U87MG ląstelės - glioblastomos tyrimai naudojant U87MG ir jų poveikis smegenų vėžio tyrimams
U87MG- pirminė žmogaus glioblastomos ląstelių linija - plačiai naudojama biologiniuose tyrimuose. Ypač šios ląstelės naudojamos neurobiologijos ir imunoonkologijos srityse.
Bendrosios U-87 MG ląstelių linijos savybės ir kilmė
Šiame skyriuje bus aptarta U-87 ląstelių linijos kilmė ir bendrosios savybės. Sužinosite, kas yra U-87 MG ląstelės? Iš kur kilusios U87 ląstelės? Kokia yra pilnoji U-87 MG forma? Kokio dydžio yra U87 ląstelės? Kokia yra U87 ląstelių linijos morfologija?
- U87 ląstelių linija yra glioblastomos, astrocitomos ląstelių linija. Ji buvo sukurta 1966 m. Upsalos universitete. Ląstelės buvo gautos iš 44 metų kaukaziečio vyro, sergančio glioblastomos liga. Ši ląstelių linija oficialiai vadinama U 87 MG, kas reiškia Uppsala 87 Malignant Glioma (Uppsala 87 piktybinė glioma).
- U 87 MG ląstelės yra panašios į epitelio ląstelių morfologiją.
- U 87 MG ląstelių dydis yra 12-14 µm skersmens.
- Ši žmogaus glioblastomos ląstelių linija yra hipodiploidinė, o maždaug 48 % ląstelių populiacijos chromosomų skaičius yra 44. Tačiau 5,9 % ląstelių populiacijos yra ir didesnio ploidiškumo.
U-87 MG ląstelių kultivavimo informacija
Prieš pradėdami dirbti su U 87 MG ląstelėmis, turėtumėte susipažinti su šiais svarbiausiais šių glioblastomos ląstelių kultivavimo klausimais. Visų pirma turėtumėte žinoti: Koks yra U 87 MG ląstelių populiacijos padvigubėjimo laikas? Kokia terpė naudojama U 87 MG ląstelėms kultivuoti? Koks yra U 87 MG ląstelių linijos pasėlio tankis?
Pagrindiniai U 87 MG ląstelių kultivavimo aspektai
|
Populiacijos padvigubėjimo laikas: |
U 87 MG ląstelių populiacijos padvigubėjimo laikas svyruoja nuo 18 iki 38 valandų. |
|
Prisitvirtinusios arba suspensijoje: |
U 87 MG yra adherentinė ląstelių linija. Ląstelės yra pailgos formos ir auga kaip monosluoksniai. |
|
Sėjimo tankis: |
Glioblastomos ląstelių liniją U 87 MG rekomenduojama sėti esant 1 x104 ląstelių/cm2 tankumui. Adheravusios U 87 ląstelės nuplaunamos naudojant 1 x PBS ir inkubuojamos su Accutase tirpalu. Po to disocijuotos ląstelės centrifuguojamos ir atkuriamos. Ląstelės atsargiai resuspenduojamos ir sudedamos į naujas kolbas su augimo terpe. |
|
Augimo terpė: |
U 87 MG ląstelių linija auginama EMEM (Eagle's minimal essential medium), papildytoje 1,0 g/l L-gliukozės, 2,0 mM L-glutamino, 2,2 g/l NaHCO3, 1 % NEAA, 1 mM natrio piruvato ir 10 % FBS tirpalu. Medžiagą reikia atnaujinti kas 2-3 dienas. |
|
Augimo sąlygos: |
U-87 MG ląstelėms optimaliai augti reikia drėkinamo inkubatoriaus su 5 % CO2 ir 37 °C temperatūros. |
|
Laikymas: |
U87 ląstelės laikomos skysto azoto garų fazėje arba žemesnėje nei -150 °C temperatūroje, kad būtų išlaikytas maksimalus glioblastomos ląstelių gyvybingumas. |
|
Šaldymo procesas ir terpė: |
U 87 MG ląstelėms užšaldyti tinka CM-1 arba CM-ACF šaldymo terpė. Rekomenduojamas lėtas užšaldymo procesas, nes jis apsaugo ląsteles nuo šoko ir apsaugo ląstelių gyvybingumą. |
|
Atšildymo procesas: |
Užšaldytos U 87 MG ląstelių linijos buteliukai atšildomi 37 °C temperatūros vandens vonelėje. Ląstelės sumaišomos su augimo terpe, resuspenduojamos ir išpilstomos į naujas kolbas. Priešingai, U87 ląsteles galima centrifuguoti, kad būtų pašalinta užšaldymo terpė, ir tada kultivuoti. |
|
Biologinės saugos lygis: |
Dirbant su U 87 MG ląstelių kultūromis reikalingas 1 biologinės saugos lygis. |
U-87 MG ląstelių privalumai ir trūkumai
Kai galvojame apie ląstelių liniją, pirmiausia į galvą ateina klausimas: kokie yra U-87 MG ląstelių naudojimo privalumai? Kokie yra U87 ląstelių trūkumai?
