SiHa ląstelės - gimdos kaklelio vėžio tyrimų šviesa

SiHa ląstelės yra gimdos kaklelio vėžio ląstelės, plačiai naudojamos biomedicininiuose tyrimuose. Jos yra puikios transfekcijos šeimininkės, todėl tinka genų raiškos tyrimams. Dėl savo žmogiškosios kilmės ir gimdos kaklelio vėžio svarbos šios ląstelės daugiausia naudojamos vėžio biologijos, virusologijos ir vaistų kūrimo tyrimuose.

Bendrosios SiHa ląstelių savybės ir kilmė

Labai svarbu suprasti ląstelių linijos kilmę ir bendrąsias savybes, nes tai turi įtakos jos naudojimui jūsų tyrimuose. Šiame straipsnio skyriuje sužinosite apie SiHa ląstelių linijos kilmę, išskirtines savybes ir daug daugiau: Kas yra SiHa vėžio ląstelių linija? Kas yra SiHa ląstelių ŽPV? Kokia yra SiHa ląstelių linijos kilmė? Kokia yra SiHa morfologija?

  • Gimdos kaklelio karcinomos ląstelių linija SiHa buvo gauta iš pirminės gimdos biopsijos fragmentų, paimtų iš azijietės (55 metų amžiaus), sergančios plokščialąsteliniu vėžiu [1].
  • SiHa ląstelių linija pasižymi hipertriploidiniu kariotipu. Daugumos ląstelių vidutinis chromosomų skaičius yra 69-72. Tačiau apie 24 % ląstelių turi 71 chromosomą.
  • SiHa ląstelės yra teigiamos žmogaus papilomos viruso 16 atžvilgiu. Joms būdinga maždaug 1-2 ŽPV genomo kopijų integracija kiekvienoje ląstelėje [2].
  • Šios gimdos kaklelio vėžio ląstelės pasižymi epitelio morfologija.

HeLa gimdos kaklelio vėžio ląstelių dalijimasis mikroskopu.

SiHa ląstelių linija: Auginimo informacija

Palaikyti ląstelių linijos kultūrą nėra lengva, kol nežinote visų svarbiausių jos kultivavimo dalykų. Turėtumėte žinoti: Koks yra SiHa padvigubėjimo laikas? Kas yra "SiHa" ląstelių terpė? Kaip auginti SiHa ląstelių liniją?

Pagrindiniai SiHa ląstelių kultivavimo aspektai

Padvigubėjimo laikas:

SiHa ląstelių padvigubėjimo laikas yra maždaug 17 valandų.

Prigludusios arba suspenduotos:

SiHa yra adherentinė ląstelių linija.

Subkultivavimo santykis:

SiHa ląstelių subkultivavimo santykis yra nuo 1:2 iki 1:4. Perdavimui adherentinės ląstelės skalaujamos 1x PBS. Įpilama akutazės tirpalo ir ląstelės inkubuojamos 8-10 min. aplinkos temperatūroje. Tada įpilama auginimo terpės ir ląstelės centrifuguojamos. Ląstelių granulės resuspenduojamos ir ląstelės perpilamos į naują kolbą, kurioje bus kultivuojamos.

Auginimo terpė:

Eagle's minimum essential medium (EMEM), kurioje yra 10 % FBS, 2 mM L-Glutamino, 2,2 g/l NaHCO3 ir Earle's Balanced Salt Solution (EBSS), naudojama idealiam SiHa ląstelių augimui. Medžiaga keičiama 2-3 kartus per savaitę.

Augimo sąlygos:

SiHa ląstelės laikomos 37 °C temperatūros drėkinamame inkubatoriuje su 5 % CO2.

Laikymas:

SiHa gimdos kaklelio vėžio ląstelių linijos buteliukai laikomi žemesnėje nei -150 °C temperatūroje elektriniame šaldiklyje arba skysto azoto garų fazėje ilgesnį laiką.

Šaldymo procesas ir terpė:

SiHa ląstelėms užšaldyti naudojama CM-1 arba CM-ACF šaldymo terpė. Ląstelės užšaldomos taikant lėto užšaldymo metodą, kai per minutę temperatūra sumažėja tik 1 °C, kad būtų apsaugotas ląstelių gyvybingumas.

Atšildymo procesas:

Užšaldytos ląstelės 40-60 sekundžių laikomos 37 °C temperatūros vandens vonelėje, kol lieka nedidelis ledo gabalėlis. Po to įpilama šviežios augimo terpės ir ląstelės centrifuguojamos, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai. Ląstelių granulės resuspenduojamos ir ląstelės išpilstomos į auginimo kolbą.

Biologinės saugos lygis:

SiHa ląstelių kultūroms tvarkyti ir prižiūrėti reikalinga 1 biologinės saugos lygio laboratorija.

