazenar células NCI-H460. Recomenda-se um método de congelação lenta para proteger a viabilidade máxima das células. |
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Processo de descongelação: |
As células NCI-H460 congeladas são descongeladas num banho de água pré-aquecido (a uma temperatura de 37°C) durante 40 a 60 segundos até ficar um pequeno aglomerado de gelo. As células descongeladas são adicionadas a meios frescos e centrifugadas para remover os componentes dos meios congelados. O pellet de células recolhido é novamente ressuspenso e as células são distribuídas em novos frascos com meios para crescimento. As células NCI-H460 podem demorar quase 24 horas a fixarem-se à superfície do frasco. |
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Nível de biossegurança: |
As células de cancro do pulmão NCI-H460 são manuseadas e mantidas em laboratórios de nível 1 de biossegurança. |
Vantagens e desvantagens das células NCI-H460
A NCI-H460 é uma linha celular muito utilizada na investigação do cancro do pulmão. Esta secção abordará as vantagens e desvantagens gerais relacionadas com as células NCI-H460 de cancro do pulmão.
Vantagens
As vantagens da linha celular de cancro do pulmão de células não pequenas NCI-H460 são as seguintes
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Origem do tumor
A linha celular NCI-H460 foi derivada de um doente com carcinoma do pulmão de grandes células, representando este tipo específico de cancro do pulmão. São utilizadas como modelo para estudar a biologia do cancro do pulmão e desenvolver tratamentos novos e eficazes. As células NCI-H460 têm potencial tumorigénico e podem ser injectadas em ratinhos imunodeficientes para criar modelos tumorais in vivo para estudar o crescimento e o desenvolvimento do tumor e a eficácia de potenciais medicamentos.
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Elevadas taxas de proliferação
A NCI-H460 apresenta taxas de crescimento mais elevadas do que outras linhas celulares de cancro do pulmão de células não pequenas, como a A549. Esta vantagem aumenta a sua disponibilidade e ajuda os investigadores a realizar experiências reprodutíveis e sensíveis ao tempo.
Desvantagens
As desvantagens associadas às células de cancro do pulmão NCI-H460 são
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Homogeneidade
As células NCI-H460 são homogéneas, uma vez que foram obtidas a partir de um único tumor de um doente. Por conseguinte, não apresentam geralmente a complexidade e a heterogeneidade observadas nos tumores dos doentes.
Aplicações de investigação das células NCI-H460
As células de cancro do pulmão NCI-H460 são amplamente utilizadas em estudos relacionados com o carcinoma do pulmão. Eis algumas das aplicações de investigação importantes das células NCI-H460:
- Investigação do cancro do pulmão: As células NCI-H460 são um modelo inestimável para a investigação dos mecanismos celulares e moleculares envolvidos no desenvolvimento, crescimento e metástases dos tumores. Além disso, são utilizadas para estudar vias de sinalização imperativas, alvos moleculares e várias mutações genéticas associadas à progressão do cancro do pulmão. Foram realizados vários estudos em células NCI-H460 para estudar estes factores de forma eficaz. Um estudo realizado em 2019 propôs que a caseína ubíqua nuclear sobreexpressa e o substrato de quinases dependentes de ciclina (NUCKS) estão envolvidos no crescimento de células tumorais através da regulação da via de sinalização PI3K/AKT [1]. Do mesmo modo, um estudo in vitro e in vivo utilizou células NCI-H460 para estudar o papel do gene eIF4E. Os resultados revelaram que o gene eIF4E está envolvido no crescimento do carcinoma do pulmão e na angiogénese, podendo ser alvo de desenvolvimento de medicamentos promissores contra o cancro do pulmão [2].
- Descoberta e desenvolvimento de medicamentos: A NCI-H460, uma linha celular de cancro do pulmão humano, é amplamente utilizada em estudos de descoberta e desenvolvimento de medicamentos. Os investigadores utilizam estas células para investigar a toxicidade e a eficácia de novos candidatos a medicamentos, terapias orientadas e tratamentos que visam principalmente as mutações KRAS da NCI-H460. Um estudo realizado por Haoyue Hu e colegas em 2023 utilizou células NCI-H460 para estudar os efeitos anticancerígenos do medicamento anlotinib. Os resultados mostraram que o anlotinib afectava parcialmente o crescimento das células de cancro do pulmão com mutações KRAS através da inibição da cascata de sinalização MEK/ERK [3]. Do mesmo modo, um composto fenólico, o ácido carnósico, foi analisado quanto a actividades antiproliferativas e proapoptóticas utilizando células NCI-H460 [4].
