Células AGS - Exploração das células AGS de adenocarcinoma gástrico em estudos sobre o cancro
As células AGS constituem uma linha celular de adenocarcinoma gástrico humano amplamente utilizada na investigação biomédica. Em particular, são utilizadas para estudar a biologia do cancro gástrico, incluindo o crescimento, desenvolvimento e progressão do tumor, bem como intervenções terapêuticas. Além disso, são utilizadas para investigar as interações hospedeiro-patógeno.
- Meio de crescimento
- Para a cultura de células AGS, utiliza-se meio DMEM contendo 10% de FBS, 4 mM de L-glutamina, 4,5 g/L de glicose, 1,5 g/L de NaHCO3 e 1,0 mM de piruvato de sódio. O meio deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana.
- Tempo de duplicação
- O tempo de duplicação das células AGS varia entre 24 e 48 horas.
- Tipo de crescimento
- As células AGS são aderentes. Crescem em monocamadas.
- Nível de biossegurança
- BSL-2
- Disponível em
- Cytion — Encomendar AGS
- Características gerais e origem das células AGS
- Informações sobre a cultura da linha celular AGS
- Linha celular AGS: Vantagens e Limitações
- Aplicações das células AGS
- 5. Publicações de investigação sobre a linha celular AGS
- Recursos para a linha celular AGS: protocolos, vídeos e muito mais
- Perguntas frequentes
Características gerais e origem das células AGS
É necessário conhecer a origem e as características gerais de uma linha celular antes de começar a trabalhar com ela. Esta secção abordará o seguinte: O que são as células AGS? Qual é a origem da célula AGS? Qual é a morfologia da linha celular cancerígena AGS?
- A linha celular AGS foi derivada do tecido gástrico de uma mulher caucasiana de 54 anos com adenocarcinoma gástrico. Foi isolada em 1979 [1].
- As células AGS apresentam uma morfologia de tipo epitelial.
- As células epiteliais gástricas AGS são hiperdiplóides. O número modal de cromossomas para as células AGS é 49, o que ocorre em quase 60% das células. A poliploidia também ocorre em aproximadamente 3,6% das células.
Informações sobre o cultivo da linha celular AGS
Para o manuseamento e gestão adequados de uma linha celular, é necessário conhecer os conceitos básicos de cultura. Em particular, deve aprender: Qual é o tempo de duplicação das células AGS? Qual é o meio de cultura das células AGS? Como se realiza a subcultura de células AGS? Que meios de congelamento são utilizados para as células epiteliais gástricas AGS?
Pontos-chave para a cultura de células AGS
Tempo de duplicação:
O tempo de duplicação das células AGS varia entre 24 e 48 horas.
Adesivas ou em suspensão:
As células AGS são aderentes. Crescem em monocamadas.
Densidade de sementeira:
As células AGS são semeadas a uma densidade celular de 1 x 10⁴ células/cm². As células formam uma monocamada confluente a esta densidade em 3 a 5 dias. Após a remoção do meio antigo, as células são lavadas com PBS 1x e incubadas com solução de dissociação Accutase. As células desprendidas foram ressuspensas em meio de cultura e centrifugadas. O sedimento celular foi novamente ressuspenso e, após a contagem das células AGS, estas são dispensadas para um novo frasco para crescimento.
Meio de crescimento:
Para a cultura de células AGS, utiliza-se meio DMEM contendo 10% de FBS, 4 mM de L-glutamina, 4,5 g/L de glicose, 1,5 g/L de NaHCO3 e 1,0 mM de piruvato de sódio. O meio deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As células AGS são mantidas numa incubadora humidificada (a uma temperatura de 37 °C) com um fornecimento de 5% de CO2.
Armazenamento:
As células AGS congeladas são mantidas em congeladores elétricos a temperaturas inferiores a -150 °C ou na fase de vapor de nitrogénio líquido por um período mais prolongado.
Processo de congelação e meio:
Utiliza-se o meio CM-1 ou CM-ACF para congelar as células AGS. O congelamento das células é realizado através de um processo de congelamento lento que permite apenas uma descida de 1 °C na temperatura por minuto e protege a viabilidade celular.
Processo de descongelação:
As células epiteliais gástricas congeladas são rapidamente agitadas num banho-maria a 37 °C durante 40 a 60 segundos. As células descongeladas são ressuspensas em meios de cultura frescos e transferidas para novos frascos para crescimento. Após 24 horas de incubação, o meio é renovado para remover os componentes do meio de congelamento. Em contrapartida, as células descongeladas são centrifugadas e os elementos do meio de congelamento são removidos. Em seguida, as células colhidas são novamente ressuspensas e distribuídas no frasco que contém o meio de cultura.
Nível de biossegurança:
São essenciais instalações laboratoriais de nível de biossegurança 2 para a cultura de células AGS.
Linha celular AGS: Vantagens e limitações
Esta secção do artigo irá esclarecer algumas das principais vantagens e limitações associadas às células AGS.
Vantagens
As principais vantagens das células epiteliais gástricas AGS são:
Fácil de cultivar
A linha celular de carcinoma gástrico AGS é fácil de manter em laboratórios de cultura celular. Não tem requisitos de cultura celular complicados nem exigentes. Além disso, apresenta boas características de crescimento, tornando-a a escolha ideal para o estudo da biologia do cancro gástrico.
Relevância para o cancro gástrico
As células AGS foram derivadas de adenocarcinoma gástrico humano, o que as torna amplamente utilizadas para estudar a biologia do carcinoma gástrico e as intervenções terapêuticas.
