RBL-2H3 ląstelės - RBL-2H3 reikšmė alerginės reakcijos ir imunologiniams tyrimams

RBL-2H3 ląstelių linija - tai žiurkių bazofilinių leukeminių ląstelių linija, naudojama imunologiniuose tyrimuose. Ji naudojama kaip modelinė sistema tiriant putliųjų ląstelių fiziologiją, elgseną ir funkcijas. Šios ląstelės taip pat naudojamos tiriant alergines reakcijas, imunologinius procesus ir vaistų bandymus bei kūrimą.

Straipsnyje pateikiama informacija apie RBL-2H3 kilmę, bendrąsias savybes, auginimo reikalavimus ir taikymą moksliniuose tyrimuose.

RBL-2H3 ląstelės: Kilmė ir bendrosios savybės

Prieš naudodami bazofilinių ląstelių liniją savo tyrimuose, turėtumėte žinoti jos kilmę ir bendrąsias savybes. Šioje straipsnio dalyje sužinosite apie RBL-2H3 ląstelių pagrindus. Pavyzdžiui, kas yra RBL-2H3 mastocitų ląstelės? Kodėl reikia naudoti RBL-2H3 ląsteles? Kas yra RBL-2H3 ląstelės žiurkių bazofilinėje leukemijoje? Kokia yra RBL-2H3 morfologija? Ar RBL-2H3 ląstelės yra nemirtingos?

  • RBL-2H3 yra bazofilinės leukemijos ląstelės, gautos iš Wistar žiurkių bazofilinių ląstelių 1978 m. Nacionalinio dantų tyrimų instituto Imunologijos laboratorijoje.
  • RBL-2H3 ląstelės turi c-kit receptorių tirozinkinazės ir putliųjų ląstelių proteazės II (RMCP-II) receptorių, todėl jos gali būti putliųjų ląstelių modelis. Todėl jos paprastai vadinamos putliosiomis ląstelėmis, nepaisant to, kad yra kilusios iš žiurkių bazofilų [1].
  • Aktyvuodamos jos išskiria histaminą ir kitus mediatorius ir ekspresuoja didelio afiniteto IgE receptorius.
  • RBL-2H3 ląstelės pasižymi į fibroblastus panašia morfologija.

Mikroskopinė putliųjų ląstelių vizualizacija.

RBL-2H3 ląstelės: Informacija apie kultivavimą

Šiame skyriuje sužinosite kai kuriuos svarbiausius RBL-2H3 ląstelių linijos kultivavimo aspektus. Sužinosite: Kas yra RBL-2H3 ląstelių padvigubėjimo laikas? Koks yra RBL-2H3 ląstelių pasėlio tankis? Koks yra RBL-2H3 ląstelių auginimo protokolas? Kas yra RBL-2H3 ląstelių linijos šaldymo terpė?

Pagrindiniai RBL-2H3 ląstelių kultivavimo aspektai

Populiacijos padvigubėjimo laikas:

RBL-2H3 putliųjų ląstelių padvigubėjimo laikas yra maždaug 50-60 valandų.

Prigludusios arba suspenduotos:

RBL-2H3 yra adherentinė ląstelių linija.

Subkultivavimo santykis:

RBL-2H3 ląstelės dalijamos santykiu nuo 1:2 iki 1:4. Adherentinės ląstelės plaunamos 1 x PBS tirpalu be magnio ir kalcio. Įpilamas pasišalinimo tirpalas "Accutase" ir ląstelės 10 min. palaikomos aplinkos temperatūroje, kad atsiskirtų nuo kultivacijos indo dugno. Įpilama šviežios terpės ir ląstelės centrifuguojamos. Surinktos ląstelės atsargiai resuspenduojamos šviežioje terpėje ir supilamos į naujas kolbas su augimo terpe.

