Wilms11-celler

800,00 €*

Produktene sendes frosset på tørris i kryorør. Hvert kryorør inneholder vanligvis 3 × 10 ⁶ celler for vedheftende linjer eller 5 × 10⁶ celler for suspensjonslinjer (se batch-CoA for detaljer).

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300420

Sikkerhetsdatablad

Produktark

Analysesertifikat (CoA)

Avtale om materialoverføring

Beskrivelse	Wilms11-cellelinjen ble avledet fra en primær Wilms-svulst (nefroblastom) hos en pediatrisk pasient. I motsetning til mange andre Wilms-svulstcellelinjer er Wilms11 karakterisert ved tilstedeværelsen av villtype WT1, noe som betyr at den ikke har mutasjoner i WT1-genet, som vanligvis er forbundet med Wilms-svulster som viser mer aggressive eller stromale fenotyper. Wilms11-svulsten viste imidlertid betydelig stromal differensiering, med store områder med rabdomyomatøs differensiering, noe som tyder på mesenkymale elementer i svulsten. Tilstedeværelsen av villtype WT1, kombinert med svulstens stromale differensiering, gir en unik modell for å forstå Wilms-svulstens biologi i tilfeller der WT1-mutasjoner er fraværende. Genetiske studier av Wilms11 har vist at denne cellelinjen bærer en tumorspesifikk mutasjon i CTNNB1, genet som koder for β-Catenin, som spiller en avgjørende rolle i Wnt-signalveien. I Wilms11 påvirker denne mutasjonen serin 45, et viktig fosforyleringssted som er involvert i nedbrytningen av β-Catenin. CTNNB1-mutasjonen fører til stabilisering av β-Catenin, noe som fører til akkumulering og konstitutiv aktivering av Wnt-signalveien, som er en drivkraft for celleproliferasjon og tumorutvikling. Dette gjør Wilms11 til en viktig modell for å studere samspillet mellom Wnt-signalering og utvikling av Wilms-svulster, spesielt i tilfeller der WT1 forblir intakt. Proteomanalyser av Wilms11 har avdekket aktivering av flere reseptortyrosinkinaser (RTK-er), inkludert PDGFRβ og AXL, som er involvert i å drive tumorcellevekst og -overlevelse. Nedstrøms signalveier, som MAPK- og PI3K/AKT-veiene, aktiveres også i Wilms11-celler, noe som bidrar til deres tumorgeniske atferd. Wilms11-cellenes evne til å gjennomgå mesenkymal differensiering, spesielt rabdomyomatøs differensiering, fremhever deres potensial som modell for å studere de mesenkymale komponentene i Wilms-svulster. Wilms11 er et verdifullt verktøy for å undersøke de molekylære mekanismene som driver Wilms-svulstutvikling i fravær av WT1-mutasjoner, men i sammenheng med aktivering av Wnt-stien.
Organisme	Menneskelig
Vev	Nyre
Sykdom	Wilms-svulst
Bruksområder	In vitro-cellekulturmodell. Biokjemiske studier

Alder	22 måneder
Kjønn	Mann
Etnisitet	Kaukasisk
Morfologi	Spindelformet
Celletype	Wilms-celler
Vekstegenskaper	Vedhengende

Sitat	Wilms11 (Cytion katalognummer 300420)
Biosikkerhetsnivå	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SM
Innskyter	B. Royer-Pokora

Mutasjonsprofil	WT1-mutasjonsstatus: homozygot WT1 c.901c>T, p.R301x. LOH: . CTNNB1 mutasjonsstatus: villtype

Kulturmedium	MSCGM-sett (fra Lonza)
Dissosiasjonsreagens	Accutase
Subkulturer	Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Frys medium	Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Opptining og dyrking av celler	Kontroller at hetteglasset er dypfryst ved levering, ettersom cellene sendes på tørris for å opprettholde optimale temperaturer under transport. Ved mottak skal hetteglasset enten oppbevares umiddelbart ved temperaturer under -150 °C for å sikre at cellenes integritet bevares, eller gå videre til trinn 3 hvis umiddelbar dyrking er nødvendig. Ved umiddelbar dyrking tiner du hetteglasset raskt ved å senke det ned i et 37 °C varmt vannbad med rent vann og et antimikrobielt middel, og røre forsiktig i 40-60 sekunder til det blir en liten isklump igjen. Utfør alle påfølgende trinn under sterile forhold i en strømningshette, og desinfiser kryoflasken med 70 % etanol før du åpner den. Åpne det desinfiserte hetteglasset forsiktig, og overfør cellesuspensjonen til et 15 ml sentrifugerør som inneholder 8 ml romtemperert dyrkingsmedium, og bland forsiktig. Sentrifuger blandingen ved 300 x g i 3 minutter for å separere cellene, og kast supernatanten som inneholder rester av frysemedium, forsiktig. Resuspender cellepelleten forsiktig i 10 ml nytt dyrkningsmedium. For adherente celler, del suspensjonen mellom to T25-kulturkolber; for suspensjonskulturer, overfør alt mediet til én T25-kolbe for å fremme effektiv celleinteraksjon og vekst. Følg etablerte subkulturprotokoller for fortsatt vekst og vedlikehold av cellelinjen, noe som sikrer pålitelige eksperimentelle resultater.
Inkubasjonsatmosfære	37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.
Flaskebelegg	Ingen
Fryseprosedyre	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Leveringsbetingelser	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Lagringsforhold	For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Sterilitet	Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma. For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
STR-profil	Amelogenin: x,y CSF1PO: 10,12 D13S317: 12,12 D16S539: 11,12 D5S818: 12,13 D7S820: 8,9 TH01: 6,6 TPOX: 9,11 vWA: 17,18 D3S1358: 15,17 D21S11: 29,30 D18S51: 14,21 Penta E: 5,7 Penta D: 11,11 D8S1179: 13,13 FGA: 23,26

Partienummer	Sertifikattype	Dato	Katalognummer
300420-221	Analysesertifikat	23. May. 2025	300420
300420-240226	Analysesertifikat	25. Mar. 2026	300420

Hvis du har tenkt å bruke Cytion-cellelinjer utelukkende til intern forskning på ett enkelt forskningssted, må du fylle ut og signere vår materialoverføringsavtale (MTA) og sende den sammen med bestillingen din.

For alle kommersielle anvendelser – inkludert, men ikke begrenset til, betaling for tjenester, kvalitetskontrolltesting, produktutgivelse, diagnostisk bruk eller regulatoriske studier – vennligst fyll ut skjemaet for tiltenkt bruk, slik at vi kan utarbeide en avtale som er tilpasset prosjektet ditt.

Merk: MTA gjelder kun for visse cellelinjer. Hvis denne merknaden og MTA-dokumentet vises på en produktside, gjelder avtalen. For cellelinjer som ikke dekkes av MTA, vil det ikke vises noen henvisning til avtalen. MTA er ikke gyldig for kunder i Amerika, Kina eller Taiwan. Kontakt vårt amerikanske selskap for å motta den aktuelle avtalen.

Wilms11-celler

Generell informasjon

Kjennetegn

Regulatoriske data

Biomolekylære data

Håndtering

Kvalitetskontroll / Genetisk profil / HLA

Analysesertifikat (CoA)

Avtale om materialoverføring