Limitações
A limitação associada à linha celular AGS é:
Modelo celular in vitro
As células AGS são cultivadas em laboratórios de investigação biomédica em condições artificiais. Por conseguinte, podem não replicar totalmente o microambiente do cancro gástrico in vivo e outras interações celulares e moleculares.
Aplicações das células AGS
As células AGS são especificamente utilizadas para estudar a biologia do cancro gástrico. Têm muitas outras aplicações promissoras no campo biomédico. Algumas das aplicações de investigação interessantes das células AGS são:
- Estudo do cancro gástrico: as células AGS são uma excelente ferramenta de investigação para estudar os mecanismos celulares e moleculares subjacentes ao crescimento, metástase e invasão do cancro gástrico. Os investigadores também utilizam células epiteliais gástricas AGS para estudar diferentes processos celulares, mutações genéticas e vias de sinalização no desenvolvimento do cancro gástrico. Um estudo publicado na Oncology Reports (2019) descobriu que o microRNA-183-5p.1 estimula a proliferação, migração e invasão das células tumorais ao inibir a cascata de sinalização Bcl 2/P53. Além disso, também regula negativamente o gene TPM1 para exercer estes efeitos. Assim, tanto o microRNA como o TPM1 são sugeridos como alvos moleculares eficazes para o desenvolvimento de terapias direcionadas contra o cancro gástrico [2].
- Triagem de medicamentos: As células AGS têm sido comumente utilizadas para a triagem de novos e eficazes medicamentos contra o cancro gástrico. Os investigadores avaliam a citotoxicidade e a eficácia de potenciais medicamentos utilizando a linha celular AGS. Também foram realizados estudos para identificar novos alvos moleculares e desenvolver novas terapias direcionadas para combater os carcinomas gástricos. Uma investigação realizada em 2021 utilizou células de cancro gástrico AGS e estudou o efeito terapêutico do fármaco paclitaxel. Os resultados revelaram que o paclitaxel induz uma catástrofe mitótica, um mecanismo integral da apoptose ou morte celular nas células AGS. Além disso, também promoveu a autofagia nas células de cancro gástrico [3].
- Interações hospedeiro-patógeno: A linha celular de cancro AGS também estuda as interações hospedeiro-patógeno. Isto ajuda os investigadores a compreender os mecanismos celulares e as respostas envolvidas numa infeção. Por exemplo, um estudo realizado em 2020 observou que pequenos ARNs não codificantes presentes nas vesículas da membrana externa da Helicobacter pylori diminuem a secreção de interleucina 8 nas células AGS humanas [4].
5. Publicações científicas sobre a linha celular AGS
Esta secção do artigo abordará algumas publicações de investigação interessantes e mais citadas que abordam as células AGS.
Este estudo publicado na revista Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) propôs que o salidrosídeo, um composto natural, induz autofagia protetora e morte celular em células epiteliais gástricas AGS através da modulação da via de sinalização PI3K/AKT/mTOR.
Este estudo foi publicado na revista Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). Explorou os efeitos anticancerígenos sinérgicos do polissacarídeo de astrágalo e do fármaco apatinib em células AGS. Os resultados do estudo revelaram que o astrágalo potencia os efeitos antitumorais do apatinib através da supressão da sinalização AKT.
Esta investigação, publicada no Journal of Ethnopharmacology (2018), propôs que a curcuzedoalida, um composto natural da planta Curcuma zedoaria Roscoe, contribui para o seu potencial citotóxico contra as células AGS.
Esta publicação na revista Gene (2018) propôs que a regulação positiva do FOXA1 suprime a proliferação das células de adenocarcinoma gástrico AGS, bem como a transição epitelial-mesenquimal (EMT) e a invasão.
Este artigo de investigação foi publicado no International Journal of Medical Microbiology em 2020. Neste estudo, foram utilizadas células AGS para estudar as interações hospedeiro-patógeno. Os resultados revelaram que o Helicobacter pylori contém algum RNA não codificante nas suas vesículas da membrana externa que afeta os níveis de IL-8 nas células AGS.
Recursos para a linha celular AGS: protocolos, vídeos e muito mais
Seguem-se alguns recursos sobre as células AGS.
- Protocolo de transfecção de células AGS: Este vídeo é um guia passo a passo para aprender o protocolo de transfecção de células epiteliais gástricas AGS.
A ligação seguinte contém o protocolo de cultura de células AGS.
- Protocolo de cultura de células AGS: Este site contém informações úteis sobre meios de cultura de células AGS e protocolos de cultura celular. Resumidamente, fornece um protocolo para a subcultura de células epiteliais gástricas AGS e para o manuseamento de culturas AGS em proliferação e criopreservadas.
- Subcultura de células AGS: Este site explica em pormenor o procedimento de subcultura de células AGS.
Referências
- Phuc, B.H., et al., Genómica comparativa de duas estirpes vietnamitas de Helicobacter pylori, CHC155 de um doente com cancro gástrico não cardíaco e VN1291 de um doente com úlcera duodenal. Scientific Reports, 2023. 13(1): p. 8869.
- Lin, J., et al., O miRNA-183-5p.1 promove a migração e invasão de células AGS de cancro gástrico ao visar o TPM1. Corrigenda em /10.3892/or.2020.7902. Oncology Reports, 2019. 42(6): p. 2371-2381.
- Khing, T.M., et al., O efeito do paclitaxel na apoptose, autofagia e catástrofe mitótica em células AGS. Scientific Reports, 2021. 11(1): p. 23490.
- Zhang, H., et al., Os sncRNAs encapsulados por vesículas da membrana externa do Helicobacter pylori atenuam a secreção de IL-8 em células humanas. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): p. 151356.