Augimo terpė:

RBL-2H3 ląstelėms auginti naudojama EMEM terpė, kurioje yra 10 % FBS, 2 mM L-Glutamino, 2,2 g/l NaHCO3 ir EBSS druskos. Medžiaga turėtų būti keičiama 2-3 kartus per savaitę.

Augimo sąlygos:

RBL-2H3 ląstelės auginamos drėkinamame inkubatoriuje, kurio temperatūra - 37 °C, prijungtame prie 5 %CO2 šaltinio.

Laikymas:

Ląstelės laikomos skysto azoto garų fazėje arba žemesnėje nei -150 °C temperatūroje elektriniame šaldiklyje, kad ląstelės ilgai išliktų gyvybingos.

Šaldymo procesas ir terpė:

RBL-2H3 ląstelėms užšaldyti naudojama CM-1 arba CM-ACF užšaldymo terpė, naudojant lėtą užšaldymo procesą. Trumpai tariant, šis metodas leidžia sumažinti temperatūrą 1 °C per minutę ir apsaugo ląsteles nuo šoko.

Atšildymo procesas:

RBL-2H3 ląstelės atšildomos iš anksto nustatytoje vandens vonelėje (37 °C) maždaug 60 sekundžių. Po to ląstelės sudedamos į šviežią terpę ir centrifuguojamos. Šis etapas būtinas, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai. Po to ląstelių granulės resuspenduojamos augimo terpėje ir ląstelės išpilstomos į kolbą kultivavimui.

Biologinės saugos lygis:

RBL-2H3 ląstelės turėtų būti laikomos 1 biologinės saugos lygio laboratorijose.

Adheravusios RBL-2H3 ląstelių monosluoksniai, esant skirtingam susiliejimui, 20 ir 10 kartų padidinti.

RBL-2H3 bazofilinių ląstelių linijos privalumai ir apribojimai

RBL-2H3 ląstelės paprastai naudojamos imunologiniuose tyrimuose. Šiame skyriuje aprašomi pagrindiniai jų privalumai ir trūkumai.

Privalumai

  • Lengva auginti: RBL-2H3 ląstelės lengvai auginamos ir palaikomos laboratorijos aplinkoje. Tai palengvina ekonomiškai efektyvius ir atkuriamus eksperimentus, todėl jos yra populiarus pasirinkimas pradiniams imunologijos tyrimams.

Apribojimai

  • Ne žmogaus kilmės: RBL-2H3 ląstelės yra kilusios iš žiurkių bazofilų, todėl gali netiksliai imituoti žmogaus biologinius procesus, o tai gali apriboti jų pritaikomumą atliekant konkretaus žmogaus mokslinius tyrimus. Dėl to būtina atsargiai interpretuoti duomenis ekstrapoliuojant rezultatus žmogaus sistemoms.
  • Supaprastintas Mastinių ląstelių modelis: Nors šios ląstelės yra pagrindinis modelis putliųjų ląstelių funkcijoms tirti, jos nevisiškai atspindi sudėtingą putliųjų ląstelių sąveikos pobūdį žmogaus imuninėje sistemoje. Todėl jie gali netinkamai modeliuoti įvairiapusį putliųjų ląstelių vaidmenį imuninėse reakcijose ar ligų būklėse in vivo.

RBL-2H3 ląstelių linija: Imunologinių tyrimų kertinis akmuo

Bazofilų ir putliųjų ląstelių tyrimai naudojant RBL-2H3 ląstelių liniją

RBL-2H3 ląstelių linija, gauta iš Rattus norvegicus, yra pagrindinis bazofilų ir putliųjų ląstelių biologijos tyrimų modelis. Šios žiurkių putliosios ląstelės suteikia svarbių žinių apie putliųjų ląstelių mediatorių išsiskyrimą, o tai labai svarbu norint suprasti alergines būkles, pavyzdžiui, alerginį rinitą. Naudodamiesi šiomis ląstelėmis mokslininkai tiria ląstelių receptorių dinamiką ir imunologinių sinapsių susidarymą, kurie yra svarbiausi imuninės sistemos atsakui į alergenus. 2019 m. paskelbtame įdomiame tyrime buvo naudojama RBL-2H3 ląstelių linija ir tiriami mechanizmai, lemiantys pseudoalergines reakcijas, sukeliamas Cingkailingo injekcijos. Tyrimo metu nustatyta, kad PI3K-RAC1 signalinė kaskada iš dalies sukelia šią alerginę reakciją ląstelėse [2]

