Células AGS - Exploração do adenocarcinoma gástrico Células AGS em estudos sobre o cancro
As célulasAGS constituem uma linha celular de adenocarcinoma gástrico humano que é amplamente utilizada na investigação biomédica. Em particular, é utilizada para estudar a biologia do cancro gástrico, incluindo o crescimento, o desenvolvimento, a progressão e as intervenções terapêuticas do tumor. Além disso, é utilizada para investigar as interações entre o hospedeiro e o agente patogénico.
Este artigo abordará os fundamentos das células epiteliais gástricas AGS. Em particular, abordará
- Caraterísticas gerais e origem das células AGS
- Informações sobre a cultura da linha de células AGS
- Linha celular AGS: Vantagens e limitações
- Aplicações das células AGS
- Publicações de investigação sobre a linha celular AGS
- Recursos para a linha de células AGS: Protocolos, vídeos e muito mais
1.caraterísticas gerais e origem das células AGS
É necessário conhecer a origem e as caraterísticas gerais de uma linha celular antes de começar a trabalhar com ela. Esta secção abordará o seguinte: O que são células AGS? Qual é a origem da célula AGS? Qual é a morfologia da linha celular de cancro AGS?
- A linha celular AGS foi derivada do tecido gástrico de uma mulher caucasiana de 54 anos com adenocarcinoma gástrico. Foi isolada em 1979 [1].
- As células AGS têm uma morfologia semelhante à epitelial.
- As células epiteliais gástricas AGS são hiperdiplóides. O número modal de cromossomas das células AGS é 49, o que ocorre em quase 60% das células. A poliploidia também ocorre em aproximadamente 3,6% das células.
2.informações de cultura sobre a linha celular AGS
Para um manuseamento e gestão adequados de uma linha celular, é necessário conhecer os seus conceitos básicos de cultura. Em particular, deve saber Qual é o tempo de duplicação das células AGS? O que é o meio de cultura das células AGS? Como se faz a subcultura de células AGS? Que meios de congelação são utilizados para as células epiteliais gástricas AGS?
Pontos-chave para a cultura de células AGS
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Tempo de duplicação: |
O tempo de duplicação das células AGS varia entre 24 e 48 horas. |
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Aderentes ou em suspensão: |
As células AGS são aderentes. Crescem em monocamadas. |
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Densidade de sementeira: |
As células AGS são semeadas a uma densidade celular de 1 x104 células/cm2. As células formam uma monocamada confluente a esta densidade em 3 a 5 dias. Após a remoção dos meios antigos, as células são lavadas com 1 x PBS e incubadas com a solução de dissociação Accutase. As células separadas foram ressuspensas em meios de cultura e centrifugadas. O pellet de células foi novamente ressuspendido e, após a contagem de células AGS, são dispensadas no novo frasco para crescimento. |
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Meio de cultura: |
O meio DMEM contendo 10% de FBS, 4 mM de L-Glutamina, 4,5 g/L de Glicose, 1,5 g/L de NaHCO3 e 1,0 mM de Piruvato de Sódio é utilizado para a cultura de células AGS. O meio deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana. |
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Condições de crescimento: |
As células AGS são mantidas numa incubadora humidificada (a uma temperatura de 37°C) com um fornecimento de 5% de CO2. |
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Armazenamento: |
As células AGS congeladas são mantidas em congeladores eléctricos a uma temperatura inferior a -150°C ou na fase de vapor do azoto líquido durante mais tempo. |
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Processo e meio de congelação: |
O meio CM-1 ou CM-ACF é utilizado para congelar as células AGS. A congelação das células é efectuada através de um processo de congelação lento que permite apenas uma queda de temperatura de 1°C por minuto e protege a viabilidade celular. |
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Processo de descongelação: |
As células epiteliais gástricas congeladas são rapidamente agitadas num banho de água a 37°C durante 40 a 60 segundos. As células descongeladas são ressuspendidas em meios de cultura frescos e colocadas em novos frascos para crescimento. Após 24 horas de incubação, o meio é renovado para remover os componentes do meio de congelação. Contrariamente a isto, as células descongeladas são centrifugadas e os elementos do meio de congelação são removidos. Em seguida, as células colhidas são novamente ressuspensas e distribuídas no frasco que contém o meio de cultura. |
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Nível de Biossegurança: |
Os laboratórios de nível de biossegurança 2 são essenciais para a cultura de células AGS. |
3.linha celular AGS: Vantagens e limitações
Esta secção do artigo irá esclarecer algumas das principais vantagens e limitações associadas às células AGS.
