Linha celular BEWO
A BeWo é uma linha celular derivada do coriocarcinoma humano amplamente utilizada na investigação biomédica. Serve como um valioso modelo in vitro para explorar o complexo processo de desenvolvimento placentário e sincitização dos trofoblastos humanos. Os investigadores também utilizam estas células para estudar o comportamento das células trofoblásticas, a produção hormonal e o transporte de substâncias através da placenta. Além disso, as células BeWo também têm aplicações em estudos de toxicologia, infeções e transmissão de doenças.
Este artigo abrange conhecimentos fundamentais sobre as células BeWo que podem ajudá-lo a lidar com elas na sua investigação. Incluirá:
- Características gerais e origem das células BeWo
- Linha celular BeWo: Informações sobre cultura
- Vantagens e desvantagens da linha celular BeWo
- Aplicações de investigação das células BeWo
- Publicações de investigação sobre as células BeWo
- Recursos para a linha celular BeWo: protocolos, vídeos e muito mais
Características gerais e origem das células BeWo
O conhecimento prévio sobre a origem e as características gerais de uma linha celular é crucial para a sua utilização na sua investigação. Esta parte do artigo explora a origem da linha celular BeWo, as suas características e muito mais. Aqui, irá aprender: O que é a linha celular de coriocarcinoma BeWo? O que é a sincitização BeWo? De onde vêm as células BeWo? Qual é a morfologia das células BeWo? Qual é a ploidia das células BeWo?
- A linha celular placentária BeWo teve origem no coriocarcinoma gestacional maligno de uma placenta fetal masculina em 1968 [1]. Assim, serve como um modelo inestimável para a investigação placentária.
- As células BeWo apresentam uma morfologia semelhante à epitelial.
- As células BeWo são relativamente pequenas, variando entre 20 e 30 µm [2].
- As células BeWo apresentam um cariótipo estável. O seu número de cromossomas é hipo-tetraplóide. O número modal de cromossomas das células BeWo é 86. Pode variar entre 71 e 178.
- As células BeWo produzem várias hormonas, nomeadamente a somatomamotropina coriônica humana, a gonadotrofina coriônica humana (hCG) e hormonas esteróides.
- As células BeWo expressam marcadores moleculares, incluindo CK 7, E-caderina e VE-caderina.
Sublinha B30
A B30 é a sublinha das células BeWo. É utilizada para investigar a absorção e o transporte de nutrientes. Isto deve-se ao seu crescimento vigoroso em membranas porosas.
BeWo e JEG-3
As linhas celulares BeWo e JEG-3 são derivadas de coriocarcinomas e utilizadas na investigação placentária. As células BeWo produzem hormonas em níveis mais baixos do que as JEG-3, tais como a gonadotrofina coriônica humana (hCG) e o estradiol.
Linha celular BeWo: Informações sobre a cultura
Manter uma cultura celular pode ser complicado, a menos que se conheçam os detalhes essenciais. Por exemplo: Qual é o tempo de duplicação das células BeWo? Qual é o meio de cultura das células BeWo? Como se cultiva a linha celular BeWo? E como se congelam as células BeWo?
Pontos-chave para a cultura de células BeWo
Tempo de duplicação:
O tempo de duplicação da população das células BeWo é de aproximadamente 30 horas.
Adesivas ou em suspensão:
A BeWo é uma linha celular aderente.
Densidade de sementeamento celular:
A densidade de semeadura recomendada para as células BeWo é de 1 x 10⁴ células/cm². Para a semeadura, o meio antigo é removido das células, que são enxaguadas com PBS 1x. Em seguida, adiciona-se Accutase (solução de passagem) e as células são incubadas durante 8 a 10 minutos à temperatura ambiente. Depois, as células desprendidas são adicionadas ao meio de cultura e centrifugadas. As células colhidas são então ressuspensas e transferidas para um novo frasco.
