4T1 ląstelės - esminės įžvalgos apie krūties vėžio ląstelių tyrimus ir taikymą

4T1 yra transplantuojamų pelės krūties vėžio ląstelių linija. Ji plačiai naudojama kaip genetiškai identiškas in vitro naviko modelis žmogaus krūties vėžiui tirti. 4T1 ląstelės yra labai invazinės ir navikinės; jos linkusios metastazuoti iš pirminės naviko vietos pieno liaukoje į kitas vietas, įskaitant kepenis, limfmazgius, plaučius, kaulus ir smegenis, todėl idealiai tinka krūties vėžio metastazėms tirti [1].

Bendrosios 4T1 ląstelių savybės ir kilmė

Prieš pradedant dirbti su ląstelių linija, būtina žinoti apie jos kilmę ir bendrąsias savybes. Šiame skyriuje paminėjome pagrindinius 4T1 krūties vėžio ląstelių bruožus. Pavyzdžiui, kas yra 4T1 ląstelės? Kokios yra 4t1 ląstelių linijos savybės? Kokia yra 4T1 ląstelių linijos kilmė? Kokia yra 4T1 ląstelių linijos morfologija?

4T1 yra krūties naviko ląstelių linija, kilusi iš pieno liaukos naviko, kuris spontaniškai atsirado pelių BALB/c padermei. Šios labai invazinės ir navikinės ląstelės savo augimu ir metastazių plitimu labai tiksliai atkartoja žmogaus krūties vėžio elgseną. Konkrečiai 4T1 naviko modelis skirtas trigubai neigiamam krūties vėžiui (TNBC) tirti.
4T1 ląstelės yra adherentiškos ir pasižymi į epitelio ląsteles panašia morfologija.

4T1 ir EMT-6 ląstelių linija

4T1 ir EMT-6 yra neimunogeniniai, pelės ląstelių modeliai, skirti trigubai neigiamo krūties vėžio tyrimams. Šiuo atveju 4T1 yra agresyvesnės ir invazyvesnės naviko ląstelės nei EMT-6, pasižyminčios mažesnėmis invazinėmis savybėmis [2].

4T1 ir 4T07 ląstelės

4T07 taip pat yra pelių vėžio ląstelių linija. Pagrindinis skirtumas tarp 4T1 ir 4T07 ląstelių yra tas, kad 4T1 ląstelės gali palikti pirminę naviko vietą ir plisti, sudarydamos matomas antrines metastazes, o 4T07 ląstelės, nepaisant to, kad palieka pirminę vietą, negali sudaryti matomų metastazių [3].

4T1 ląstelės SEM tomografinis vaizdas.

Informacija apie 4T1 ląstelių linijos kultivavimą

4T1 krūties vėžio ląstelių linija plačiai taikoma biomedicinos srities tyrimams. Norėdami kultivuoti šias ląsteles, turėtumėte išnagrinėti šiuos svarbiausius dalykus: kas yra 4T1 padvigubėjimo laikas? Kaip kultivuojamos 4T1 ląstelės? Koks yra 4T1 ląstelių pasėlio tankis?

