Células HL-60: Fundamentos da investigação sobre a leucemia mielóide aguda
A HL-60 é uma linha celular imortal de leucemia humana. É amplamente utilizada para estudar a biologia do cancro e para explorar a eficácia de medicamentos anticancerígenos. Além disso, também pode ser utilizada para compreender os diferentes mecanismos celulares e moleculares envolvidos na proliferação e diferenciação das células leucémicas.
- Meio de crescimento
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- Tempo de duplicação
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- Tipo de crescimento
- Adesivo
- Nível de biossegurança
- BSL-1
- Disponível em
- Cytion — Encomendar HL-60
- Linha celular HL-60: Origem e informações gerais
- Informações sobre a cultura celular HL-60
- Células HL-60: Vantagens e desvantagens
- Aplicações da linha celular HL-60 na investigação: do cancro à imunologia e além
- Linha celular HL-60 para a sua investigação
- Células HL-60: Publicações de investigação
- Recursos da linha celular HL-60: protocolos, vídeos e muito mais
- Linha celular HL-60: Perguntas frequentes essenciais para investigadores
- Referências
- Perguntas frequentes
Linha celular HL-60: Origem e informações gerais
A linha celular HL-60 serve como um modelo crucial na investigação hematológica, oferecendo insights profundos sobre a natureza e o tratamento da leucemia promielocítica aguda. Esta publicação no blogue aprofunda as origens e as características distintivas da linha celular HL-60, esclarecendo o seu papel crucial na investigação médica e nos desenvolvimentos terapêuticos.
A HL-60 foi inicialmente estabelecida a partir das células leucémicas de uma mulher caucasiana de 36 anos diagnosticada com leucemia promielocítica aguda. Este trabalho pioneiro foi conduzido por S.J. Collins e a sua equipa, marcando um avanço significativo, uma vez que a HL-60 foi a primeira linha celular de leucemia mielóide a ser isolada e cultivada com sucesso em suspensão. Esta conquista facilitou inúmeras oportunidades de investigação no estudo da leucemia e de outras doenças relacionadas. Em termos de características físicas, as células HL-60 apresentam uma morfologia linfoblástica e são conhecidas por crescerem em suspensão, apresentando uma forma arredondada. O tamanho destas células varia, com diâmetros que vão dos 9 aos 25 μm, refletindo a sua heterogeneidade. A nível genómico, a linha celular HL-60 é predominantemente pseudodiplóide, com um número modal de cromossomas de 43. Curiosamente, uma pequena percentagem (6,2%) das células apresenta um componente 2S, acrescentando mais uma camada de complexidade à sua composição genética [1].
Compreender estes aspetos fundamentais das células HL-60 não só melhora o nosso conhecimento sobre a leucemia a nível celular, como também apoia os esforços de investigação em curso para descobrir novas modalidades de tratamento. Nas secções seguintes, exploraremos como as propriedades únicas da linha celular HL-60 contribuíram para avanços significativos na investigação médica.
Informações sobre a cultura de células HL-60
A cultura de células HL-60 é simples e fácil. Esta secção irá familiarizá-lo com noções básicas, tais como: Qual é o tempo de duplicação da linha celular HL-60? A cultura de células HL-60 é aderente ou em suspensão? Qual é a densidade de sementeira da linha celular HL-60? Que meio é utilizado para o crescimento das HL-60?
Tempo de duplicação:
O tempo de duplicação das células HL-60 é de aproximadamente 36 a 48 horas.
Adesiva ou em suspensão:
As células HL-60 crescem em culturas em suspensão.
Densidade de sementeira:
Estas células são semeadas a uma densidade de 1 x 10⁶ células/ml quando subcultivadas e a 2 x 10⁵ células/ml quando se inicia uma nova cultura.
Meio de crescimento:
Utiliza-se o meio de crescimento RPMI 1640 com adição de 10 % de FBS e 2,5 mM de L-glutamina para cultivar células HL-60. O meio deve ser renovado 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As células HL-60 são cultivadas numa incubadora humidificada a uma temperatura de 37 °C e com um fornecimento de 5 % de CO2.
Armazenamento:
As células HL-60 são armazenadas a uma temperatura inferior a -150 °C ou na fase de vapor de nitrogénio líquido para manter o máximo número de células viáveis.
