Accutase-løsning for løsning av celler – 100 ml

Accutase celleavløsningsløsning med EDTA og fenolrød – 100 ml

Accutase er en bruksklar, sterilt filtrert celleavløsningsløsning utviklet som et skånsomt alternativ til trypsin/EDTA for å løsne vedheftende pattedyrceller fra standard plastutstyr for vevskultur og overflater med vedheftbelegg. Den kombinerer proteolytisk og kollagenolytisk enzymaktivitet i en balansert saltløsning for å gi effektiv, men kontrollert løsning, samtidig som proteiner på celleoverflaten bevares og høy levedyktighet etter passering samt rask gjenfesting støttes.

Accutase-formuleringen er basert på Dulbeccos fosfatbufferte saltvann (DPBS) med EDTA og fenolrødt som en visuell pH-indikator. Enzymerne er av ikke-pattedyr- og ikke-bakteriell opprinnelse, noe som gjør Accutase spesielt godt egnet til stamcelleforskning, vaksinearbeidsflyter og alle anvendelser der forurensninger av animalsk eller mikrobiell opprinnelse må minimeres. Løsningen hemmer seg selv ved 37 °C, så det kreves ikke noe nøytraliserende reagens eller serumholdig medium etter løsrivelse – cellene kan overføres direkte til ferskt medium.

Viktige egenskaper

• Klar til bruk 1x sterilt filtrert væske – ingen fortynning eller rekonstituering nødvendig
• Kombinert proteolytisk og kollagenolytisk enzymaktivitet for skånsom dissosiasjon
• Hver batch er standardisert til en definert dissosiasjonsaktivitet for konsistens fra parti til parti
• Enzymer av ikke-pattedyr- og ikke-bakteriell opprinnelse
• Selvhemmer ved 37 °C – ingen nøytraliserende løsning nødvendig
• Formulert i Dulbeccos PBS med EDTA
• Fenolrødt inkludert som visuell pH-indikator
• pH 6,8–7,8

Typiske anvendelser

Accutase dissocierer skånsomt et bredt spekter av vedheftende og følsomme celletyper, inkludert humane embryonale stamceller (hESCs), humane induserte pluripotente stamceller (iPSCs), nevrale stamceller, primære nevroner og rutinemessig dyrkede vedheftende cellelinjer som HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 og A549. Typiske bruksområder inkluderer:

• Rutinemessig subkultur og passering av vedheftende pattedyrceller
• Skånsom enkeltcelle-dissociasjon av hESC, iPSC og andre følsomme linjer
• Prøveforberedelse for strømningscytometri og FACS-analyse
• Analyse av celleoverflatemarkører der epitopintegritet er viktig
• Assayer for cellemigrasjon, proliferasjon og apoptose
• Hvileassays ved serumdeprivasjon og onkogen-transfeksjonsstudier
• Migrasjonstester av tumorceller og nevralkamceller
• Oppskalering av produksjonen i bioreaktor-arbeidsflyter

For rutinearbeid, påfør ca. 10 ml Accutase per 75 cm² kulturoverflate og inkuber i 5–10 minutter ved romtemperatur. Den optimale inkubasjonstiden bør bestemmes for hver cellelinje og bør ikke overstige en time. Før tilsetning, skyll cellelaget med en Ca²⁺/Mg²⁺-^fri saltløsning, for eksempel DPBS uten kalsium og magnesium, for å fjerne rester av serum og toverdige kationer.

Håndtering og oppbevaring

Oppbevar den uåpnede flasken frosset ved -15 °C eller lavere. Tine enten ved romtemperatur eller over natten ved +2 °C til +8 °C. Ikke tine Accutase i et 37 °C vannbad, da høye temperaturer reduserer enzymaktiviteten. Etter tining kan løsningen oppbevares i opptil 2 måneder ved +2 °C til +8 °C; ikke oppbevar ved romtemperatur. Ikke forvarm reagensen til 37 °C før bruk – tilsett den direkte til vasket celler ved romtemperatur. For lang holdbarhet anbefales det å dele opp i engangsdoser for å unngå gjentatte tinesykluser. Arbeid alltid under aseptiske forhold.

Kvalitet

Produsert under strenge kvalitetsstandarder. Hver batch av Accutase er sterilt filtrert og testet for sterilitet, pH, utseende og dissosiasjonsaktivitet for å sikre konsistent, reproduserbar ytelse fra batch til batch.

Produktspesifikasjoner

Formulering (sammensetning per liter)

Accutase er et registrert varemerke tilhørende Innovative Cell Technologies, Inc.