Wilms6-celler

800,00 €*

Produktene sendes frosset på tørris i kryorør. Hvert kryorør inneholder vanligvis 3 × 10 ⁶ celler for vedheftende linjer eller 5 × 10⁶ celler for suspensjonslinjer (se batch-CoA for detaljer).

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300415

Sikkerhetsdatablad

Produktark

Analysesertifikat (CoA)

Avtale om materialoverføring

Beskrivelse	Wilms6-cellelinjen ble etablert fra en primær Wilms-svulst hos en pediatrisk pasient med en germinal WT1-mutasjon. Denne cellelinjen er definert av en homozygot nonsensmutasjon i WT1-genet (c.1168 C>T, p.R390X), noe som resulterer i et avkortet og ikke-funksjonelt WT1-protein. WT1 er en kritisk regulator av nyreutviklingen, og tap av dette proteinet er sterkt assosiert med Wilms-svulst, særlig i tilfeller som viser mesenkymal differensiering. Wilms6-cellelinjen er en viktig modell for å studere de tumorogene effektene av fullstendig tap av WT1, særlig i forbindelse med svulster som har både epiteliale og mesenkymale egenskaper. Wilms6-celler bærer også en mutasjon i CTNNB1-genet, som spesifikt påvirker serin 45 (p.S45F), et sentralt sted for fosforylering som regulerer nedbrytningen av β-Catenin. Denne mutasjonen fører til stabilisering og kjerneakkumulering av β-Catenin, noe som resulterer i en konstitutiv aktivering av Wnt-signalveien. Avvikende aktivering av Wnt-signalering er en kjent driver for celleproliferasjon og tumorutvikling i Wilms-svulster, noe som gjør Wilms6 til et verdifullt verktøy for å undersøke hvilken rolle dysregulering av Wnt-signalveien spiller i svulster med WT1-mutasjoner. Fenotypisk sett har Wilms6-celler en mesenkymal morfologi, med sterkt uttrykk av vimentin og fravær av epitelmarkører som cytokeratin, noe som gjenspeiler den opprinnelige svulstens stromale natur. Disse cellene har vist seg å ha et begrenset, men bemerkelsesverdig differensieringspotensial, inkludert evnen til å differensiere til muskellignende celler under spesifikke forhold, noe som gjenspeiler den mesenkymale differensieringen som observeres i noen Wilms-svulster. Proteomstudier av Wilms6 har identifisert aktivering av flere reseptortyrosinkinaser (RTK-er), inkludert PDGFRβ og AXL, som er involvert i å fremme celleoverlevelse, proliferasjon og migrasjon. Nedstrøms aktivering av signalveier som MAPK og PI3K/AKT understreker ytterligere denne cellelinjens aggressive natur. Wilms6-cellelinjen er en viktig modell for å utforske de molekylære mekanismene som ligger til grunn for utviklingen av Wilms-svulster, særlig i tilfeller med fullstendig tap av WT1 kombinert med aktivering av Wnt-signalering. Cellelinjens genetiske og fenotypiske egenskaper gjør den til en utmerket plattform for å studere samspillet mellom WT1-mangel og avvikende signalveier, noe som gir innsikt i potensielle terapeutiske mål for denne aggressive tumortypen.
Organisme	Menneskelig
Vev	Nyre
Sykdom	Wilms-svulst
Bruksområder	In vitro-cellekulturmodell. Biokjemiske studier

Alder	15 måneder
Kjønn	Mann
Etnisitet	Kaukasisk
Morfologi	Spindelformet
Celletype	Wilms-celler
Vekstegenskaper	Vedhengende

Sitat	Wilms6 (Cytion katalognummer 300415)
Biosikkerhetsnivå	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SI
Innskyter	B. Royer-Pokora

Mutasjonsprofil	WT1-mutasjonsstatus: homozygot c.1168C>T, p.R390x, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1-mutasjonsstatus: homozygot del TCT, p.DS45

