RAW 264.7 ląstelių linija makrofagų ir imunologijos tyrimuose

RAW 264.7 ląstelių linija yra patikimas pelės makrofagų in vitro modelis, labai svarbus imunologiniams tyrimams. Šios ląstelės, kilusios iš BALB/c pelių patinų, buvo transformuotos Abelsono pelių leukemijos virusu, todėl buvo sukurta į makrofagus panaši ląstelių linija. Dėl savo funkcinio stabilumo ir būdingo gebėjimo atlikti ir fagocitozę, ir pinocitozę RAW 264.7 ląstelės yra labai svarbios šeimininko ir patogeno sąveikai tirti, todėl jos yra kertinis imunologinių tyrimų akmuo [1,2].

Morfologinės savybės ir augimo elgsena

Ištyrus RAW 264.7 ląstelės pasižymi pusiau adherentiniu augimu, linkusios formuoti verpstės formos adherentines ląsteles ir sferines plaukiojančias gyvybingas ląsteles, kurių skersmuo svyruoja nuo 10 iki 20 µm. Dėl šios polimorfinės prigimties ir gebėjimo prisitaikyti prie auginimo sąlygų RAW 264.7 ląstelės yra universali priemonė eksperimentinėms manipuliacijoms ir stebėjimams.

Imunologinė funkcija ir antigeno pateikimas

Kaip antigeną pateikiančios ląstelės, RAW 264.7 ląstelės atlieka svarbų vaidmenį imuninėje sistemoje. Jų funkcija apima ne tik paprastą patogenų atpažinimą, bet ir antigenų apdorojimą ir pateikimą T ląstelėms, taip organizuojant visapusišką imuninį atsaką. Ši dinamika padeda geriau suprasti, kaip imuninė sistema atpažįsta ir neutralizuoja svetimkūnius.

Makrofagų poliarizacija: M0, M1 ir M2 paradigmos

RAW 264.7 ląstelės, kurių bazinė būsena yra M0 makrofagai, turi nepaprastą gebėjimą poliarizuotis į M1 prouždegiminį arba M2 priešuždegiminį fenotipą. Šis poliarizacijos gebėjimas suteikia mokslininkams modelį, pagal kurį galima tirti įvairių citokinų ir aplinkos veiksnių įtaką ir poveikį makrofagų funkcijai ir imuniniam atsakui [3,4].

Osteoklastogenezė ir kaulų remodeliacija

Nors pačios RAW 264.7 ląstelės nėra osteoklastai, tačiau jos labai svarbios tiriant osteoklastogenezę - osteoklastų formavimosi procesą. Šios ląstelės palengvina osteoklastų genų raiškos ir jų reakcijos į receptorių aktyvavimą tyrimus. Šie tyrimai turi didelę reikšmę siekiant suprasti tokių ligų, kaip osteoporozė, kurioms būdingas sutrikęs kaulų persitvarkymas, patofiziologiją.

RAW 264.7 ląstelių privalumai ir trūkumai

Privalumai

• Lengvas kultivavimas: RAW 264.7 ląstelių liniją lengva auginti ir palaikyti laboratorijoje be jokių sudėtingų reikalavimų.
• Gerai apibūdinama: RAW 264.7 yra gerai apibūdinta ląstelių linija, t. y. pasižymi stabiliomis fenotipinėmis ir funkcinėmis savybėmis.
• Makrofagų modelis in vitro: Kadangi RAW 264.7 ląstelės yra makrofagai, joms būdingos pagrindinės makrofagų funkcijos, tokios kaip fagocitozė ir pinocitozė. Todėl jos dažnai naudojamos kaip makrofagų in vitro modelis.
• Diferenciacija į osteoklastus: RAW 264.7 ląstelės gali būti diferencijuojamos į osteoklastus naudojant specifinius molekulinius veiksnius. Šios diferencijuotos ląstelės geba atlikti kaulų remodeliaciją, panašiai kaip osteoklastai.

