Wilms1-celler

800,00 €*

Produktene sendes frosset på tørris i kryorør. Hvert kryorør inneholder vanligvis 3 × 10 ⁶ celler for vedheftende linjer eller 5 × 10⁶ celler for suspensjonslinjer (se batch-CoA for detaljer).

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300411

Sikkerhetsdatablad

Produktark

Analysesertifikat (CoA)

Avtale om materialoverføring

Beskrivelse	Wilms1-cellelinjen ble avledet fra en primær Wilms-svulstprøve fra en pasient med store bilaterale nyresvulster, noe som tyder på Wilms-svulst, et pediatrisk nefroblastom. Denne cellelinjen har en homozygot nonsensmutasjon i WT1-genet (c.149 C>A, p.S50X), noe som resulterer i et avkortet og ikke-funksjonelt WT1-protein. WT1-genet, som er kritisk for nyrenes utvikling og funksjon, er ofte mutert i Wilms-svulster, særlig i dem med en stromal subtype som viser ektopisk mesenkymal differensiering. Wilms1-celler representerer derfor en unik in vitro-modell for å studere konsekvensene av tap av WT1-funksjon i tumorbiologi. Wilms1-cellelinjen har en stabil karyotype uten signifikante kromosomavvik, noe som gir mulighet for pålitelig langtidsdyrking. Disse cellene har en mesenkymal fenotype, karakterisert ved uttrykk av vimentin og fravær av epitelmarkører som cytokeratin, noe som stemmer overens med deres stromale opprinnelse. I tillegg viser cellelinjen en begrenset, men bemerkelsesverdig mesenkymal differensieringskapasitet, inkludert evnen til å differensiere til muskellignende celler under passende forhold. Dette gjør Wilms1 til et uvurderlig verktøy for å undersøke de molekylære mekanismene for mesenkymal differensiering og dereguleringen av denne i Wilms' svulstpatogenese. Wilms1 har også blitt brukt til å studere aktiveringsstatusen til viktige signalveier som er involvert i svulstprogresjon. Proteomanalyser har vist at Wilms1-celler viser fosforylering og aktivering av flere reseptortyrosinkinaser, inkludert EGFR og PDGFRβ, samt nedstrøms MAPK-signalveier. Disse funnene understreker relevansen av Wilms1-cellelinjen i utforskningen av målrettede terapeutiske tilnærminger for Wilms-svulster ved å dissekere disse signalveienes rolle i kreftcellenes overlevelse, spredning og differensiering.
Organisme	Menneskelig
Vev	Nyre
Bruksområder	In vitro-cellekulturmodell. Biokjemiske studier
Synonymer	Wilms1-2l

Alder	2 år
Kjønn	Kvinne
Etnisitet	Kaukasisk
Morfologi	Spindelformet
Celletype	Wilms-celler
Vekstegenskaper	Vedhengende

Sitat	Wilms1 (Cytion katalognummer 300411)
Biosikkerhetsnivå	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SC
Innskyter	B. Royer-Pokora

Uttrykte reseptorer	Reseptortyrosinkinaser EGFR, EphA7, PDGFRalfa, FGFR1, PDGFRbeta, AxL
Tumorfremkallende	Ja, i nakne mus. Danner svulst med små celler som er forenlig med Wilms' svulst (xenotransplantater representerer kanskje ikke Wilms' svulster fullstendig, se E. Kunce Stroup 2017)
Virus	HIV-1: negativ, HBV: negativ, HCV: negativ
Mutasjonsprofil	WT1-mutasjonsstatus: homozygot c. 149 C>A, p.S50x, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1-mutasjonsstatus: heterozygot TCT>TTT, p.S45F
Karyotype	46, normal