Kulturmedium	MSCGM-sett (fra Lonza)
Dissosiasjonsreagens	Accutase
Subkulturer	Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Frys medium	Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Opptining og dyrking av celler	Kontroller at hetteglasset er dypfryst ved levering, ettersom cellene sendes på tørris for å opprettholde optimale temperaturer under transport. Ved mottak skal hetteglasset enten oppbevares umiddelbart ved temperaturer under -150 °C for å sikre at cellenes integritet bevares, eller gå videre til trinn 3 hvis umiddelbar dyrking er nødvendig. Ved umiddelbar dyrking tiner du hetteglasset raskt ved å senke det ned i et 37 °C varmt vannbad med rent vann og et antimikrobielt middel, og røre forsiktig i 40-60 sekunder til det blir en liten isklump igjen. Utfør alle påfølgende trinn under sterile forhold i en strømningshette, og desinfiser kryoflasken med 70 % etanol før du åpner den. Åpne det desinfiserte hetteglasset forsiktig, og overfør cellesuspensjonen til et 15 ml sentrifugerør som inneholder 8 ml romtemperert dyrkingsmedium, og bland forsiktig. Sentrifuger blandingen ved 300 x g i 3 minutter for å separere cellene, og kast supernatanten som inneholder rester av frysemedium, forsiktig. Resuspender cellepelleten forsiktig i 10 ml nytt dyrkningsmedium. For adherente celler, del suspensjonen mellom to T25-kulturkolber; for suspensjonskulturer, overfør alt mediet til én T25-kolbe for å fremme effektiv celleinteraksjon og vekst. Følg etablerte subkulturprotokoller for fortsatt vekst og vedlikehold av cellelinjen, noe som sikrer pålitelige eksperimentelle resultater.
Inkubasjonsatmosfære	37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.
Flaskebelegg	Ingen
Fryseprosedyre	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Leveringsbetingelser	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Lagringsforhold	For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Sterilitet	Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma. For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
STR-profil	Amelogenin: x,y CSF1PO: 11,12 D13S317: 8,11 D16S539: 9,11 D5S818: 8,9 D7S820: 8,11 TH01: 9,9 TPOX: 11,11 vWA: 16,18 D3S1358: 15,16 D21S11: 28,30 D18S51: 12,16 Penta E: 8,13 Penta D: 11,11 D8S1179: 11,13 FGA: 22,23
HLA-alleler	A: '02:05:01, '29:01:01 B: '07:05:01, '13:02:01 C: '06:02:01, '15:05:02 DRB1: '07:01:01, '10:01:01 DQA1: '01:05:01, '02:01:01 DQB1: '02:02:01, '05:01:01 DPB1*: '04:02:01, '17:01:01 E: '01:01:01

Partienummer	Sertifikattype	Dato	Katalognummer
300415-221	Analysesertifikat	23. May. 2025	300415

Hvis du har tenkt å bruke Cytion-cellelinjer utelukkende til intern forskning på ett enkelt forskningssted, må du fylle ut og signere vår materialoverføringsavtale (MTA) og sende den sammen med bestillingen din.

For alle kommersielle anvendelser – inkludert, men ikke begrenset til, betaling for tjenester, kvalitetskontrolltesting, produktutgivelse, diagnostisk bruk eller regulatoriske studier – vennligst fyll ut skjemaet for tiltenkt bruk, slik at vi kan utarbeide en avtale som er tilpasset prosjektet ditt.

Merk: MTA gjelder kun for visse cellelinjer. Hvis denne merknaden og MTA-dokumentet vises på en produktside, gjelder avtalen. For cellelinjer som ikke dekkes av MTA, vil det ikke vises noen henvisning til avtalen. MTA er ikke gyldig for kunder i Amerika, Kina eller Taiwan. Kontakt vårt amerikanske selskap for å motta den aktuelle avtalen.

Wilms6-celler

Generell informasjon

Kjennetegn

Regulatoriske data

Biomolekylære data

Håndtering

Kvalitetskontroll / Genetisk profil / HLA

Analysesertifikat (CoA)

Avtale om materialoverføring