T98G ląstelių linija
T98G ląstelės yra žmogaus glioblastomos ląstelių linija, paprastai naudojama biomedicininiuose tyrimuose. Ypač šios ląstelės naudojamos smegenų vėžio tyrimams, siekiant ištirti svarbiausias ląsteles ir molekulinius veiksnius, lemiančius vėžį. Be to, jos padeda mokslininkams atrinkti ir išbandyti naujus vaistus nuo vėžio, kurie gali padėti kurti vaistus.
Šiame straipsnyje bus pateikta visa esminė informacija apie T98G ląstelių liniją, kurios jums prireiks prieš pradedant su ja dirbti, pvz:
- Bendrosios T98G ląstelių linijos savybės ir kilmė
- Informacija apie T98G ląstelių linijos kultivavimą
- T98G ląstelių linija: Privalumai ir trūkumai
- T98G ląstelių panaudojimas
- Mokslinės publikacijos su T98G ląstelėmis
- T98G ląstelėms skirti ištekliai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt
1. Bendrosios T98G ląstelių linijos savybės ir kilmė
Ši straipsnio dalis padės jums išnagrinėti pagrindines T98G ląstelių linijos savybes. Jame bus pateikta informacija apie ląstelių linijos kilmę, morfologiją, dydį ir ploidiją. Be to, jame bus išsamiai paaiškinta, kas yra šie klausimai: Kas yra T98G ląstelės? Kokio tipo ląstelės yra T98G? Iš kur atsirado T98G? Kokios yra T98G ląstelių linijos savybės? Kas yra glioblastomos ląstelių linija T98G U87?
- T98G ląstelių liniją sukūrė GH Stein. Ją sudaro į fibroblastus panašios ląstelės, gautos iš 61 metų kaukaziečio vyro, sergančio daugiaforme glioblastoma, smegenų audinio [1].
- T98G ląstelės yra netumorigeninės; įšvirkštos nuogoms pelėms jos nesukelia navikų. Tačiau jos linkusios daugintis esant tinkamam įtvirtinimui ląstelių kultūroje.
- Šios ląstelės pasižymi į fibroblastines ląsteles panašia morfologija.
- Glioblastomos ląstelių linija T98G pasižymi hiperpentaploidija. Modalinis chromosomų skaičius svyruoja nuo 128 iki 132. Didesnės ploidijos gali būti 1,39 % ląstelių populiacijos.
T98 ir T98G
Abi šios linijos yra žmogaus glioblastomos ląstelių linijos ir yra panašios kilmės. Vienintelis šių ląstelių linijų skirtumas - chromosomų skaičius. T98G turi beveik dvigubai daugiau chromosomų nei T98. Todėl T98G vadinama poliploidiniu T98 variantu.
T98G ir U87
U87 ir T98G yra žmogaus glioblastomos ląstelių linijos, naudojamos smegenų vėžio tyrimams. U87 pasižymi agresyvesniu fenotipu, palyginti su T98G GBM.
2. Informacija apie T98G ląstelių linijos kultivavimą
Prieš pradedant dirbti su ląstelių linija, labai svarbu žinoti su ja susijusią kultivavimo informaciją. Ji padės jums lengvai ir patogiai dirbti su ląstelių linija laboratorijoje. Turėtumėte žinoti: Koks yra T98G ląstelių linijos padvigubėjimo laikas? Kokia augimo terpė geriausiai tinka T98G ląstelėms? Kokios yra T98G augimo charakteristikos? Koks yra T98G ląstelių sėjos tankis? Kaip užšaldyti T98G ląsteles?
