NCI-H460 ląstelės - plaučių vėžio tyrimų navigacija su NCI-H460 įžvalgomis
NCI-H460 yra žmogaus išvestos nesmulkialąstelinio plaučių vėžio ląstelės, paprastai naudojamos plaučių karcinomos ir toksikologijos tyrimuose. Ši ląstelių linija yra vertingas įrankis tiriant įvairius vėžio biologijos aspektus, susijusius su naviko vystymusi, augimu ir atsparumu vaistams. Be to, NCI-H460 ląstelės yra tinkamas modelis priešvėžiniams reagentams kurti.
NCI-H460 ląstelės: Kilmė ir bendrosios savybės
Ląstelių linijos kilmė ir bendrosios savybės labai prisideda prie jos pritaikymo moksliniams tyrimams. Šis straipsnio skyrius padės jums sužinoti apie NCI-H460 plaučių vėžio ląstelių kilmę ir svarbiausias savybes. Sužinosite: Kas yra NCI-H460 ląstelės? Koks yra NCI-H460 ląstelių linijos tipas? Kokia yra NCI-H460 morfologija?
- NCI-H460 ląstelių linija buvo gauta iš stambiųjų ląstelių plaučių vėžiu sergančio europiečio pleuros išskyrų. Ją 1982 m. sukūrė A. F. Gazdaras su kolegomis.
- NCI-H460 plaučių vėžio ląstelių morfologija yra epitelinė.
- NCI-H460 yra hipotriploidinio kariotipo navikinių ląstelių linija. Šių ląstelių modalinis chromosomų skaičius yra 57. NCI-H460 ląstelės taip pat turi 58 modalinį chromosomų skaičių.
- Šios plaučių vėžio ląstelės turi daug NCI-NCI-H460 mutacijų, kaip ir nesmulkialąsteliniai plaučių navikai, pavyzdžiui, NCI-H460 KRAS mutaciją, kuri dalyvauja ląstelių proliferacijoje, augime, invazijai ir metastazavimui.
NCI-H460 ląstelių kultivavimo informacija
Norėdami tinkamai tvarkyti ir prižiūrėti NCI-H460 ląstelių liniją, turėtumėte žinoti šiuos svarbiausius dalykus. Joje rasite informacijos apie NCI-H460 padvigubėjimo laiką, NCI-H460 kultivavimo terpę ir pagrindines NCI-H460 plaučių vėžio ląstelių kultivavimo procedūras.
Pagrindiniai NCI-H460 ląstelių kultivavimo aspektai
|
Padvigubėjimo laikas: |
NCI-H460 padvigubėjimo laikas yra maždaug 33 valandos. |
|
Prigludusios arba suspenduotos: |
NCI-H460 plaučių vėžio ląstelės yra adherentiškos. |
|
Subkultivavimo santykis: |
NCI-H460 ląstelių linijai rekomenduojamas dalijimo santykis yra 1:2 ir 1:4. Pašalinus seną terpę, adheravusios ląstelės skalaujamos 1 x fosfatinio buferinio fiziologinio tirpalo tirpalu. Po to ląstelės inkubuojamos su "Accutase" pasišalinimo tirpalu 8-10 minučių aplinkos temperatūroje. Disocijuotos ląstelės resuspenduojamos į mitybinę terpę ir centrifuguojamos. Surinktos ląstelės vėl resuspenduojamos ir supilamos į naują kolbą kultivavimui. |
|
Auginimo terpė: |
Kaip NCI-H460 auginimo terpė naudojama RPMI 1640. Ji papildyta 10 % embrioninio galvijų serumo, 2,1 mM stabilaus glutamino ir 2,0 g/l NaHCO3. Medžiaga turėtų būti keičiama 2-3 kartus per savaitę. |
|
Augimo sąlygos: |
NCI-H460 kultūros palaikomos 37 °C temperatūroje, drėkinamame inkubatoriuje, kuriame nuolat tiekiamas 5 % CO2. |
|
Laikymas: |
NCI-H460 plaučių vėžio ląsteles galima ilgai laikyti skysto azoto garų fazėje arba žemesnėje nei -150 °C temperatūroje elektriniame itin žemos temperatūros šaldiklyje. |
|
Šaldymo procesas ir terpė: |
NCI-H460 ląstelėms užšaldyti ir laikyti naudojama CM-1 arba CM-ACF terpė. Rekomenduojamas lėtas šaldymo būdas, kad būtų išsaugotas maksimalus ląstelių gyvybingumas. |
|
Atšildymo procesas: |
Užšaldytos NCI-H460 ląstelės atšildomos iš anksto pašildytoje vandens vonelėje (37 °C temperatūroje) 40-60 sekundžių, kol lieka nedidelis ledo gabalėlis. Atšildytos ląstelės užpilamos šviežia terpe ir centrifuguojamos, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai. Surinktos ląstelių granulės vėl resuspenduojamos ir ląstelės išpilstomos į naujas kolbas su auginimo terpe. NCI-H460 ląstelėms prisitvirtinti prie kolbos paviršiaus gali prireikti beveik 24 valandų. |
|
Biologinės saugos lygis: |
NCI-H460 plaučių vėžio ląstelės tvarkomos ir laikomos 1 biologinės saugos lygio laboratorijose. |
NCI-H460 ląstelių privalumai ir trūkumai
NCI-H460 yra plačiai naudojama ląstelių linija plaučių vėžio tyrimams. Šiame skyriuje bus aptarti bendrieji NCI-H460 plaučių vėžio ląstelių privalumai ir trūkumai.