- Resistência aos medicamentos: A linha celular NCI-H460 é ideal para estudar o mecanismo de resistência do carcinoma do pulmão aos medicamentos. Os investigadores utilizam estas células para desenvolver modelos de resistência aos medicamentos, a fim de identificar os genes subjacentes, os factores moleculares e as vias de sinalização. Por exemplo, um estudo desenvolveu células NCI-H460 resistentes ao pemetrexedo, um agente antifolato multiobjectivo, para estudar os mecanismos moleculares subjacentes à resistência ao pemetrexedo em células de cancro do pulmão de células não pequenas [5].
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Publicações de investigação com células NCI-H460
Aqui estão algumas publicações de investigação interessantes sobre a linha celular de carcinoma do pulmão NCI-H460.
Este estudo no Molecules (2023) propôs que um α-1,6-glucano natural, BBWPW, do feijão preto inibe a proliferação de células NCI-H460 através da regulação da via PI3K/AKT/MAPK.
Este artigo na Phytomedicine (2019) estudou que o dioscin-6′-O-acetato, um novo composto natural, exerce um efeito antiproliferativo nas células de cancro do pulmão NCI-H460.
A pesquisa BMC Pulmonary Medicine (2020) afirma que o microRNA-425-5p aumenta a tumorigénese do carcinoma do pulmão através da via PTEN/PI3K/AKT.
Este artigo da Molecular Medicine Reports (2017) propôs o potencial antitumoral e os mecanismos subjacentes ao composto quinalizarina nas células NCI-H460 e noutras células de cancro do pulmão.
Esta pesquisa no Food and Function (2019) destaca o potencial efeito anticancerígeno do Eucalyptus globulus labill. extrair usando células NCI-H460. Os resultados mostraram que o extrato da planta apresentou estes efeitos aumentando a expressão de p53 das células NCI-H460 e modulando o perfil do ciclo celular.
Recursos para a linha de células NCI-H460: Protocolos, vídeos e muito mais
Aqui estão alguns recursos online que apresentam as células de cancro do pulmão NCI-H460.
- Transfecção de células NCI-H460: Este tutorial em vídeo é um guia passo a passo para transfectar células NCI-H460 com ADN plasmídico.
As ligações seguintes contêm informações imperativas sobre a cultura de células H460.
- Células NCI-H460: Este sítio Web fornece informações importantes sobre os meios de cultura das células NCI-H460, procedimentos de subcultura, congelação e descongelação.
- Passagem de células NCI-H460: Este documento orientá-lo-á sobre a passagem e subcultura da linha de células NCI-H460. Além disso, também o ajudará a aprender o protocolo de transfecção para células NCI-H460.
Explorar a linha de células NCI-H460: Perguntas mais frequentes e informações
Referências
- Hu, C., et al., NUCKS Promove a Proliferação, Migração e Invasão de Células de Cancro do Pulmão Através da Via de Sinalização Pi3k/Akt. Medicina Clínica e Investigativa, 2021. 44(2): p. E55-61.
- Qi, X., et al., EGPI-1, um novo inibidor da interação eIF4E/eIF4G, inibe o crescimento das células do cancro do pulmão e a angiogénese através da via de sinalização Ras/MNK/ERK/eIF4E. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotinib exerce efeitos anticancerígenos em células de cancro do pulmão com mutação KRAS através da supressão da via MEK/ERK. Cancer Management and Research, 2020: p. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Carnosic acid exhibits antiproliferative and proapoptotic effects in tumoral NCI-H460 and nontumoral IMR-90 lung cells. Jornal de Toxicologia e Saúde Ambiental, Parte A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al., Estabelecimento e caraterização de células NCI-H460/PMT resistentes ao pemetrexed. Agentes anticancerígenos em química medicinal (anteriormente química medicinal atual - agentes anticancerígenos), 2019. 19(6): p. 731-739.