Wilms3-celler

800,00 €*

Produktene sendes frosset på tørris i kryorør. Hvert kryorør inneholder vanligvis 3 × 10 ⁶ celler for vedheftende linjer eller 5 × 10⁶ celler for suspensjonslinjer (se batch-CoA for detaljer).

Priser ekskl. avgifter pluss fraktkostnader

cryovial

Produktnummer: 300414

Sikkerhetsdatablad

Produktark

Analysesertifikat (CoA)

Avtale om materialoverføring

Beskrivelse	Wilms3-cellelinjen ble etablert fra en primær Wilms-svulst hos en pediatrisk pasient, karakterisert av en somatisk WT1-mutasjon. I motsetning til mange andre Wilms-svulstcellelinjer har Wilms3 en heterozygot rammeskiftmutasjon i WT1-genet (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), noe som fører til produksjon av et avkortet WT1-protein. Dette delvise tapet av WT1-funksjonen er forbundet med utvikling av svulster som viser en stromal eller mesenkymal fenotype. WT1-mutasjonen i Wilms3 er imidlertid ikke homozygot, noe som gjør studien mer kompleks, ettersom den beholder en viss WT1-funksjon som kan påvirke tumorbiologien på en annen måte enn cellelinjer med fullstendig WT1-tap. Wilms3 har også en mutasjon i CTNNB1-genet, som spesifikt påvirker treonin 41 (p.T41A), som spiller en kritisk rolle i Wnt-signalveien. Denne mutasjonen stabiliserer β-Catenin, forhindrer nedbrytning og fører til en konstitutiv aktivering av Wnt-signalveien. Den vedvarende aktiveringen av Wnt-signalering driver celleproliferasjon og bidrar til tumorutvikling i Wilms3, noe som gjør den til en viktig modell for å studere effekten av CTNNB1-mutasjoner i sammenheng med en delvis funksjonell WT1-bakgrunn. Fenotypisk har Wilms3-cellene en mesenkymlignende morfologi, uttrykker vimentin og mangler cytokeratin, noe som samsvarer med de stromale egenskapene som er observert i den opprinnelige svulsten. Disse cellene viser begrenset differensieringspotensial, med evne til å gjennomgå en viss mesenkymal differensiering under spesifikke forhold. Proteomanalyser av Wilms3 har avdekket aktivering av flere reseptortyrosinkinaser (RTK-er), blant annet PDGFRβ og AXL, som bidrar til celleoverlevelse og -proliferasjon. I tillegg aktiveres nedstrøms signalveier som MAPK og PI3K/AKT, noe som forsterker Wilms3-cellenes ondartede egenskaper. Et unikt aspekt ved Wilms3 er den delvise WT1-funksjonaliteten, noe som gir et nytt perspektiv på hvordan WT1-mutasjoner bidrar til Wilms-svulstens biologi når mutasjonen ikke er fullstendig. Samspillet mellom WT1- og Wnt-signalering i Wilms3 gir en verdifull mulighet til å studere de nyanserte rollene disse signalveiene spiller i tumorutvikling. Wilms3 er en viktig modell for å undersøke de molekylære mekanismene som ligger til grunn for Wilms-svulster ved delvis tap av WT1 og konstitutiv aktivering av Wnt-signalveier.
Organisme	Menneskelig
Vev	Nyre
Sykdom	Wilms-svulst
Bruksområder	In vitro-cellekulturmodell. Biokjemiske studier

Alder	11-12 måneder
Kjønn	Mann
Etnisitet	Kaukasisk
Morfologi	Spindelformet
Celletype	Wilms-celler
Vekstegenskaper	Vedhengende

Sitat	Wilms3 (Cytion katalognummer 300414)
Biosikkerhetsnivå	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SF
Innskyter	B. Royer-Pokora

Mutasjonsprofil	WT1-mutasjonsstatus: homozygot c.1293-1294insA, p.V432fsx87, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1-mutasjonsstatus: villtype