Trūkumai

• Blogai atspindi pirminius makrofagus: Kadangi RAW 264.7 yra transformuota ląstelių linija, ji gali netiksliai atspindėti pirminių makrofagų savybes ir turėti tam tikrų genų raiškos, fenotipo ir funkcijų skirtumų.
• Vaistų atrankos apribojimai: RAW 264.7 ląstelės gali būti netinkamos visų rūšių vaistų atrankinės patikros tyrimams, o jų reakcija į kai kuriuos vaistus gali skirtis nuo pirminių makrofagų.
• Stiprus ląstelių sukibimas: RAW 264.7 ląstelės stipriai prilimpa prie kultūrų kolbos paviršiaus ir kartais gali būti sudėtinga jas atskirti.

RAW 264.7 ląstelių panaudojimas makrofagų imitacijos ir imunologiniuose tyrimuose

Ląstelių imunologinių reakcijų modeliavimas

RAW 264.7 ląstelių linija, atspindinti autentiškų makrofagų funkcijas, yra pagrindinis ląstelių atsako į patogenus ir imunologinius dirgiklius tyrimo modelis. Šį aspektą išryškinančiame tyrime buvo įvertintas šiluma nužudytų pieno rūgšties bakterijų imunomoduliacinis ir antioksidacinis poveikis šioms ląstelėms, pateikiant reikšmingų išvadų imuninės sistemos reguliavimo srityje[5]

Tai papildant, 2019 m. atliktas tyrimas išaiškino RAW 264.7 veikiant polisacharidais iš augalo Polygonatum sibiricum imunologinį poveikį. Tyrime padaryta išvada, kad šie junginiai sukelia imuninį atsaką aktyvindami NF-κB/MAPK signalinius kelius, o tai suteikia gilų molekulinį supratimą[6]

Osteoklastogenezės tyrimas

RAW 264.7 ląstelės, veikiančios kaip osteoklastų diferenciacijos tyrimų pakaitalas, padeda išsiaiškinti osteoklastų elgseną ir diferenciacijos kelius. Tokie tyrimai praplečia mūsų žinias apie kaulų rezorbcijos mechanizmus ir osteoporozės patogenezę. Šiose ląstelėse stebint viduląstelinius pokyčius ir analizuojant hemo apykaitą dažnai naudojami pažangūs vaizdavimo metodai

Molekulinės įžvalgos apie osteoklastogenezę

Nepaisant to, kad RAW 264.7 ląstelės pirmiausia naudojamos kaip makrofagų modelis, jos taip pat naudojamos osteoklastogenezės tyrimams in vitro. Šiose ląstelėse sukeldami į osteoklastus panašias savybes, tyrėjai įžvelgia diferenciacijos procesą ir priešosteoklastinę elgseną, nors atliekant šiuos tyrimus labai svarbu atsižvelgti į ląstelių linijai būdingas savybes ir kilmę

Natūralių produktų biologinio aktyvumo atranka

Natūralių produktų biologinio aktyvumo atranka yra dar vienas pritaikymo būdas, kai RAW 264.7 ląstelės yra puikios. Pavyzdžiui, jų panaudojimas Korėjos tyrime, kuriame buvo tiriamos vaistažolių mišinio imunostimuliuojančios savybės, parodė ląstelių linijos efektyvumą nustatant biologiškai aktyvius junginius natūraliose medžiagose[7]

Pradėkite tyrimus su mūsų RAW 264.7 ląstelėmis

Moksliniai tyrimai, kuriuose naudojamos RAW 264.7 ląstelės

Apie pelių makrofagų ląstelių liniją RAW 264.7 paskelbta daug mokslinių publikacijų:

• Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute polisacharidai sukelia RAW264. 7 ląstelių linijos imuninį atsaką perNF-κB/MAPKkelią: Šis tyrimas parodė, kad polisacharidai, gauti iš Polygonatum sibiricum augalo, gali sukelti imuninį atsaką pelės makrofagų ląstelių linijoje RAW 264.7, reguliuodami NF-κB/MAPK signalinę kaskadą.
• Tinospora crispa ekstrakto ir jo pagrindinių junginių imunomoduliacinis poveikis RAW 264.7 makrofagų imuninėms funkcijoms: Šiame straipsnyje, paskelbtame žurnale "International Immunopharmacology", aprašoma, kadTinosporacrispa augalo ekstraktas ir pagrindinės jo sudedamosios dalys turi imunomoduliuojamąjį ir imunostimuliuojamąjį poveikį RAW 264.7 makrofagų ląstelių linijai.
• Šiluma nužudytos pieno rūgšties bakterijos slopina azoto oksido gamybą per indukuojamą azoto oksido sintazę ir ciklooksigenazę-2 RAW 264.7 ląstelėse: Šis tyrimas parodė, kad termiškai nužudytos pieno rūgšties bakterijos potencialiai gali būti naudojamos probiotinių produktų sintezei, nes jos pasižymi imunomoduliuojančiomis ir antioksidacinėmis savybėmis. Šiam biologiniam aktyvumui tirti mokslininkai naudojo RAW 264.7 ląsteles.
• Augalinio preparato poveikis RAW 264.7 makrofagų imuninio atsako stiprinimui: Šiame tyrime buvo naudojamos RAW 264,7 ląstelės, siekiant ištirti vaistažolių preparato, pavadinto KM1608, imunitetą stimuliuojantį poveikį. Tyrimas parodė, kad KM1608 yra potenciali imuninį atsaką stiprinanti priemonė.
• Kolumbijos tradicinėje medicinoje naudojamų augalų atranka atskleidė priešuždegiminį Physalis angulata calyces potencialą: Šiame straipsnyje, paskelbtame Saudi Journal of Biological Sciences, buvo tiriamas 10 plačiai naudojamų tradicinių Kolumbijos augalų priešuždegiminis potencialas, naudojant LPS stimuliuojamas RAW 264.7 ląsteles.

RAW 264.7 ląstelės: Žiniasklaidos šaltiniai, protokolai, vaizdo įrašai ir kt

RAW 264.7 ląstelės dažnai naudojamos transfekcijos tyrimams. Toliau pateiktuose šaltiniuose paaiškinami įvairūs transfekcijos metodai, naudojami RAW 264.7 ląstelių linijai.

• RAW 264.7 ląstelių transfekcija: Šioje svetainėje pateikiamas RAW 264.7 makrofagų transfekcijos naudojant lipofektamino reagentą protokolas.
• Transfekcijos protokolas: Šiame paskelbtame straipsnyje aprašomas išsamus RAW 264.7 ląstelių transfekcijos protokolas.
• Efektyvus RAW 264.7 ląstelių transfekcijos metodas: Šiame dokumente aprašomas kitas praktinis transfekcijos metodas naudojant RAW 264,7 ląsteles.

Vaizdo įrašai, susiję su RAW 264.7 ląstelių linija

• RAW 264.7 ląstelių kultivavimas: Šiame vaizdo įraše paaiškinamas RAW 264.7 ląstelių auginimo protokolas.
• Transfekcijos metodas: Šiame vaizdo įraše pasakojama apie RAW 264.7 ląstelių transfekciją reporterio genu.

Svarbiausi DUK apie RAW 264.7 ląstelių liniją: Įžvalgos apie makrofagų mimikrijos ir osteoklastogenezės tyrimus

Nuorodos

1. Taciak, B. ir kt., RAW 264.7 ląstelių linijos fenotipinio ir funkcinio stabilumo įvertinimas atliekant serijinius perėjimus. PloS one, 2018. 13(6): p. e0198943.
2. Wang, S., et al., Inflammatory macrophages interrupt osteocyte maturation and mineralization via regulating the Notch signaling pathway. Molekulinė medicina, 2022. 28(1): p. 102.
3. Orekhov, A.N., et al., Monocitų diferenciacija ir makrofagų poliarizacija. Vessel Plus, 2019. 3: p. 10.
4. Khabipov, A., et al., RAW 264.7 makrofagų poliarizacija kasos vėžio ląstelėmis - navikus skatinančių makrofagų tyrimo modelis. Anticancer Research, 2019. 39(6): p. 2871-2882.
5. Kang, C.-H., et al., Heat-killed lactic acid bacteria inhibit nitric oxide production via inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 in RAW 264.7 cells. Probiotikai ir antimikrobiniai baltymai, 2021. 13(6): p. 1530-1538.
6. Zhang, J., et al, Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute polisacharidai sukelia imuninį atsaką RAW264. 7 ląstelių linijoje per NF-κB/MAPK kelią. RSC advances, 2019. 9(31): p. 17988-17994.
7. Trinh, T. A., et al. augalinio preparato poveikis imuninio atsako stiprinimui RAW 264.7 makrofaguose. Biomolekulės, 2020. 10(3): p. 424.