Pagrindiniai T98G ląstelių kultivavimo punktai
|
Padvigubėjimo laikas: |
T98G ląstelių padvigubėjimo laikas yra apytiksliai 40 valandų. Jis gali skirtis priklausomai nuo kultivavimo sąlygų. |
|
Prigludusios arba suspenduotos: |
T98G ląstelės yra prigludusios. Jos prisitvirtina prie kultūrų indų dugno ir sudaro vienaląsčius sluoksnius. |
|
Padalijimo santykis: |
T98G ląstelės kultivuojamos dalimis santykiu nuo 1:2 iki 1:5. Tam ląstelės pirmiausia plaunamos 1 X PBS buferiniu tirpalu, tada 8-10 minučių kambario temperatūroje inkubuojamos su perėjimo tirpalu (Accutase). Po inkubacijos atskirtos ląstelės sudedamos į šviežią augimo terpę ir centrifuguojamos. Tada surinktos ląstelių granulės atsargiai resuspenduojamos ir ląstelės išpilstomos į kolbą su augimo terpe. |
|
Augimo terpė: |
T98G ląstelėms auginti naudojama EMEM terpė, kurioje yra 10 % galvijų fetalinio serumo, 2 mM L-glutamino, 2,2 g/l NaHCO3 ir EBSS. Medžiaga turėtų būti keičiama 3-4 kartus per savaitę. |
|
Augimo sąlygos: |
T98G ląstelės laikomos drėkinamajame inkubatoriuje, kurio temperatūra 37 °C, ir prijungtos prie CO2 šaltinio. |
|
Laikymas: |
Užšaldytas ląsteles galima laikyti žemesnėje nei -150 °C temperatūroje arba skysto azoto garų fazėje, kad ilgiau būtų išsaugotas ląstelių gyvybingumas. |
|
Šaldymo procesas ir terpė: |
T98G ląsteles rekomenduojama užšaldyti CM-1 arba CM-ACF ląstelių šaldymo terpėje. Tam siūloma naudoti lėtą šaldymo procesą, kai temperatūra per minutę sumažėja tik 1 °C. Tai apsaugo ląsteles nuo šoko ir išlaiko jų gyvybingumą. |
|
Atšildymo procesas: |
Užšaldytos ląstelės atsargiai atšildomos dedant jas į iš anksto pašildytą 37 °C temperatūros vandens vonelę 40-60 sekundžių. Po to jos vėl ištirpinamos šviežioje augimo terpėje ir perkeliamos į naują kolbą. Po 24 valandų inkubacijos terpė pakeičiama, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai. |
|
Biologinės saugos lygis: |
T98G kultūros laikomos pirmojo biologinės saugos lygio laboratorijoje. |
3. T98G ląstelių linija: Privalumai ir trūkumai
T98G yra plačiai naudojama žmogaus glioblastomos ląstelių linija. Ji turi keletą privalumų ir trūkumų, kurie ją išskiria iš kitų. Keletas svarbiausių iš jų aptariami šiame straipsnio skyriuje.
Privalumai
T98G ląstelių privalumai:
-
Gerai apibūdintos
Gerai nustatyta ir gerai apibūdinta ląstelių linija. Plačiai ištirta ir dokumentais pagrįsta literatūra.
-
In vitro modelis
Atspindi glioblastomos, agresyviausio smegenų naviko, savybes. Vertinga priemonė ligai tirti, biologijai suprasti ir gydymui kurti.
Trūkumai
Su T98G ląstelėmis susiję šie trūkumai:
-
Heterogeniškumas
T98G ląstelių populiacijos genetinis heterogeniškumas gali lemti eksperimentų rezultatų nenuoseklumą ir apsunkinti duomenų interpretavimą.
4. T98G ląstelių taikymas
T98G ląstelių linija yra vertinga priemonė, naudojama vėžio tyrimams. Čia išvardyti keli svarbiausi T98G ląstelių panaudojimo moksliniams tyrimams atvejai:
- Vėžio tyrimai: T98G ląstelių linija yra vertinga priemonė glioblastomos navikų biologijai tirti. Šios ląstelės daugiausia naudojamos sudėtingiems molekuliniams keliams, kuriais grindžiamas glioblastomos ligos vystymasis ir progresavimas, tirti. Be to, jos naudojamos genetinėms mutacijoms, skatinančioms naviko augimą, ir kitiems vėžinių ląstelių mechanizmams nustatyti. Yang Chen su kolegomis dirbo su šiomis ląstelėmis ir nustatė, kad per didelė miRNA-21 ekspresija mažina PDCD4 (Programmed cell death protein 4) kiekį T98G ląstelėse. Dėl to slopinama PDCD4 tarpininkaujama T98G ląstelių apoptozė. Taigi, šis tyrimas rodo, kad miRNa-21 yra potencialus taikinys terapijai kurti [2]. Panašiai kaip ir šiame tyrime, Fanqiang Kong su kolegomis tyrė mikroRNA-15a vaidmenį T98G glioblastomos ląstelių proliferacijai ir invazijai. Jie nustatė, kad miRNA-15a-5p skatina šiuos ląstelių procesus, veikdama 1 ląstelių adhezijos molekulę (CADM1) [3].