Meio e processo de congelação:
Os meios de congelamento CM-1 ou CM-ACF são utilizados para o congelamento das células HL-60. É preferível um método de congelamento lento para o congelamento das células HL-60.
Processo de descongelação:
O frasco congelado de células HL-60 é agitado rapidamente num banho-maria a uma temperatura de 37 °C. Posteriormente, as células são centrifugadas para remover o meio de congelação. É adicionado um novo meio de cultura e as células são ressuspensas para serem transferidas para um frasco para crescimento.
Nível de biossegurança:
Recomenda-se o nível de biossegurança 1 para o manuseamento de culturas de HL-60.
Células HL-60: vantagens e desvantagens
Antes de trabalhar com qualquer linha celular, poderá querer conhecer as suas vantagens e desvantagens. Esta secção do artigo abordará alguns prós e contras da utilização de células HL-60.
Vantagens
Algumas vantagens proeminentes da linha celular HL-60 são:
- Versatilidade: As células HL-60 têm a capacidade de se diferenciar em vários tipos de células, incluindo monócitos, macrófagos e granulócitos, em condições de crescimento adequadas. Isto torna-as úteis para estudar a diferenciação celular e outros processos celulares.
- Fácil de cultivar: as células HL-60 são fáceis de cultivar e manter em culturas em suspensão, tornando-as uma ferramenta conveniente para estudar vários processos celulares.
- Modelo in vitro de leucemia: Estas células foram obtidas de um doente com leucemia mielóide aguda e, por isso, apresentam características genéticas e moleculares semelhantes às da doença.
Desvantagens
As desvantagens da linha celular HL-60 são:
- Potencial de diferenciação limitado: as HL-60 podem diferenciar-se em algumas linhagens mieloides em resposta a estímulos, mas o seu potencial de diferenciação é limitado em comparação com as células primárias.
Aplicações da linha celular HL-60 na investigação: do cancro à imunologia e além
A linha celular HL-60, derivada de um doente com leucemia promielocítica aguda, tornou-se uma pedra angular na investigação médica devido à sua versatilidade e facilidade de cultura. Estas culturas de baixa manutenção são fundamentais numa miríade de aplicações de investigação, e pretendemos explorar algumas das mais significativas, incorporando uma ampla gama de palavras-chave de investigação para fornecer uma visão geral abrangente.
Investigação sobre o cancro
No domínio da oncologia, a linha celular HL-60 tem sido fundamental para desvendar as complexidades da sinalização das células cancerígenas, aprofundar a nossa compreensão da expressão de oncogenes e impulsionar a descoberta de novos alvos terapêuticos. Esta linha celular faz parte do painel de linhas celulares de leucemia utilizado para o rastreio de novos agentes quimioterapêuticos. Um exemplo marcante é a utilização de células HL-60 para determinar as propriedades antileucémicas de compostos extraídos de organismos marinhos, revelando efeitos tanto antiproliferativos como pró-apoptóticos [2]. Além disso, a linha celular facilitou o estudo de vias de sinalização fundamentais, como a JAK/STAT, e a sua influência na proliferação de células leucémicas, a par da avaliação do potencial terapêutico de compostos bioativos como a timoquinona [3].
Imunologia
As células HL-60 constituem um sistema in vitro robusto para investigar várias respostas imunitárias, incluindo o complexo processo de quimiotaxia e a regulação da expressão de mediadores imunitários essenciais. Estas células podem diferenciar-se em células mieloides semelhantes a macrófagos e neutrófilos, servindo como um modelo versátil para investigar vias inflamatórias. Por exemplo, células semelhantes a macrófagos derivadas de HL-60 foram utilizadas para explorar o potencial anti-inflamatório de fitoquímicos do género Brassica [4]. Noutro estudo, a diferenciação de células HL-60 em células semelhantes a neutrófilos permitiu aos investigadores identificar genes essenciais para a diferenciação celular e funções imunitárias relacionadas [5].