Pagrindiniai 4T1 ląstelių kultivavimo aspektai

Padvigubėjimo laikas:	4T1 krūties vėžio ląstelių populiacijos padvigubėjimo laikas yra 14 valandų.
Prigludusios arba suspenduotos:	4T1 yra adherentinė ląstelių linija.
Subkultivavimo santykis:	4T1 trigubai neigiamo krūties vėžio ląstelių linijai rekomenduojamas dalijimo santykis 1:6 ir 1:8. Skirstant ląstelės skalaujamos PBS ir inkubuojamos su "Accutase" fermentu 8-10 minučių. Suskaidytos ląstelės surenkamos centrifuguojant ir resuspenduojamos šviežioje terpėje. Resuspenduotos ląstelės paskirstomos į naują kolbą auginimui.
Augimo terpė:	4T1 ląstelėms auginti naudojama RPMI 1640 terpė. kad ląstelės augtų idealiai, į terpę dedama 10 % fetalinio galvijų serumo (FBS), 2,0 g/l NaHCO3 ir 2,1 mM stabilaus glutamino.
Augimo sąlygos:	4T1 naviko ląstelės laikomos 37 °C temperatūros drėkinamajame inkubatoriuje su 5 %_CO2.
Laikymas:	4T1 ląstelės turėtų būti laikomos žemesnėje nei -150 °C temperatūroje, t. y. elektriniame šaldiklyje arba skysto azoto garų fazėje, kad būtų išlaikytas ląstelių gyvybingumas.
Šaldymo procesas ir terpė:	4T1 ląstelių linijai rekomenduojama naudoti CM-1 arba CM-ACF. Pirmenybė teikiama lėtam užšaldymo būdui, nes jis apsaugo ląstelių gyvybingumą, palaipsniui mažinant temperatūrą 1 °C.
Atšildymo procesas:	Užšaldytų ląstelių buteliukas kelias sekundes laikomas 37 °C temperatūros vandens vonelėje, kol ląstelės atšyla ir lieka tik nedidelis ledo gabalėlis. Šios ląstelės resuspenduojamos šviežioje terpėje ir supilamos į kolbą kultivavimui. Po 24 valandų inkubacijos terpė pakeičiama, kad būtų pašalinti užšąlančios terpės komponentai.
Biologinės saugos lygis:	4T1 krūties vėžio ląstelių kultivavimui rekomenduojama 1 biologinės saugos lygio laboratorija.

Kiaulių 4T1 krūties vėžio ląstelės, padidintos 20 ir 10 kartų.

4T1 ląstelių linija: Privalumai ir trūkumai

Šioje straipsnio dalyje bus aptarti su 4T1 metastazių modeliu susiję privalumai ir trūkumai.

Privalumai

Pagrindiniai 4T1 ląstelių linijos privalumai yra šie:

Tumorigeniškumas:
4T1 yra labai navikiška ląstelių linija. Įšvirkštos į pelę šios ląstelės gali sudaryti 4T1 sinogeninį pelės modelį krūties vėžiui tirti. Todėl 4T1 modelis idealiai tinka naviko vystymuisi, augimui ir metastazėms tirti. Be to, jis naudingas gydomųjų vaistų atrankai ir vertinimui.
In vitro metastazių modelis:
4T1 modelis pasižymi natūralia metastazavimo tendencija, todėl tyrėjai gali veiksmingai ištirti pagrindinius mechanizmus ir kelius, susijusius su metastazavimo procesu. Be to, 4T1 ląstelės yra atsparios 6-tioguaninui. Tai padeda efektyviai nustatyti mikrometastazines ląsteles, kurių tikslumas, palyginti su kitais modeliais, yra didesnis, nes nereikia sverti tikslinių organų ir skaičiuoti mazgelių.

Trūkumai

Su 4T1 ląstelių linija susijęs trūkumas:

Agresyvumas ir greitas augimas:
4T1 ląstelių linija yra labai agresyvi trigubai neigiamo krūties vėžio ląstelių linija. Dėl spartaus augimo greičio šią ląstelių liniją naudoti ilgalaikiams eksperimentams ir kontroliuoti eksperimentinius kintamuosius tampa sudėtinga.

Įsigykite 4T1 ląstelių liniją: aukštos kokybės krūties vėžio modelis

430,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 300300

4T1 ląstelių linija: Vėžio tyrimų taikymas

4T1 pelės modelio ląstelių linija yra vertinga mokslinių tyrimų priemonė vėžio biologijai tirti ir naujiems gydymo būdams vertinti. Čia išvardyti pagrindiniai 4T1 ląstelių panaudojimo būdai:

Vėžio biologija

4T1 ląstelių linija plačiai naudojama vėžio vystymuisi ir augimui tirti. Tai idealus in vitro modelis, kuriuo galima tirti ir nagrinėti įvairius ląstelinius ir molekulinius mechanizmus, susijusius su naviko progresavimu ir metastazėmis. Be to, ji gali atskleisti ląstelių signalinių kelių, mikroaplinkos ir genų raiškos vaidmenį šiuose procesuose. 2019 m. atliktuose tyrimuose 4T1 ląstelės buvo naudojamos siekiant atrasti vėžio ląstelių invaziją ir migraciją lemiančius mechanizmus. Rezultatai atskleidė, kad su tuo susiję STAT3, MMP2 ir MMP9 genai, o šių genų slopinimas gali pastebimai apriboti vėžinių ląstelių migraciją ir invaziją [4]. Panašūs tyrimai taip pat nurodė keletą kitų signalinių kelių, susijusių su naviko vystymusi ir metastazavimu.