Meio de crescimento:
Para o crescimento das células BeWo, utiliza-se o meio F12K de Ham contendo 10% de FBS, 2,0 mM de L-glutamina, 2,0 mM de piruvato de sódio e 2,5 g/L de NaHCO₃. O meio de cultura das células BeWo deve ser substituído 2 a 3 vezes por semana.
Condições de crescimento:
As células BeWo são mantidas numa incubadora humidificada, regulada para uma temperatura de 37 graus Celsius e com um fornecimento de 5% de CO₂.
Armazenamento:
As células BeWo congeladas são armazenadas a temperaturas inferiores a -150 °C num congelador elétrico de temperatura ultrabaixa ou na fase de vapor de azoto líquido.
Processo de congelação e meio:
Recomenda-se que as células BeWo sejam congeladas no meio de congelação CM-1 ou CM-ACF. As células são congeladas utilizando um método de congelação lenta. Este método permite apenas uma descida de 1 grau na temperatura por minuto, evitando assim qualquer choque nas células e protegendo a sua viabilidade.
Processo de descongelação:
As células congeladas são descongeladas por imersão num banho-maria pré-ajustado a 37 °C durante 40 a 60 segundos, até restar apenas um pequeno aglomerado de gelo. Em seguida, adiciona-se meio de crescimento fresco e as células são centrifugadas para remover os componentes do meio de congelação. O sedimento celular recolhido é ressuspenso e transferido para um frasco de cultura para crescimento.
Nível de biossegurança:
É necessário um laboratório de Nível de Biossegurança 1 para manusear e manter culturas de células BeWo.
Publicado: 2023 | Última revisão: maio de 2026
- Vantagens e desvantagens da linha celular BeWo
- Aplicações de investigação das células BeWo
- Linha celular BeWo: Informações sobre cultura
- Características gerais e origem das células BeWo
- 5. Publicações de investigação sobre as células BeWo
- Recursos para a linha celular BeWo: protocolos, vídeos e muito mais
- Perguntas frequentes
Vantagens e desvantagens da linha celular BeWo
As células BeWo apresentam características únicas e têm vantagens e desvantagens específicas. Nesta secção, exploraremos algumas das mais dignas de nota.
Vantagens
As principais vantagens da linha celular de coriocarcinoma BeWo são:
-
Modelo de células placentárias in vitro
As células BeWo fornecem um modelo in vitro para estudar o comportamento das células trofoblásticas e a sincitização placentária, replicando processos difíceis de observar in vivo.
-
Produção hormonal
As células BeWo secretam hormonas, tais como a hCG e o lactogênio placentário, tornando-as valiosas para estudos de regulação hormonal e investigação em biologia reprodutiva.
Desvantagens
As desvantagens das células trofoblásticas BeWo são:
-
Linha celular cancerígena
As células BeWo foram derivadas do coriocarcinoma, que é um tumor placentário. Esta origem pode não representar totalmente a função normal das células placentárias.
Aplicações de investigação das células BeWo
A linha celular BeWo é amplamente utilizada na investigação placentária. Mencionam-se aqui algumas aplicações específicas desta linha celular:
- Investigação relacionada com a placenta e a gravidez: As células BeWo são fundamentais na investigação relacionada com a placenta e a gravidez. Por exemplo, os investigadores utilizam estas células para estudar o transporte de substâncias, incluindo medicamentos, nutrientes e toxinas, através da barreira placentária. Além disso, investigam também a produção e regulação de hormonas, incluindo a gonadotrofina coriônica humana (hCG), o lactogênio placentário e as hormonas esteróides. Isto é importante para compreender as alterações hormonais durante a gravidez. Uma investigação realizada em 2018 analisou o efeito dos retardadores de chama bromados (BFRs) na atividade da sulfotransferase na linha celular trofoblástica humana (BeWo). Esta enzima está envolvida na regulação dos níveis intracelulares da hormona tiroideia [3].