Privalumai
U 87 MG ląstelių linijos plačiai naudojamos moksliniams tyrimams. Keletas su šia ląstelių linija susijusių privalumų yra šie:
Privalumai
- Lengva auginti: U 87 MG ląsteles lengva išlaikyti kultūroje. Joms nereikia įmantrių ar sudėtingų ląstelių auginimo reikalavimų
- Homogeniškumas: U 87 MG yra homogeniška ląstelių linija. Dauguma populiacijos ląstelių turi tą pačią genetinę sandarą, todėl pasižymi panašiomis savybėmis. Šios ląstelės naudojamos ląsteliniams procesams tirti, vaistų atrankai ir bandymams
- Gerai apibūdinamos: Ši glioblastomos ląstelių linija yra gerai apibūdinta pagal augimo savybes, morfologiją ir genų raišką, todėl yra vertinga mokslinių tyrimų priemonė
Trūkumai
- Ribotas pritaikomumas: U 87 MG yra glioblastomos ląstelių linija, todėl jos pritaikymas pirmiausia apsiriboja glioblastomų ir su jomis susijusių molekulinių mechanizmų tyrimais. Ji gali būti netinkama kitų tipų vėžiui tirti.
Mokslinių tyrimų, kuriuose naudojamos U-87 MG ląstelės, taikymas
U87MG glioblastomos ląstelių linija plačiai naudojama vėžio tyrimams, ypač glioblastomos tyrimams. Kai kurie iš U 87 MG ląstelių mokslinių tyrimų taikymų yra šie:
- Vėžio biologijos tyrimai: U87 ląstelių linija naudojama tiriant vėžio augimą ir vystymąsi, pagrindinius molekulinius mechanizmus, signalinius kelius ir naviko mikroaplinką. 2020 m. paskelbtame tyrime glioblastomos in vitro modelis, U 87 MG ląstelių linija, naudotas BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) genui kaip terapiniam taikiniui tirti. Rezultatai parodė, kad BMAL1 genas slopina glioblastomos ląstelių proliferaciją, migraciją ir invaziją, slopindamas ciklino B1, metaloproteinazės-9 ir fosfo-AKT genų raišką [1]. Kitame 2019 m. atliktame tyrime naudota U87 ląstelių linija ir tirta, kad sumažinta lipopolisacharido sukelto naviko nekrozės faktoriaus alfa faktoriaus (LITAF) transkripcijos faktoriaus raiška gali padidinti gliomos ląstelių radiojautrumą dėl FOXO-1 kelio reguliacijos. LITAF taip pat žinomas kaip p53 sukeltas genas 7 (PIG7) [2].
- Vaistų atradimas ir kūrimas: U-87 MG ląstelės gali būti naudojamos vaistų atrankai ir bandymams, todėl mokslininkai gali nustatyti naujus potencialius priešvėžinius vaistus ir įvertinti jų veiksmingumą bei toksiškumą. Kaip tyrime naudota U 87 MG glioblastomos ląstelių linija, siekiant įvertinti Inula helenium (L.) ekstrakto antioksidacinį ir priešvėžinį aktyvumą [3]. Panašiai ir kitoje publikacijoje minima, kad augalų ekstraktų citotoksiniam ir apoptoziniam poveikiui tirti buvo naudojama U 87 ląstelių linija [4]. Be to, 2018 m. paskelbtame tyrime buvo tiriamas seskviterpeninių alkaloidų, išgautų iš Nuphar augalų, citotoksinis poveikis jautrioms ir vaistams atsparioms U 87 MG ląstelių linijoms [5].