Kulturmedium	MSCGM-sett (fra Lonza)
Dissosiasjonsreagens	Accutase
Doblingstid	24 timer
Subkulturer	Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet	1 x 10⁴ celler/cm²
Fornyelse av væske	1 til 2 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining	Rask
Frys medium	Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Opptining og dyrking av celler	Kontroller at hetteglasset er dypfryst ved levering, ettersom cellene sendes på tørris for å opprettholde optimale temperaturer under transport. Ved mottak skal hetteglasset enten oppbevares umiddelbart ved temperaturer under -150 °C for å sikre at cellenes integritet bevares, eller gå videre til trinn 3 hvis umiddelbar dyrking er nødvendig. Ved umiddelbar dyrking tiner du hetteglasset raskt ved å senke det ned i et 37 °C varmt vannbad med rent vann og et antimikrobielt middel, og røre forsiktig i 40-60 sekunder til det blir en liten isklump igjen. Utfør alle påfølgende trinn under sterile forhold i en strømningshette, og desinfiser kryoflasken med 70 % etanol før du åpner den. Åpne det desinfiserte hetteglasset forsiktig, og overfør cellesuspensjonen til et 15 ml sentrifugerør som inneholder 8 ml romtemperert dyrkingsmedium, og bland forsiktig. Sentrifuger blandingen ved 300 x g i 3 minutter for å separere cellene, og kast supernatanten som inneholder rester av frysemedium, forsiktig. Resuspender cellepelleten forsiktig i 10 ml nytt dyrkningsmedium. For adherente celler, del suspensjonen mellom to T25-kulturkolber; for suspensjonskulturer, overfør alt mediet til én T25-kolbe for å fremme effektiv celleinteraksjon og vekst. Følg etablerte subkulturprotokoller for fortsatt vekst og vedlikehold av cellelinjen, noe som sikrer pålitelige eksperimentelle resultater.
Inkubasjonsatmosfære	37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.
Flaskebelegg	Ingen
Fryseprosedyre	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Leveringsbetingelser	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Lagringsforhold	For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Sterilitet	Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma. For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
STR-profil	Amelogenin: x,x CSF1PO: 10,12 D13S317: 11,13 D16S539: 11,14 D5S818: 12,13,14 D7S820: 9,14 TH01: 9.3 TPOX: 8,9 vWA: 14,19 D3S1358: 14,17,18 D21S11: 30,31 D18S51: 15,18 Penta E: 5,14 Penta D: 13 D8S1179: 12,14 FGA: 22,25
HLA-alleler	A: '03:01:01, '24:02:01 B: '35:03:01, '38:01:01 C: '12:03:01 DRB1: '07:01:01, '14:54:01 DQA1: '01:04:01, '02:01:01 DQB1: '02:02:01, '05:03:01 DPB1*: '02:01:02G, '04:02:01G E: '01:03:01, '01:03:02

Partienummer	Sertifikattype	Dato	Katalognummer
300411-221	Analysesertifikat	23. May. 2025	300411
300411-130524	Analysesertifikat	23. May. 2025	300411

Hvis du har tenkt å bruke Cytion-cellelinjer utelukkende til intern forskning på ett enkelt forskningssted, må du fylle ut og signere vår materialoverføringsavtale (MTA) og sende den sammen med bestillingen din.

For alle kommersielle anvendelser – inkludert, men ikke begrenset til, betaling for tjenester, kvalitetskontrolltesting, produktutgivelse, diagnostisk bruk eller regulatoriske studier – vennligst fyll ut skjemaet for tiltenkt bruk, slik at vi kan utarbeide en avtale som er tilpasset prosjektet ditt.

Merk: MTA gjelder kun for visse cellelinjer. Hvis denne merknaden og MTA-dokumentet vises på en produktside, gjelder avtalen. For cellelinjer som ikke dekkes av MTA, vil det ikke vises noen henvisning til avtalen. MTA er ikke gyldig for kunder i Amerika, Kina eller Taiwan. Kontakt vårt amerikanske selskap for å motta den aktuelle avtalen.

Wilms1-celler

Generell informasjon

Kjennetegn

Regulatoriske data

Biomolekylære data

Håndtering

Kvalitetskontroll / Genetisk profil / HLA

Analysesertifikat (CoA)

Avtale om materialoverføring