Privalumai
NCI-H460 nesmulkialąstelinio plaučių vėžio ląstelių linijos privalumai:
-
Naviko kilmė
NCI-H460 ląstelių linija buvo gauta iš stambiųjų ląstelių plaučių karcinoma sergančio paciento, atstovaujančio šiam konkrečiam plaučių vėžio tipui. Jos naudojamos kaip modelis plaučių vėžio biologijai tirti ir naujiems bei veiksmingiems gydymo būdams kurti. NCI-H460 ląstelės turi navikinį potencialą ir gali būti suleidžiamos imunodeficitinėms pelėms, kad būtų sukurti in vivo naviko modeliai, skirti naviko augimui, vystymuisi ir galimų vaistų veiksmingumui tirti.
-
Didelis dauginimosi greitis
NCI-H460 pasižymi didesniu augimo greičiu nei kitos nesmulkialąstelinio plaučių vėžio ląstelių linijos, pavyzdžiui, A549. Šis pranašumas padidina jų prieinamumą ir padeda mokslininkams atlikti atkuriamus ir laikui jautrius eksperimentus.
Trūkumai
Su NCI-H460 plaučių vėžio ląstelėmis susiję šie trūkumai:
-
Homogeniškumas
NCI-H460 ląstelės yra homogeniškos, nes buvo gautos iš vieno paciento naviko. Todėl jos paprastai nėra sudėtingos ir nevienalytės, kaip pastebima pacientų navikuose.
NCI-H460 ląstelių pritaikymas moksliniams tyrimams
NCI-H460 plaučių vėžio ląstelės plačiai naudojamos su plaučių karcinoma susijusiuose tyrimuose. Štai keletas svarbių NCI-H460 ląstelių panaudojimo mokslinių tyrimų tikslais pavyzdžių:
- Plaučių vėžio tyrimai: NCI-H460 ląstelės yra neįkainojamas modelis tiriant ląstelių ir molekulinius mechanizmus, susijusius su naviko vystymusi, augimu ir metastazėmis. Be to, jos naudojamos tiriant būtinus signalizacijos kelius, molekulinius taikinius ir įvairias genetines mutacijas, susijusias su plaučių vėžio progresavimu. Siekiant veiksmingai ištirti šiuos veiksnius, su NCI-H460 ląstelėmis atlikta keletas tyrimų. 2019 m. atliktame tyrime buvo pasiūlyta, kad pernelyg išreikštas branduolinis visur esantis kazeino ir nuo ciklino priklausomų kinazių substratas (NUCKS) dalyvauja naviko ląstelių augime reguliuojant PI3K/AKT signalinį kelią [1]. Panašiai in vitro ir in vivo tyrime buvo panaudotos NCI-H460 ląstelės, siekiant ištirti eIF4E geno vaidmenį. Rezultatai atskleidė, kad eIF4E genas dalyvauja plaučių karcinomos augimo ir angiogenezės procesuose, todėl į jį galima nukreipti dėmesį kuriant perspektyvius vaistus nuo plaučių vėžio [2].
- Vaistų atradimas ir kūrimas: NCI-H460, žmogaus plaučių vėžio ląstelių linija, plačiai naudojama vaistų atradimo ir kūrimo tyrimuose. Mokslininkai šias ląsteles naudoja naujų vaistų kandidatų, tikslinės terapijos ir gydymo, daugiausia nukreipto į NCI-H460 KRAS mutacijas, toksiškumui ir veiksmingumui tirti. 2023 m. Haoyue Hu ir kolegų atliktame tyrime NCI-H460 ląstelės buvo naudojamos anlotinibo vaisto antivėžiniam poveikiui tirti. Rezultatai parodė, kad anlotinibas iš dalies paveikė KRAS mutavusių plaučių vėžio ląstelių augimą, slopindamas MEK/ERK signalinę kaskadą [3]. Panašiai, naudojant NCI-H460 ląsteles, buvo tiriamas fenolinis junginys, karnozo rūgštis, siekiant nustatyti antiproliferacinį ir proapoptozinį aktyvumą [4].