Imunologinių sinapsių dinamika alergijos tyrimuose

RBL-2H3 ląstelės, plačiai naudojamos imunologiniuose tyrimuose, yra ypač veiksmingos tiriant imunologinių sinapsių dinamiką. Tai padeda išsiaiškinti imuninės sistemos komunikacijos procesus, kurie taikomi tiriant tiek periferinio kraujo, tiek peritonines putliąsias ląsteles. Tokie tyrimai yra labai svarbūs siekiant visapusiškai suprasti imuninį atsaką tiek sisteminiu, tiek lokaliu požiūriu

Vaistų atrankinė patikra ir toksiškumo tyrimai

Atliekant vaistų atranką ir bandymus, naudojamas RBL ląstelių reagavimas į įvairius dirgiklius, įskaitant tyrimą, kaip H2O2 slopina IgE medijuojamą atsaką. Šios ląstelės atlieka svarbų vaidmenį kuriant gydymo būdus tokioms ligoms, kaip streptokokinės infekcijos, kai mitis grupės streptokokai slopina putliųjų ląstelių aktyvaciją. Be to, tyrėjai, naudodami šį RBL 2H3 mc modelį, vertina įvairių medžiagų, įskaitant chemines medžiagas, vaistus ir nanodaleles, toksinį poveikį. Pavyzdžiui, neseniai atliktame tyrime (2022 m.) buvo vertinamas polistireno mikroplastiko citotoksiškumas RBL 2H3 ląstelėms. Jie nustatė, kad mikroplastikas pažeidžia RBL-2H3 ląstelių organeles ir skatina ląstelių mirtį [3]. Kitame 2021 m. atliktame tyrime buvo įvertintas antialerginis ir priešuždegiminis natūralaus produkto - neferino - potencialas, naudojant RBL 2H3 mc modelį. Tyrimas atskleidė, kad junginys pasižymi geromis antialerginėmis ir priešuždegiminėmis savybėmis [4]

Pažangios imunologinių matavimų metodikos

Dėl nuoseklaus ir išmatuojamo mediatorių išsiskyrimo iš RBL 2H3 ląstelių jos idealiai tinka patogiai fluorimetrijai, palengvinančiai tikslius ir preciziškus matavimus, labai svarbius ligų tyrimams ir gydomųjų preparatų vertinimui.

RBL-2H3 ląstelių linija, kilusi iš Rattus norvegicus, yra neįkainojama vertybė tiek fundamentiniuose, tiek taikomuosiuose imunologijos srities tyrimuose. Ji suteikia didelių galimybių tobulinti žinias apie imunologines ligas ir jų gydymą

RBL-2H3 ląstelių linija pažangiems imunologiniams tyrimams

RBL-2H3 ląstelės: Mokslinės publikacijos

Toliau pateikiamos įdomios mokslinių tyrimų publikacijos, kuriose aptariamos RBL-2H3 putliosios ląstelės:

Narirutino slopinamasis poveikis RBL-2H3 ląstelių degranuliacijai

Šis mokslinis straipsnis paskelbtas žurnale "Immunopharmacology and Immunotoxicology" (2021 m.). Tyrime siūloma, kad natūralus junginys narirutinas daro slopinamąjį poveikį RBL 2H3 degranuliacijai reguliuodamas NF-κB, MAPK ir tirozinkinazės signalinį kelią.