Vantagens
As principais vantagens das células epiteliais gástricas AGS são
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Fácil de cultivar |
A linha celular de carcinoma gástrico AGS é de fácil manutenção em laboratórios de cultura de células. Não tem quaisquer requisitos de cultura de células complicados e exigentes. Além disso, apresenta boas caraterísticas de crescimento, o que a torna uma escolha ideal para estudar a biologia do cancro gástrico. |
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Relevância para o cancro gástrico |
As células AGS foram derivadas de adenocarcinoma gástrico humano, o que as torna amplamente utilizadas para estudar a biologia do carcinoma gástrico e intervenções terapêuticas. |
Limitações
As limitações associadas à linha celular AGS são
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Modelo celular in vitro |
As células AGS são cultivadas em laboratórios de investigação biomédica em condições artificiais. Por conseguinte, podem não reproduzir totalmente o microambiente do cancro gástrico in vivo e outras interações celulares e moleculares. |
4.aplicações das células AGS
As células AGS são especificamente utilizadas para estudar a biologia do cancro gástrico. Têm muitas outras aplicações promissoras no domínio biomédico. Algumas das aplicações de investigação interessantes das células AGS são
- Estudo do cancro gástrico: As células AGS são um excelente instrumento de investigação para estudar os mecanismos celulares e moleculares subjacentes ao crescimento, metástases e invasão do cancro gástrico. Os investigadores também utilizam células AGS epiteliais gástricas para estudar diferentes processos celulares, mutações genéticas e vias de sinalização no desenvolvimento do cancro gástrico. Um estudo da Oncology Reports (2019) descobriu que o microRNA-183-5p.1 incentiva a proliferação, migração e invasão de células tumorais ao inibir a cascata de sinalização Bcl 2/P53. Além disso, também regula negativamente o gene TPM1 para exercer esses efeitos. Assim, tanto o microRNA como o TPM1 são sugeridos como alvos moleculares eficazes para o desenvolvimento de terapias específicas contra o cancro gástrico [2].
- Rastreio de medicamentos: As células AGS têm sido habitualmente utilizadas para a análise de novos e eficazes medicamentos contra o cancro gástrico. Os investigadores avaliam a citotoxicidade e a eficácia de potenciais medicamentos utilizando a linha celular AGS. Foram também realizados estudos para identificar novos alvos moleculares e desenvolver novas terapias direcionadas para combater os carcinomas gástricos. Uma investigação realizada em 2021 utilizou células de cancro gástrico AGS e estudou o efeito terapêutico do medicamento paclitaxel. Os resultados revelaram que o paclitaxel induz uma catástrofe mitótica, um mecanismo integral de apoptose ou morte celular nas células AGS. Além disso, também promoveu a autofagia nas células do cancro gástrico [3].
- Interações entre o hospedeiro e o agente patogénico: A linha celular de cancro AGS também estuda as interações entre o hospedeiro e o agente patogénico. Isto ajuda os investigadores a compreender os mecanismos e as respostas celulares envolvidos numa infeção. Um estudo realizado em 2020 observou que pequenos ARN não codificantes presentes nas vesículas da membrana externa da Helicobacter pylori diminuem a secreção de interleucina 8 em células AGS humanas [4].
5.publicações de investigação sobre a linha celular AGS
Esta secção do artigo aborda algumas publicações de investigação interessantes e mais citadas sobre as células AGS.
Este estudo em Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) propôs que o salidroside, um composto natural, induz autofagia protetora e morte celular em células AGS epiteliais gástricas através da modulação da via de sinalização PI3K/AKT/mTOR.
Este estudo foi publicado na revista Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). Explorou os efeitos anticancerígenos sinérgicos do polissacárido de astragalus e do fármaco apatinib em células AGS. Os resultados do estudo revelaram que o astragalus aumenta os efeitos antitumorais do apatinib através da supressão da sinalização AKT.
Esta investigação no Journal of Ethnopharmacology (2018) propôs que o curcuzedoalide, um composto natural da planta Curcuma zedoaria Roscoe, contribui para o seu potencial de citotoxicidade contra as células AGS.
Esta publicação em Gene (2018) propôs que a regulação positiva de FOXA1 suprime a proliferação de células de adenocarcinoma gástrico AGS e a transição epitelial para mesenquimal (EMT) e invasão.
Este artigo de pesquisa foi publicado no International Journal of Medical Microbiology em 2020. Neste estudo, as células AGS foram utilizadas para estudar as interações entre o hospedeiro e o agente patogénico. Os resultados revelaram que a Helicobacter pylori contém alguns ARN não codificantes nas suas vesículas de membrana externa que afectam os níveis de IL-8 nas células AGS.
6.recursos para a linha de células AGS: Protocolos, vídeos e muito mais
Seguem-se alguns recursos sobre as células AGS.
- Protocolo de transfecção de células AGS: Este vídeo é um guia passo a passo para aprender o protocolo de transfecção para células AGS epiteliais gástricas.
A seguinte ligação contém o protocolo de cultura de células AGS.
- Protocolo de cultura de células AGS: Este sítio Web contém informações úteis sobre os meios celulares AGS e os protocolos de cultura de células. Resumidamente, fornece um protocolo para a subcultura de células epiteliais gástricas AGS e para o manuseamento de culturas AGS em proliferação e criopreservadas.
- Subcultura de células AGS: Este sítio explica em pormenor o procedimento de subcultura de células AGS.
Referências
- Phuc, B.H., et al., Comparative genomics of two Vietnamese Helicobacter pylori strains, CHC155 from a non-cardia gastric cancer patient and VN1291 from a duodenal ulcer patient. Scientific Reports, 2023. 13(1): p. 8869.
- Lin, J., et al., miRNA-183-5p. 1 promove a migração e a invasão das células AGS do cancro gástrico, visando o TPM1 Corrigendum in/10.3892/or. 2020.7902. Relatórios de oncologia, 2019. 42(6): p. 2371-2381.
- Khing, T.M., et al., O efeito do paclitaxel na apoptose, autofagia e catástrofe mitótica em células AGS. Relatórios Científicos, 2021. 11(1): p. 23490.
- Zhang, H., et al., sncRNAs embalados por vesículas de membrana externa de Helicobacter pylori atenuam a secreção de IL-8 em células humanas. Jornal Internacional de Microbiologia Médica, 2020. 310(1): p. 151356.