- Atsparumas vaistams: NCI-H460 ląstelių linija idealiai tinka plaučių karcinomos atsparumo vaistams mechanizmui tirti. Mokslininkai šias ląsteles naudoja atsparumo vaistams modeliams kurti, siekdami nustatyti pagrindinius genus, molekulinius veiksnius ir signalinius kelius. Pavyzdžiui, tyrimo metu buvo sukurtos pemetreksedui, daugiatiksliui antifoliaciniam preparatui, atsparios NCI-H460 ląstelės, siekiant ištirti pagrindinius molekulinius atsparumo pemetreksedui mechanizmus nesmulkialąstelinio plaučių vėžio ląstelėse [5].
Įsigykite NCI-H460 ląstelių liniją: Jūsų vartai į plaučių vėžio tyrimus
Mokslinių tyrimų publikacijos su NCI-H460 ląstelėmis
Pateikiame keletą įdomių mokslinių publikacijų apie NCI-H460 plaučių karcinomos ląstelių liniją.
Šiame Molecules (2023) paskelbtame tyrime siūloma, kad natūralus α-1,6-gliukanas, BBWPW, iš juodųjų pupelių slopina NCI-H460 ląstelių proliferaciją reguliuodamas PI3K/AKT/MAPK kelią.
Šiame 2019 m. žurnale "Phytomedicine" išspausdintame straipsnyje tiriama, kad naujas natūralus junginys - dioscin-6′-O-acetatas - pasižymi antiproliferaciniu poveikiu NCI-H460 plaučių vėžio ląstelėms.
miRNA-425-5p skatina plaučių vėžio augimą per PTEN/PI3K/AKT signalinę ašį
BMC Pulmonary Medicine (2020) tyrime teigiama, kad mikroRNA-425-5p stiprina plaučių karcinomos naviko augimą per PTEN/PI3K/AKT kelią.
Šiame straipsnyje žurnale "Molecular Medicine Reports" (2017 m.) pasiūlytas priešvėžinis kvinalizarino junginio potencialas ir pagrindiniai mechanizmai NCI-H460 ir kitose plaučių vėžio ląstelėse.
Šiame žurnale "Food and Function" (2019 m.) paskelbtame tyrime pabrėžiamas galimas priešvėžinis Eucalyptus globulus labill. ekstrakto poveikis naudojant NCI-H460 ląsteles. Tyrimo rezultatai parodė, kad augalo ekstraktas šį poveikį parodė didindamas NCI-H460 p53 raišką ir keisdamas ląstelių ciklo profilį.
NCI-H460 ląstelių linijos šaltiniai: Protocols, Videos, and More
Čia pateikiami keli internetiniai šaltiniai, kuriuose aprašomos NCI-H460 plaučių vėžio ląstelės.
- NCI-H460 ląstelių transfekcija: Šis vaizdo įrašas - tai žingsnis po žingsnio NCI-H460 ląstelių transfekcijos plazmidine DNR vadovas.
Toliau pateiktose nuorodose pateikiama privaloma informacija apie H460 ląstelių kultūrą.
- NCI-H460 ląstelės: Šioje svetainėje rasite svarbios informacijos apie NCI-H460 ląstelių terpę, subkultūravimo, užšaldymo ir atšildymo procedūras.
- NCI-H460 ląstelių perleidimas: Šiame dokumente rasite informacijos apie NCI-H460 ląstelių linijos ląstelių pasiskirstymą ir subkultūravimą. Be to, jis taip pat padės sužinoti NCI-H460 ląstelių transfekcijos protokolą.
NCI-H460 ląstelių linijos tyrimas: DUK ir įžvalgos
Nuorodos
- Hu, C. ir kt., NUCKS skatina plaučių vėžio ląstelių proliferaciją, migraciją ir invaziją per Pi3k/Akt signalinį kelią. Klinikinė ir tiriamoji medicina, 2021. 44(2): p. E55-61.
- Qi, X., et al, EGPI-1, naujas eIF4E/eIF4G sąveikos inhibitorius, slopina plaučių vėžio ląstelių augimą ir angiogenezę per Ras/MNK/ERK/eIF4E signalinį kelią. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al, Anlotinibas daro priešvėžinį poveikį KRAS mutavusioms plaučių vėžio ląstelėms slopindamas MEK/ERK kelią. Vėžio valdymas ir tyrimai, 2020: p. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Carnosic acid exhibits antiproliferative and proapoptotic effects in tumoral NCI-H460 and nontumoral IMR-90 lung cells. Journal of Toxicology and Environmental Health, A dalis, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L. ir kt. pemetreksedui atsparių NCI-H460/PMT ląstelių sukūrimas ir apibūdinimas. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (anksčiau Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.