Prigludęs SiHa ląstelių sluoksnis 10× ir 20× padidinimu.

SiHa ląstelių linijos privalumai ir trūkumai

Kaip ir kitos žmogaus karcinomos ląstelių linijos, SiHa taip pat pasižymi tam tikromis savitomis savybėmis, susijusiomis su tam tikrais privalumais ir trūkumais. Čia aptarėme keletą svarbiausių iš jų.

SiHa gimdos kaklelio vėžio ląstelių linijos privalumai

  • Gimdos kaklelio vėžio modelis
    • Gauta iš gimdos kaklelio plokščialąstelinės karcinomos.
    • Naudojama gimdos kaklelio vėžio mechanizmams, augimui ir vystymuisi tirti.
    • Išreiškia genus p53+ ir pRB+, kurie susiję su DNR taisymu, ląstelių ciklo reguliavimu ir naviko slopinimu.
  • Navikinis potencialas
    • SiHa ląstelės yra tumorigeninės ir gali sukelti blogai diferencijuotus III laipsnio epidermoidinius navikus nuogoms pelėms.
    • Naudojamos in vivo vėžio tyrimams ir priešvėžiniam gydymui išbandyti.

SiHa ląstelių trūkumai

  • Proliferacijos greitis
    • SiHa ląstelės sparčiai dauginasi, todėl perauga.
    • Reikalingas dažnas pasažavimas, todėl didėja genetinio nestabilumo rizika, kuri ilgainiui gali turėti įtakos ląstelių elgsenai.

SiHa ląstelių pritaikymas moksliniams tyrimams

SiHa ląstelių linija plačiai naudojama gimdos kaklelio vėžio tyrimams. Čia aptariamos kelios konkrečios šios ląstelių linijos taikymo sritys.

  • Su žmogaus papilomos virusu (ŽPV) susiję tyrimai: SiHa ląstelės yra teigiamos ŽPV 16 virusui, todėl jos yra vertingas objektas tiriant žmogaus papilomos viruso infekciją, jos molekulinius mechanizmus ir vaidmenį gimdos kaklelio vėžio vystymuisi ir progresavimui. Mokslininkai taip pat naudoja šias ląsteles viruso replikacijai, integracijai ir jo poveikiui ląstelės šeimininkės procesams tirti. 2020 m. atliktame tyrime SiHa ląstelių linija buvo naudojama tiriant ŽPV E6/E7 onkoproteinų vaidmenį gimdos kaklelio vėžio vystymuisi, nukreipiant į ją CRISPR technologiją. Rezultatai atskleidė, kad E6/E7 genų nukabinimas sukėlė SiHa ląstelių augimo slopinimą ir apoptozę. Todėl šie viruso genai gali būti labai svarbūs vaistų taikiniai kuriant gydymo priemones nuo su ŽPV susijusio gimdos kaklelio vėžio [3].
  • Vėžio biologija: SiHa ląstelės yra neįkainojamas modelis gimdos kaklelio vėžio biologijai, įskaitant vėžio vystymąsi, progresavimą, metastazes ir invaziją, tirti. Mokslininkai šias ląsteles naudoja genetinėms mutacijoms ir pagrindiniams molekuliniams keliams, lemiantiems gimdos kaklelio vėžio vystymąsi ir augimą, ištirti, pavyzdžiui, atliekant tyrimą buvo panaudotos SiHa ląstelės ir nustatyta, kad padidėjęs SEC61G (SEC61 translokono subvieneto gama) reguliavimas skatina gimdos kaklelio vėžio ląstelių proliferaciją aktyvuojant MAPK kaskadą [4].
  • Vaistų atranka ir tyrimai: SiHa yra plačiai naudojama gimdos kaklelio vėžio linija, skirta įvertinti galimų priešvėžinių vaistų, specifinių su ŽPV susijusiam gimdos kaklelio vėžiui, veiksmingumą. Mokslininkai, naudodami šias ląsteles, tiria vaistų antiproliferacinį, apoptozinį ir antimetastazinį potencialą. Pavyzdžiui, 2019 m. atliktas tyrimas, kurio metu buvo tiriamas Vatica diospyroides Symington Type SS vaisių ekstraktų citotoksinis potencialas SiHa gimdos kaklelio vėžio ląstelių linijai [5].

"SiHa" ląstelės jūsų tyrimams!

Mokslinių tyrimų publikacijos su "SiHa" ląstelėmis

Kai kuriose svarbiose ir dažnai cituojamose mokslinių tyrimų publikacijose naudojama gimdos kaklelio plokščiosios karcinomos ląstelių linija SiHa.