Užsisakykite U87 MG gliomos ląstelių liniją šiandien
U-87 MG ląstelių linija: Mokslinės publikacijos
Čia pateikiamos kelios svarbios mokslinių tyrimų publikacijos apie U-87 MG ląstelių liniją.
Šiame 2018 m. žurnale "Neuroreport" paskelbtame straipsnyje siūloma, kad hipoksija gali padidinti žmogaus glioblastomos ląstelių migraciją ir invaziją reguliuojant PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α signalinį kelią.
Šis tyrimas paskelbtas žurnale "Frontiers in Pharmacology" 2020 m. Tyrimų išvadose teigiama, kad flavonoidas eriodiktolis daro priešvėžinį poveikį U87 ląstelių linijai ir slopina ląstelių proliferaciją bei metastazavimą. Šis junginys savo priešvėžines savybes įgyja moduliuodamas PI3K/Akt/NF-κB kelią.
Šis Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) tyrimas rodo, kad kinų žolelių formulė, vadinama Xihuang pill, gali indukuoti U87 ląstelių apoptozę, veikdama ROS aktyvuotą Akt/mTOR/FOXO1 kaskadą.
LITAF didina žmogaus gliomos ląstelių radiojautrumą per FoxO1 kelią
Šis mokslinis straipsnis paskelbtas 2019 m. žurnale "Cellular and Molecular Neurobiology". Tyrime siūloma, kad transkripcijos veiksnys LITAF, reguliuodamas FOXO-1 signalinį kelią, mažina ir didina gliomos ląstelių radiojautrumą.
Šis straipsnis paskelbtas žurnale "Biointerface Research in Applied Chemistry" (2019). Mokslininkai naudojo U 87 MG ląsteles, kad ištirtų kurkuminu užkrautų PLGA nanodalelių citotoksinį poveikį.
Šaltiniai, susiję su U 87 MG ląstelėmis: Rinkiniai: protokolai, vaizdo įrašai ir kt
U87MG glioblastomos ląstelių linija naudojama daugelyje vėžio tyrimų laboratorijų. Keletas šaltinių, kuriuose pateikiama ši ląstelių linija:
- U87 ląstelių linijos transfekcija: Šiame dokumente aprašomas U 87 MG ląstelių transfekcijos protokolas.
- U 87 MG ląstelių linijos transfekcija: Šiame vaizdo įraše žingsnis po žingsnio paaiškinamas U87 ląstelių transfekcijos protokolas.
Toliau pateikiamas U87 ląstelių kultūros protokolo šaltinis:
- U87 MG ląstelės: Šioje nuorodoje pateikiama pagrindinė informacija apie U 87 MG ląstelių liniją. Joje pateikiami trumpi ląstelių padalijimo, užšaldymo ir atšildymo protokolai.
Įžvalgos apie U87 MG gliomos tyrimus: Dažniausiai užduodami klausimai
Nuorodos
- Gwon, D.H. ir kt., BMAL1 slopina U87MG ląstelių proliferaciją, migraciją ir invaziją, mažindamas ciklino B1, fosfo-AKT ir metaloproteinazės-9 reguliavimą. Int J Mol Sci, 2020 m. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF Enhances Radiosensitivity of Human Glioma Cells via the FoxO1 Pathway. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., Inula helenium (L.) ekstrakto antioksidacinis ir priešvėžinis aktyvumas žmogaus U-87 MG glioblastomos ląstelių linijoje. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh, and A. Ghasempour, Cytotoxicity and apoptosis induction in breast cancer, skin cancer and glioblastoma cells by plant extracts. Mol Biol Rep, 2019 m. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al, Cytotoxicity of sesquiterpene alkaloids from Nuphar plants towards sensitive and drug-resistant cell lines (Nupharo augalų seskviterpeninių alkaloidų citotoksiškumas jautrioms ir vaistams atsparioms ląstelių linijoms ). Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.