- Investigação sobre infeções e doenças: as células BeWo também são utilizadas para examinar a interação entre agentes patogénicos e células placentárias. Esta investigação é valiosa para compreender doenças que podem ser transmitidas da mãe para o feto e para desenvolver estratégias para proteger a saúde fetal. Além disso, esta linha celular ajuda os investigadores a estudar complicações que surgem durante a gravidez, como a pré-eclâmpsia. Por exemplo, um estudo conduzido por Michalina Bralewska em 2023 utilizou o modelo de células trofoblásticas BeWo e descobriu que tanto a cromogranina A (CgA) como o peptídeo derivado desta, a catestatina (CST), podem desempenhar papéis no complexo processo da patogénese da pré-eclâmpsia (PE) [4]. Posteriormente, outro estudo explorou o potencial anticancerígeno da tricosantina utilizando a linha celular de coriocarcinoma BeWo. A investigação também envidou esforços adicionais para descobrir biomarcadores, realizando uma análise proteómica comparativa antes e depois da experiência [5].
5. Publicações científicas sobre as células BeWo
Aqui estão algumas publicações de investigação significativas sobre as células trofoblásticas BeWo.
Este estudo publicado na revista Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) propôs que a sinalização da AMPK ativa a mitofagia nas células trofoblásticas BeWo através de vias de mitofagia facilitadas pelas proteínas FUNDC1 e PRKN. Como resultado, a mitofagia ajuda a manter a produção de ATP e o potencial de membrana mitocondrial.
Este artigo foi publicado na revista Animal Cells and Systems (2020). O estudo propôs que o etilparabeno medeia a apoptose das células BeWo através da regulação da via da caspase 3.
Este estudo, publicado na revista Drug Metabolism and Disposition (2023), utilizou linhas celulares placentárias, incluindo BeWo, JAR, JEG-3 e HTR-8/SVneo, para investigar a deposição de xenobióticos e esteróides nas células.
Este artigo de investigação publicado na revista International Journal of Molecular Medicine (2020) propôs que a apelina, o ligando do recetor APJ, promove a proliferação das células BeWo através das vias de sinalização APJ e ERK1/2, stat3 e AMPK. Assim, poderá ser uma adipocina essencial na regulação do desenvolvimento da placenta.
Este estudo publicado na Epilepsia (2021) explorou os efeitos dos nutrientes fetais e dos anticonvulsivantes nos transportadores de colina na linha celular trofoblástica de origem humana, BeWo.
Recursos para a linha celular BeWo: protocolos, vídeos e muito mais
Aqui estão alguns recursos online disponíveis sobre as células BeWo:
- Transfecção in vitro: Este vídeo irá ajudá-lo a aprender o protocolo de transfecção de ADN plasmídeo in vitro para células aderentes.
A ligação seguinte contém informações sobre cultura celular para as células BeWo:
- Células BeWo: Este site contém informações essenciais sobre cultura celular relativas à linha celular BeWo. Isto inclui informações sobre meios de cultura e condições de cultura. Também contém protocolos para subcultura e manuseamento de culturas criopreservadas e proliferativas.
Referências
- Weber, M., et al., Citogenómica de seis linhas celulares trofoblásticas humanas. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
- Kolokol'tsova, T., et al., Características dos trofoblastos em cultura de longo prazo. Boletim de Biologia Experimental e Medicina, 2017. 164: p. 259-265.
- Leonetti, C.P., C.M. Butt e H.M. Stapleton, Perturbação da atividade da hormona tiroidiana sulfotransferase por produtos químicos retardadores de chama bromados na linha celular de placenta de coriocarcinoma humano, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
- Bralewska, M., T. Pietrucha e A. Sakowicz, Redução do nível da proteína CST derivada de CgA nas linhas celulares trofoblásticas HTR-8/SVneo e BeWo causada pelo ambiente pré-eclâmptico. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
- Hu, Y., et al., Análise proteómica comparativa da adição do fármaco tricosantina à linha celular BeWo. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.