Be to, 4T1 modelis padeda suprasti krūties vėžio mikroaplinką, įskaitant imuninių ląstelių infiltraciją ir pirminio naviko augimą. Tyrimai, kuriuose daugiausia dėmesio skiriama 4T1 naviko mikroaplinkai, parodė reikšmingų įžvalgų apie imuninių ląstelių ir citokinų, pavyzdžiui, CXCL13 raiškos, vaidmenį naviko progresavimui. Šis modelis taip pat padeda tirti metastazių nišas ir naviko metastazes, ypač vėlyvosios stadijos krūties vėžio atveju, kai vyrauja krūties karcinomos kolonizacija.

Vėžio terapijos tyrimai

4T1 ląstelių linija plačiai taikoma vėžio terapijos tyrimuose, siekiant patikrinti ir įvertinti naujus gydymo būdus. Atliktas tyrimas, kurio metu ištirtas žaliai susintetintų geležies nanodalelių iš rozmarino ekstrakto (Rosemary-FeNPs) ir gryno rozmarino ekstrakto citotoksinis potencialas 4T1 ląstelių linijoje. Tyrimo išvadose siūloma, kad rozmarino-FeNPs yra perspektyvesni nei grynas ekstraktas [5]. Panašiai 2021 m. atliktame tyrime buvo nagrinėjamas imbiero ekstrakto priešvėžinis potencialas 4T1 krūties vėžio ląstelėse ir 4T1 pelės modelyje [6].

Be natūralių ekstraktų, 4T1 ląstelių linija naudojama tradicinių chemoterapinių preparatų veiksmingumui įvertinti. Pavyzdžiui, tyrimai, apimantys cisplatinos derinimą su kitais gydymo būdais, parodė, kad 4T1 modelyje sustiprėjo naviko ląstelių žūtis ir sumažėjo naviko progresavimas. Į 4T1 ląsteles įdiegus ugnies liepsnelės luciferazę, atsirado galimybė realiuoju laiku vaizduoti naviko augimą ir metastazių fenotipą, todėl lengviau įvertinti įvairių gydymo būdų poveikį.

Be to, 4T1 ląstelių linijos atsparumas 6-tioguaninui palengvino mikrometastazinių ląstelių tyrimus, pagerino metastazių aptikimą ir analizę. Ši ląstelių linija taip pat labai svarbi tiriant priešvėžinį imunitetą ir imunoterapijos poveikį, ypač naudojant ortotopinius pelių modelius, kuriuose mokslininkai gali tiksliai imituoti žmogaus vėžį.

Apskritai 4T1 ląstelių linija išlieka nepakeičiamas įrankis onkologiniuose tyrimuose - nuo pagrindinių vėžio biologijos mechanizmų supratimo iki naujų gydymo strategijų kūrimo ir bandymo.

4T1 ląstelės: Tyrimų publikacijos

Šiame straipsnių skyriuje apžvelgsime keletą įdomių ir dažniausiai cituojamų publikacijų apie 4T1 ląsteles.

Potencialus antiproliferacinis AgNP, susintetintų naudojant M. longifolia, aktyvumas 4T1 ląstelių linijoje dėl ROS susidarymo ir ląstelių membranos pažeidimo

Šis straipsnis buvo paskelbtas 2018 m. žurnale "Journal of Photochemistry and Photobiology". Tyrime siūloma, kad sidabro nanodalelės, susintetintos iš Madhuca longifolia , pasižymi antiproliferaciniu poveikiu 4T1 naviko ląstelėms per ląstelės sienelės irimą ir ROS susidarymą.