- Vaistų tyrimas ir terapinis vystymas: T98G yra puikus glioblastomos in vitro modelis naujiems vaistams tirti ir platforma, leidžianti įvertinti galimų vėžio gydymo būdų veiksmingumą. Mokslininkai taip pat išbando įvairius junginius ir gydymo būdus, kad nustatytų ir atrastų kandidatus į vaistus, pasižyminčius perspektyviausiomis antiglioblastomos savybėmis. Taip kuriami nauji vaistai ir gydymo strategijos, suteikiančios vilties glioblastoma sergantiems pacientams. Tokio tyrimo metu buvo tiriamas natūralaus junginio, vadinamo korilaginu, priešvėžinis potencialas temozolomidui atsparioje T98G GBM ląstelių linijoje. Tyrimo išvadose siūloma, kad korilaginas kartu su temozolomidu sukelia didesnį antiproliferacinį ir antiapoptozinį poveikį ląstelėms [4].
5. Mokslinių tyrimų publikacijos su T98G ląstelėmis
Toliau pateikiama keletas įdomių ir dažnai cituojamų mokslinių publikacijų apie glioblastomos ląstelių liniją T98G.
REV-ERB agonisto SR9009 chemoterapinis poveikis žmogaus glioblastomos T98G ląstelėms
Šioje ASN Neuro (2019) publikacijoje buvo tiriamas priešvėžinis REV-ERB agonisto SR9009 poveikis T98G glioblastomos ląstelėms.
Šiame moksliniame straipsnyje Neurochemical research (2019) siūloma, kad natrio butiratas ir kvercetinas sinergiškai slopina apsauginę autofagiją T98G ląstelėse ir didina ląstelių apoptozę.
Šiame tyrime, paskelbtame žurnale "Genes" (2023), buvo atliktas hipoksijai adaptuotos T98G ląstelių linijos RNR sekoskaitos tyrimas ir pasiūlyta, kad IRE1 (inozitolio reikalaujantis fermentas 1) yra perspektyvus terapinis taikinys.
Mikro RNR-548c-3p slopina T98G gliomos ląstelių proliferaciją ir migraciją, slopindama c-Myb
Šis straipsnis paskelbtas žurnale "Oncology Letters" (2017 m.). Tyrime ištirta, kad miRNA-548c-3p veikia T98G onkogeną (c-Myb), slopindama T98G ląstelių proliferaciją ir migraciją.
Šiame 2011 m. žurnale "Journal of Medicinal Plants Research" paskelbtame straipsnyje siūloma, kad Dracocephalum tanguticum chloroforminis ekstraktas daro antiproliferacinį poveikį T98G ląstelėms, moduliuodamas kaspazės-3, Bax ir P21 genus.
6. T98G ląstelėms skirti šaltiniai: T9898 šaltiniai: protokolai, vaizdo įrašai ir kt
Čia paminėti turimi ištekliai, kuriuose pateikiami T98G ląstelių auginimo ir transfekcijos protokolai.
- T98G transfekcija: Šiame moksliniame straipsnyje pateikiamas T98G transfekcijos protokolas. Jame trumpai paaiškinamas metodas ir reikalingi reagentai.
Toliau pateiktos nuorodos labai padės jums išmokti T98G ląstelių kultivavimo protokolą ir palengvins darbą su juo.
- T98G ląstelės: Šioje interneto svetainėje pateikiama svarbiausia informacija apie T98G ląstelių auginimo protokolus, įskaitant subkultūravimą ir proliferacinių bei kriokonservuotų kultūrų tvarkymą. Be to, ji taip pat padės jums sužinoti ląstelių auginimo terpę, sąlygas ir padvigubėjimo laiką.
Nuorodos
- Haehl, E., Endotelio ląstelių sukeltas radiorezistentiškumas glioblastomoje. 2021, Tiubingeno universitetas.
- Chen, Y., et al, MicroRNA-21 down-regulates the expression of tumor suppressor PDCD4 in human glioblastoma cell T98G. Vėžio laiškai, 2008 m. 272(2): p. 197-205.
- Kong, F., et al., MicroRNA-15a-5pskatina T98G glioblastomos ląstelių proliferaciją ir invaziją, veikdama 1 ląstelių adhezijos molekulę. Oncology Letters, 2021. 21(2): p. 1-1.
- Milani, R., et al., Corilagin Induces High Levels of Apoptosis in the Temozolomide-Resistant T98G Glioma Cell Line. Oncol Res, 2018. 26(9): p. 1307-1315.