Apigenino poveikis RBL-2H3, RAW264. 7 ir HaCaT ląstelėms: antialerginis, priešuždegiminis ir apsauginis poveikis odai

Šiame "International Journal of Molecular Sciences" (2020) paskelbtame tyrime siūloma, kad apigenino junginys reikšmingai slopina RBL-2H3 ir RAW264.7 ląstelių alergines ir uždegimines reakcijas. Todėl jis gali būti potenciali priemonė kovojant su imuninėmis ligomis.

Priešuždegiminis ir antialerginis saponarino poveikis ir jo įtaka RAW 264.7, RBL-2H3 ir HaCaT ląstelių signaliniams keliams

Šiame žurnale "International Journal of Molecular Sciences" išspausdintame moksliniame straipsnyje (2021 m.) įvertintas antialerginis ir priešuždegiminis natūralaus produkto - saponarino - poveikis naudojant įvairias ląstelių linijas, įskaitant RBL-2H3.

Tailando augalinio vaisto Benchalokawichian, naudojamo alerginių sutrikimų gydymui, ekstraktų ir kai kurių grynų sudedamųjų dalių slopinamasis poveikis β-heksozaminidazės išsiskyrimui iš RBL-2H3 ląstelių

Šiame įrodymais pagrįstame papildomosios ir alternatyviosios medicinos (2014) tyrime nustatyta, kad Benchalokawichian ekstraktai ir kai kurios aktyviosios sudedamosios dalys turi potencialų slopinamąjį poveikį RBL 2H3 ß-heksosaminidazės išsiskyrimui.

Spirulina maxima peptidai slopina putliųjų ląstelių degranuliaciją per Akt ir MAPKs fosforilinimo inaktyvavimą RBL 2H3 ląstelėse

Šis straipsnis buvo paskelbtas 2018 m. žurnale "International Journal of Biological Macromolecules". Tyrime teigiama, kad natūralus produktas spirulina maxima slopina RBL 2H3 degranuliaciją neleisdamas MAPKs ir AKT fosforilinti.

RBL-2H3 ląstelių linijos ištekliai: RBLH RBL2-3 šaltiniai: protokolai, vaizdo įrašai ir kt

RBL-2H3 yra plačiai naudojama putliųjų ląstelių linija. Čia paminėti turimi ištekliai, apimantys RBL-2H3 kultivavimo ir transfekcijos protokolus:

  • RBL 2H3 MC modelis: Šiame moksliniame straipsnyje pateikiami RBL-2H3 kultūrų palaikymo ir RBL-2H3 transfekcijos protokolai.

Čia pateikiami kai kurie šaltiniai, kuriuose paaiškinamas RBL-2H3 ląstelių kultivavimo protokolas:

  • RBL-2H3 ląstelės: Šioje svetainėje galite susipažinti su RBL-2H3 ląstelių linijos ląstelių kultūrų protokolais. Be to, joje pateikiama informacija apie RBL-2H3 ląstelių terpę ir auginimo sąlygas.

RBL-2H3 ląstelių linija: DUK mokslininkams

Nuorodos

  1. Passante, E. ir N. Frankish, RBL-2H3 ląstelių linija: jos kilmė ir tinkamumas kaip putliųjų ląstelių modelis. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
  2. Li, Q., et al., Pseudoalerginė reakcija, sukelta Qingkailing injekcijos, iš dalies per PI3K-Rac1 signalinį kelią RBL-2H3 ląstelėse. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
  3. Liu, L. ir kt. polistireno mikro (nano) plastikai pažeidžia RBL-2H3 ląstelių organeles ir skatina MOAP-1 sukelti apoptozę. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
  4. Chiu, K.-M. ir kt. antialerginis ir priešuždegiminis neferino poveikis RBL-2H3 ląstelėms. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.

Nustatėme, kad esate kitoje šalyje arba naudojate kitą naršyklės kalbą nei šiuo metu pasirinkta. Ar norite priimti siūlomus nustatymus?

Uždaryti