Descoberta de medicamentos
As capacidades de diferenciação mieloide da HL-60 também têm sido aproveitadas na descoberta de fármacos, particularmente na identificação de candidatos que possam potencialmente modular a via de diferenciação, o que é crucial no tratamento da leucemia. Isto é exemplificado por estudos que utilizaram a linha celular HL-60 para avaliar o potencial anticancerígeno de produtos naturais [6].
Além disso, a linha celular HL-60 é utilizada para estudar vários aspetos da biologia das linhas celulares mieloides, tais como compreender como o tratamento com agentes como o ácido retinóico pode conduzir à diferenciação monocítica, ou como estas células imitam os neutrófilos primários na geração de armadilhas extracelulares. A utilização do modelo na elucidação dos eventos moleculares das neoplasias hematológicas é ainda alargada pela sua aplicação em estudos de painéis de mutações celulares, particularmente no contexto da análise de hotspots do p53 na leucemia.
Para aqueles que exploram a mecânica celular, o tempo de duplicação da HL-60 e a sua resposta à eletroporação em canais microfluídicos, a linha celular oferece uma plataforma fiável para investigação.
Linha celular HL-60 para a sua investigação
Células HL-60: Publicações de investigação
Existem vários estudos de investigação disponíveis sobre as células HL-60. Aqui, listamos alguns exemplos notáveis:
Este artigo de investigação propôs o efeito antitumoral de um composto, o Stigmast-5-en-3-ol, nas células de leucemia HL-60 e nas células de cancro da mama MCF-7.
Este estudo descreve o papel da sinalização JAK/STAT na proliferação das células HL-60. Além disso, os investigadores estudam o potencial terapêutico do composto timoquinona utilizando esta linha celular de leucemia. O composto inibe a proliferação celular e induz a morte celular ao reativar a expressão dos reguladores negativos da cascata JAK/STAT.
Este estudo utilizou células HL-60 para derivar um modelo de células semelhantes a macrófagos, com o objetivo de investigar a atividade anti-inflamatória dos compostos da planta Brassica.
Este estudo, publicado na revista International Immunopharmacology, desenvolveu um mimético de células neutrófilas a partir da linha celular HL-60 utilizando dimetilsulfóxido. O estudo observou que o gene ERK está envolvido na diferenciação destas células.
Este artigo de investigação analisa o potencial anticancerígeno de compostos polifenólicos vegetais, nomeadamente o ácido gálico e o ácido elágico, em células de leucemia HL-60 sensíveis e resistentes aos medicamentos.
Linha celular HL-60 Recursos: Protocolos, Vídeos e Mais
Estão disponíveis vários recursos educativos online sobre a linha celular HL-60. Esta secção irá abordar alguns recursos que descrevem a cultura e a transfecção desta linha celular.
Protocolos de cultura celular
Os recursos que descrevem os métodos de cultura de células HL-60 são:
- Propagação de HL-60: Este documento fornece informações sobre a subcultura de células HL-60.
- Linha celular HL-60: Este site contém informações básicas sobre as células HL-60 e protocolos, incluindo cultura, congelamento e descongelamento de células.
Protocolos de transfecção
Aqui estão alguns recursos que descrevem os métodos de transfecção escolhidos para as células HL-60.
- Transfecção de células HL-60: Esta ligação apresenta um procedimento detalhado de transfecção para células de leucemia HL-60.
- Transfecção transitória de células HL-60: Este documento contém informações úteis sobre a linha celular e apresenta um protocolo detalhado para a transfecção transitória de células HL-60.
Vídeos relacionados com a linha celular HL-60
Existem recursos de vídeo muito limitados sobre as células HL-60.
- Passagem de células HL-60: Este vídeo explica o protocolo para subcultivo de células HL-60.
Esperamos que este artigo lhe forneça informações básicas sobre a cultura e manutenção da linha celular HL-60. Além disso, pode aprofundar o seu conhecimento sobre as vantagens da utilização destas células de leucemia na investigação. Se tenciona utilizar esta linha celular, encomende-a através de nós.
Linha celular HL-60: Perguntas frequentes essenciais para investigadores
A linha celular HL-60 é uma linha celular de leucemia promielocítica derivada de um doente com leucemia promielocítica aguda. Esta linha celular é amplamente utilizada na investigação para estudar a diferenciação das células mieloides e a expressão de oncogenes.