Verbaskosido citotoksiškumas ir apoptozinis poveikis krūties vėžio 4T1 ląstelių linijai

Šiame BMC Pharmacology and Toxicology žurnale (2021 m.) atliktame tyrime siūloma, kad natūralus junginys verbaskosidas sukelia apoptozinį poveikį 4T1 krūties vėžio ląstelėms per TLR4 signalizaciją.

Eupatorinas slopino naviko progresavimą ir stiprino imunitetą 4T1 pelių krūties vėžio modelyje

Šis tyrimas paskelbtas žurnale "Integrative Cancer Therapies" 2020 m. Šiame tyrime 4T1 ląstelės panaudotos 4T1 sinogeninių pelių modeliui sukurti ir naudojant jas ištirtas Eupatorino priešvėžinis potencialas. Eupatorinas sulėtino naviko vystymąsi 4T1 pelės modelyje.

Viola odorata ekstrakto slopinamasis poveikis 4T1 krūties vėžio modelio naviko augimui ir metastazėms

Šiame tyrime, paskelbtame žurnale "Iranian Journal of Pharmaceutical Research" (2018 m.), siūloma nustatyti, kad vaistinė žolė Viola odorata turi potencialų citotoksinį poveikį 4T1 ląstelėms.

Docetakselio prisotintos kietosios lipidų nanodalelės užkerta kelią 4T1 pelių krūties karcinomos ląstelių naviko augimui ir metastazėms plaučiuose

Šiame tyrime pasiūlyta, kad docetakselio įkrautos kietosios lipidų nanodalelės (DTX įkrautos SLN) gali būti perspektyvus krūties vėžio gydymo ir metastazių prevencijos agentas, nes jos riboja 4T1 ląstelių vėžio augimą ir plaučių metastazes.

4T1 ląstelių linijos šaltiniai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt

Toliau pateikiami keli šaltiniai apie 4T1 ląsteles:

4T1 transfekcijos pamoka: Šiame vaizdo įraše pateikiamas žingsnis po žingsnio 4T1 ląstelių linijos transfekcijos atlikimo vadovas.
Ląstelių linijos subkultivavimas: Šiame vaizdo įraše paaiškinamas adherentinių ląstelių linijų subkultavimo protokolas.

Toliau pateiktoje nuorodoje pateikiamas 4T1 ląstelių kultivavimo protokolas:

4T1 ląstelių linija: Šioje svetainės nuorodoje pateikiama visa naudinga informacija apie 4T1 kultūrų tvarkymą. Joje pateikiama informacija apie kultūros terpę, kriokonservuotų kultūrų ir proliferuojančių kultūrų tvarkymo protokolai.

Dažniausiai užduodami klausimai apie 4T1 ląstelių liniją

Nuorodos

Pulaski, B.A. ir S. Ostrand-Rosenberg, Pelės 4T1 krūties naviko modelis. Curr Protoc Immunol, 2001. 20 skyrius: p. 20.2 skyrius.
Maxwell, K.G., Immunomodulation of Breast Cancer Cells for Whole Tumor Vaccination (Krūties vėžio ląstelių imunomoduliacija viso naviko vakcinacijai ). 2016.
Walker, I., et al., Mammary tumors induce central pro-inflammatory cytokine expression, but not behavioral deficits in Balb/C mice. Scientific Reports, 2017. 7(1): p. 1-13.
Li, Y., et al., Inhibition of Stat3 signal way by natural product pectolinarigenin attenuates breast cancer metastasis (Stat3 signalinio kelio slopinimas natūraliu produktu pektolinarigeninu silpnina krūties vėžio metastazes). Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: p. 1195.
Farshchi, H.K., et al., Green synthesis of iron nanoparticles by Rosemary extract and cytotoxicity effect evaluation on cancer cell lines. Biokatalizė ir žemės ūkio biotechnologijos, 2018. 16: p. 54-62.
Gholizadeh, A.P., et al., Effect of Ginger Extract on 4T1 Breast Cancer Cell Line in Balb/c Mouse. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): p. 43-49.