Priešvėžinis alavijo emodino poveikis gimdos kaklelio vėžio ląstelėms susijęs su žmogaus papilomos viruso E6/E7 ir gliukozės metabolizmu

Šioje publikacijoje žurnale OncoTargets and Therapy (2019 m.) siūloma, kad natūralus junginys aloe-emodinas gimdos kaklelio vėžio ląstelėms SiHa daro su ŽPV E6/E7 ir gliukozės metabolizmu susijusį apoptozinį poveikį.

Excoecaria agallocha (L.) lapų ekstrakto priešvėžinio poveikio žmogaus gimdos kaklelio vėžio (SiHa) ląstelių linijai vertinimas ir pagrindinio veikimo mechanizmo įvertinimas

Šis straipsnis buvo paskelbtas žurnale Future Journal of Pharmaceutical Sciences 2022 m. Šiame tyrime buvo tiriamas Excoecaria agallocha (L.) augalo lapų ekstrakto priešvėžinis aktyvumas SiHa gimdos kaklelio vėžio ląstelių linijoje.

1, 10-fenantrolino, sujungto su sulfatuotomis ZnO nanodalelėmis, antiproliferacinis poveikis SiHa gimdos kaklelio vėžio ląstelių linijai

Šiame tyrime, paskelbtame žurnale "Journal of Sol-Gel Science and Technology" (2022), siūloma, kad 1, 10-fenantrolino molekulė, susijungusi su cinko sulfato nanodalelėmis, daro reikšmingą antiproliferacinį poveikį SiHa ląstelėms.

Astragalozidas IV slopina SiHa gimdos kaklelio vėžio ląstelių invaziją ir metastazavimą per TGF-β1 tarpininkaujamus PI3K ir MAPK kelius

Šis tyrimas buvo paskelbtas 2019 m. žurnale "Oncology Reports". Tyrimas atskleidė, kad natūralus produktas astragalozidas IV slopina SiHa ląstelių migraciją ir invaziją moduliuodamas TGF-β1 medijuojamus PI3K ir MAPK signalinius kelius.

IFI16 skatina gimdos kaklelio vėžio progresavimą, sureguliuodamas PD-L1 imunomikroaplinkoje per STING-TBK1-NF-kB kelią

Šis "Biomedicine & Pharmacotherapy" (2020) tyrimas atskleidė, kad IFI16 (interferono gama indukuojamas baltymas 16) reguliuoja PD-L1 geną aktyvindamas STING-TBK1-NF-kB kelią ir taip skatina gimdos kaklelio vėžio SiHa ląstelių augimą.

SiHa ląstelių linijos ištekliai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt

Čia pateikiami keli internetiniai šaltiniai, kuriuose aprašomos SiHa ląstelės.

  • SiHa ląstelių transfekcija: Šiame moksliniame straipsnyje pateikiamas SiHa gimdos kaklelio vėžio ląstelių palaikymo ir SiHa ląstelių transfekcijos protokolas.

Šioje nuorodoje pateikiama informacija apie SiHa ląstelių auginimą.

  • SiHa ląstelių linija: Šioje svetainėje pateikiama daug vertingų duomenų apie SiHa ląstelių liniją. Tai informacija apie augimo terpę, auginimo sąlygas, SiHa ląstelių subkultūrinimo protokolus ir jos proliferacinių bei kriokonservuotų kultūrų tvarkymą.

DUK apie "SiHa" gimdos kaklelio karcinomos ląsteles

Nuorodos

  1. Melzer, C., J. von der Ohe ir R. Hass, Glausta apžvalga: mezenchiminės stromos ir kamieninių ląstelių sąveika su vėžinėmis ląstelėmis suteikia terapinį potencialą. Kamieninės ląstelės, 2018. 36(7): p. 951-968.
  2. Ostrowska, K. M., et al. didelės rizikos žmogaus papilomos viruso įtakos gimdos kaklelio vėžio ląstelių biocheminei sudėčiai tyrimas naudojant vibracinę spektroskopiją. Analitikas, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
  3. Chen, Y., et al., In vitro and in vivo growth inhibition of human cervical cancer cells via human papillomavirus E6/E7 mRNAs' cleavage by CRISPR/Cas13a system. Antivirusiniai tyrimai, 2020 m. 178: p. 104794.
  4. Fan, Y., et al, SEC61G skatina gimdos kaklelio vėžio proliferaciją aktyvuojant MAPK signalinį kelią. Disease Markers, 2022. 2022.
  5. Chothiphirat, A., et al., Anticancer potential of fruit extracts from Vatica diospyroides symington type SS and their effect on program cell death of cervical cancer cell lines. Mokslo pasaulio žurnalas, 2019 m. 2019.

Nustatėme, kad esate kitoje šalyje arba naudojate kitą naršyklės kalbą nei šiuo metu pasirinkta. Ar norite priimti siūlomus nustatymus?

Uždaryti