O ácido retinóico induz a diferenciação na linha celular HL-60, levando as células a amadurecerem e a tornarem-se semelhantes a granulócitos. Este processo é fundamental para o estudo dos mecanismos subjacentes à diferenciação mieloide.
O soro é um componente crucial do meio de cultura das células hematopoiéticas, fornecendo fatores de crescimento e nutrientes essenciais necessários para a proliferação e manutenção das células HL-60 em cultura.
Sim, a linha celular HL-60 é capaz de realizar quimiotaxia, que consiste no movimento das células em resposta a estímulos químicos. Isso torna-as úteis para ensaios de quimiotaxia e para a compreensão da migração celular.
A linha celular HL60, que apresenta expressão de oncogenes celulares, serve como sistema modelo para explorar a regulação da expressão de oncogenes e o seu papel na leucemogénese.
A linha celular HL-60 é de grande valor nos estudos de biologia celular, especialmente para a investigação do ciclo celular, dos processos de diferenciação celular e dos eventos moleculares que conduzem à leucemia.
Os painéis de linhas celulares leucémicas permitem a realização de estudos comparativos de várias linhas celulares leucémicas, incluindo a sua composição genética, perfis de mutação, resposta a medicamentos e as vias moleculares envolvidas na leucemogénese, como a via MAPK.
Os certificados de análise e de origem podem normalmente ser descarregados ou solicitados ao fornecedor ou ao repositório que disponibiliza a linha celular HL-60, garantindo que os investigadores recebem células autenticadas e isentas de contaminantes para os seus estudos.
A linha celular HL-60 pode ser diferenciada para adquirir características semelhantes às dos neutrófilos primários, incluindo a capacidade de formar armadilhas extracelulares, permitindo que os investigadores as utilizem como modelo substituto para estudar o comportamento e a função dos neutrófilos.
As células HL-60 são utilizadas como modelo in vitro para o estudo da leucemia promielocítica aguda, da biologia das linhas celulares mieloides e dos efeitos de vários compostos na diferenciação e proliferação. São também utilizadas em experiências que investigam respostas celulares, tais como a quimiotaxia, a expressão de oncogenes e o impacto das mutações nos processos celulares.
A abreviatura «HL-60» significa «Leucemia Humana 60». Refere-se à 60.ª linha celular criada a partir de doentes com leucemia na altura do seu desenvolvimento. A sigla «HL» indica que se trata de células de leucemia humana.
O tempo de duplicação das células HL-60 é de aproximadamente 36 a 48 horas em condições de crescimento ideais. No entanto, este valor pode variar em função das condições de cultura e do número de passagens das células.
Quando as células HL-60 são tratadas com 12-miristato-13-acetato de forbol (PMA), diferenciam-se normalmente num tipo celular semelhante aos macrófagos ou monócitos. Esta diferenciação faz parte do estudo das vias de diferenciação monocítica e da compreensão dos mecanismos de diferenciação das células mieloides.
Referências
- Fleck, R., S. Romero-Steiner e M. Nahm, Utilização da linha celular HL-60 para medir a capacidade opsonizante dos anticorpos pneumocócicos. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): p. 19-27.
- Fernando, I.S., et al., Efeitos apoptóticos e antiproliferativos do Stigmast-5-en-3-ol da Dendronephthya gigantea em células HL-60 de leucemia humana e células MCF-7 de cancro da mama humano. Toxicologia in Vitro, 2018. 52: p. 297-305.
- Almajali, B., et al., A timoquinona suprime a proliferação celular e potencia a apoptose das células de leucemia HL60 através da reexpressão de reguladores negativos da via JAK/STAT. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021. 22(3): p. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J., et al., Análise do potencial anti-inflamatório dos compostos bioativos da Brassica num modelo de células semelhantes a macrófagos humanos derivadas de células HL-60. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: p. 112804.
- Wang, D., et al., A ERK está envolvida na diferenciação e função de células semelhantes a neutrófilos HL-60 induzidas por dimetilsulfóxido, que imitam neutrófilos inflamatórios. International Immunopharmacology, 2020. 84: p. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Atividade antileucémica de compostos bioativos derivados de Brassica em células de leucemia mielóide HL-60. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): p. 13400.