Wilms10T-celler

800,00 €*

Produktene sendes frosset på tørris i kryorør. Hvert kryorør inneholder vanligvis 3 × 10 ⁶ celler for vedheftende linjer eller 5 × 10⁶ celler for suspensjonslinjer (se batch-CoA for detaljer).

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300417

Sikkerhetsdatablad

Produktark

Analysesertifikat (CoA)

Avtale om materialoverføring

Beskrivelse	Wilms10T-cellelinjen ble avledet fra en primær Wilms-svulstprøve fra en pasient med Wilms-svulst, et pediatrisk nefroblastom. Denne cellelinjen kjennetegnes av en homozygot delesjon av WT1-genet, noe som fører til et fullstendig tap av WT1-funksjonen, et kritisk gen som er involvert i nyreutviklingen og opprettholdelsen av normal nyredifferensiering. I motsetning til mange andre Wilms-svulstcellelinjer mangler Wilms10T ethvert uttrykk av WT1-protein, noe som gjenspeiler de alvorlige genetiske endringene som er til stede i denne svulstsubtypen. I tillegg har Wilms10T-cellelinjen tap av heterozygoti (LOH) i kromosomregion 11p15, som omfatter viktige gener som IGF2, noe som ytterligere bidrar til dens tumorogene egenskaper. Wilms10T-celler har en stabil normal karyotype uten større kromosomale rearrangementer, bortsett fra den spesifikke deletjonen av WT1-regionen. Denne cellelinjen har blitt brukt i stor utstrekning for å studere effekten av fullstendig WT1-tap på tumorbiologi, inkludert dens innvirkning på celleproliferasjon, differensiering og respons på ulike signalveier. Cellene har mesenkymale egenskaper og uttrykker markører som vimentin, mens de mangler epitelmarkører som cytokeratin, noe som tyder på deres stromale opprinnelse. Betydelig forskning har fokusert på signalveiene som er aktive i Wilms10T-celler. Proteomstudier har vist at disse cellene viser aktivering av flere reseptortyrosinkinaser (RTK-er), som IGF1R, PDGFRβ og AXL, som er kjent for å drive tumorigenese. I tillegg aktiveres nedstrøms signalveier, inkludert MAPK- og PI3K/AKT-veiene, i Wilms10T-celler, noe som bidrar til deres aggressive tumorfenotype. Den omfattende karakteriseringen av Wilms10T gjør den til en verdifull modell for å undersøke de molekylære forutsetningene for Wilms-svulster med fullstendig WT1-tap, samt for å utforske potensielle terapeutiske mål i denne aggressive tumorsubtypen.
Organisme	Menneskelig
Vev	Nyre
Sykdom	Wilms-svulst
Bruksområder	In vitro-cellekulturmodell og biokjemiske studier
Synonymer	Wilms10

Alder	2 år
Kjønn	Kvinne
Etnisitet	Kaukasisk
Morfologi	Spindelformet
Celletype	Wilms-celler
Vekstegenskaper	Vedhengende

Sitat	Wilms10T (Cytion katalognummer 300417)
Biosikkerhetsnivå	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SL
Innskyter	B. Royer-Pokora

Mutasjonsprofil	WT1-mutasjonsstatus: homozygot del WT1 innenfor del11p13. LOH: ingen i 11p13, men UPD i 11p15. CTNNB1 mutasjonsstatus: homozygot del TCT, p.DS45, UPD 3p

Kulturmedium	MSCGM-sett (fra Lonza)
Dissosiasjonsreagens	Accutase
Doblingstid	46 timer
Subkulturer	Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet	4 x 10⁴ celler/cm²
Fornyelse av væske	1 til 2 ganger per uke
Frys medium	Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Opptining og dyrking av celler	Kontroller at hetteglasset er dypfryst ved levering, ettersom cellene sendes på tørris for å opprettholde optimale temperaturer under transport. Ved mottak skal hetteglasset enten oppbevares umiddelbart ved temperaturer under -150 °C for å sikre at cellenes integritet bevares, eller gå videre til trinn 3 hvis umiddelbar dyrking er nødvendig. Ved umiddelbar dyrking tiner du hetteglasset raskt ved å senke det ned i et 37 °C varmt vannbad med rent vann og et antimikrobielt middel, og røre forsiktig i 40-60 sekunder til det blir en liten isklump igjen. Utfør alle påfølgende trinn under sterile forhold i en strømningshette, og desinfiser kryoflasken med 70 % etanol før du åpner den. Åpne det desinfiserte hetteglasset forsiktig, og overfør cellesuspensjonen til et 15 ml sentrifugerør som inneholder 8 ml romtemperert dyrkingsmedium, og bland forsiktig. Sentrifuger blandingen ved 300 x g i 3 minutter for å separere cellene, og kast supernatanten som inneholder rester av frysemedium, forsiktig. Resuspender cellepelleten forsiktig i 10 ml nytt dyrkningsmedium. For adherente celler, del suspensjonen mellom to T25-kulturkolber; for suspensjonskulturer, overfør alt mediet til én T25-kolbe for å fremme effektiv celleinteraksjon og vekst. Følg etablerte subkulturprotokoller for fortsatt vekst og vedlikehold av cellelinjen, noe som sikrer pålitelige eksperimentelle resultater.
Inkubasjonsatmosfære	37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.
Flaskebelegg	Ingen
Fryseprosedyre	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Leveringsbetingelser	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Lagringsforhold	For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Sterilitet	Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma. For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
STR-profil	Amelogenin: x,y CSF1PO: 11,12 D13S317: 12,12 D16S539: 9,10 D5S818: 10,12 D7S820: 11,12 TH01: 8,6 TPOX: 8,11 vWA: 15,18 D3S1358: 17,17 D21S11: 29,30 D18S51: 14,16 Penta E: 7,10 Penta D: 10,13 D8S1179: 10,15 FGA: 22,24
HLA-alleler	A: '01:01:01, '11:01:01 B: '18:01:01, '27:05:02 C: '01:02:01, '12:03:01 DRB1: '01:01:01, '11:04:01 DQA1: '01:01:01, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '05:01:01 DPB1*: '04:01:01G, '04:02:01G E: '01:01:01

Partienummer	Sertifikattype	Dato	Katalognummer
300417-221	Analysesertifikat	23. May. 2025	300417
300417-131025	Analysesertifikat	05. Dec. 2025	300417

Hvis du har tenkt å bruke Cytion-cellelinjer utelukkende til intern forskning på ett enkelt forskningssted, må du fylle ut og signere vår materialoverføringsavtale (MTA) og sende den sammen med bestillingen din.

For alle kommersielle anvendelser – inkludert, men ikke begrenset til, betaling for tjenester, kvalitetskontrolltesting, produktutgivelse, diagnostisk bruk eller regulatoriske studier – vennligst fyll ut skjemaet for tiltenkt bruk, slik at vi kan utarbeide en avtale som er tilpasset prosjektet ditt.

Merk: MTA gjelder kun for visse cellelinjer. Hvis denne merknaden og MTA-dokumentet vises på en produktside, gjelder avtalen. For cellelinjer som ikke dekkes av MTA, vil det ikke vises noen henvisning til avtalen. MTA er ikke gyldig for kunder i Amerika, Kina eller Taiwan. Kontakt vårt amerikanske selskap for å motta den aktuelle avtalen.

Wilms10T-celler

Generell informasjon

Kjennetegn

Regulatoriske data

Biomolekylære data

Håndtering

Kvalitetskontroll / Genetisk profil / HLA

Analysesertifikat (CoA)

Avtale om materialoverføring