Kulturmedium	MSCGM-sett (fra Lonza)
Dissosiasjonsreagens	Accutase
Subkulturer	Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Frys medium	Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Opptining og dyrking av celler	Kontroller at hetteglasset er dypfryst ved levering, ettersom cellene sendes på tørris for å opprettholde optimale temperaturer under transport. Ved mottak skal hetteglasset enten oppbevares umiddelbart ved temperaturer under -150 °C for å sikre at cellenes integritet bevares, eller gå videre til trinn 3 hvis umiddelbar dyrking er nødvendig. Ved umiddelbar dyrking tiner du hetteglasset raskt ved å senke det ned i et 37 °C varmt vannbad med rent vann og et antimikrobielt middel, og røre forsiktig i 40-60 sekunder til det blir en liten isklump igjen. Utfør alle påfølgende trinn under sterile forhold i en strømningshette, og desinfiser kryoflasken med 70 % etanol før du åpner den. Åpne det desinfiserte hetteglasset forsiktig, og overfør cellesuspensjonen til et 15 ml sentrifugerør som inneholder 8 ml romtemperert dyrkingsmedium, og bland forsiktig. Sentrifuger blandingen ved 300 x g i 3 minutter for å separere cellene, og kast supernatanten som inneholder rester av frysemedium, forsiktig. Resuspender cellepelleten forsiktig i 10 ml nytt dyrkningsmedium. For adherente celler, del suspensjonen mellom to T25-kulturkolber; for suspensjonskulturer, overfør alt mediet til én T25-kolbe for å fremme effektiv celleinteraksjon og vekst. Følg etablerte subkulturprotokoller for fortsatt vekst og vedlikehold av cellelinjen, noe som sikrer pålitelige eksperimentelle resultater.
Inkubasjonsatmosfære	37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.
Flaskebelegg	Ingen
Fryseprosedyre	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Leveringsbetingelser	Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
Lagringsforhold	For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Sterilitet	Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma. For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
STR-profil	Amelogenin: x,y CSF1PO: 11,12 D13S317: 12,13 D16S539: 9,11 D5S818: 9,9 D7S820: 10,11 TH01: 6,6 TPOX: 8,8 vWA: 16,17 D3S1358: 15,16 D21S11: 29,31 D18S51: 13,17 Penta E: 7,10 Penta D: 9,13 D8S1179: 10,11 FGA: 22,24
HLA-alleler	A: '03:01:01 B: '35:01:01, '35:03:01 C: '04:01:01 DRB1: '04:03:01, '11:04:01 DQA1: '03:01:01, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '03:02:01 DPB1*: '01:01:01, '04:01:01 E: '01:03:02, '01:06:01

Partienummer	Sertifikattype	Dato	Katalognummer
300414-221	Analysesertifikat	23. May. 2025	300414

Hvis du har tenkt å bruke Cytion-cellelinjer utelukkende til intern forskning på ett enkelt forskningssted, må du fylle ut og signere vår materialoverføringsavtale (MTA) og sende den sammen med bestillingen din.

For alle kommersielle anvendelser – inkludert, men ikke begrenset til, betaling for tjenester, kvalitetskontrolltesting, produktutgivelse, diagnostisk bruk eller regulatoriske studier – vennligst fyll ut skjemaet for tiltenkt bruk, slik at vi kan utarbeide en avtale som er tilpasset prosjektet ditt.

Merk: MTA gjelder kun for visse cellelinjer. Hvis denne merknaden og MTA-dokumentet vises på en produktside, gjelder avtalen. For cellelinjer som ikke dekkes av MTA, vil det ikke vises noen henvisning til avtalen. MTA er ikke gyldig for kunder i Amerika, Kina eller Taiwan. Kontakt vårt amerikanske selskap for å motta den aktuelle avtalen.

Wilms3-celler

Generell informasjon

Kjennetegn

Regulatoriske data

Biomolekylære data

Håndtering

Kvalitetskontroll / Genetisk profil / HLA

Analysesertifikat (CoA)

Avtale om materialoverføring