MX-1 ląstelių linija

MX-1 yra žmogaus krūties adenokarcinomos ląstelių linija, gauta iš krūties vėžio ksenotransplantacijos modelio be užkrūčio pelėse. Žmogaus krūties adenokarcinomos ląstelės buvo išskirtos iš 29 metų amžiaus kaukazietės moters krūties naviko. MX-1 ląstelės yra trigubai neigiamos krūties vėžio (TNBC) ląstelės, kurios plačiai naudojamos tyrimams, susijusiems su atsparumu vaistams, ląstelių signalizacija, vaistų veikimo mechanizmais ir kt.

MX-1 ląstelių kilmė ir bendroji informacija

Prieš pradėdami dirbti su šia ląstelių linija, turėtumėte susipažinti su jos pagrindiniais aspektais. Apžvelgsime beveik visą bendrąją informaciją apie MX-1 ląstelių liniją.

Nemirtinga MX-1 ląstelių linija yra tumorigeninė ląstelių linija, išskirta iš naviko ksenotransplantato. MX-1 ląstelės laikomos vienu iš trijų neigiamų krūties vėžio (TNBC) tipų [1]. Be to, šios ląstelės yra estrogeno receptorių ir p53 neigiamos, nes jose neekspresuojami šie genai.

MX-1 ląstelės – trigubo neigiamo krūties vėžio modelinė sistema

MX-1 ląstelių linijos auginimo sąlygos nėra sudėtingos. Šias ląsteles galima lengvai dauginti ir naudoti įvairiose mokslinių tyrimų laboratorijose transfekcijos tyrimams. Taikant laikinosios transfekcijos metodą, paprastai tiriamos šios ląstelių linijos pagrindiniai ląsteliniai mechanizmai ir genų ekspresijos modeliai [2, 3].

Ši ląstelių linija yra patikima modelinė sistema krūties karcinomoms tirti. Ji gali būti naudojama siekiant suprasti ligos progresavimo molekulinius mechanizmus, taip pat atrinkti ir kurti vaistus kovai su liga. Konkrečiau tariant, žmogaus MX-1 krūties adenokarcinomos ląstelių linija gali būti alternatyva TNBC ląstelėms, nes ji yra estrogeno receptorių neigiama [4].

Paskelbta: 2023 m. | Paskutinis peržiūrėjimas: 2026 m. gegužė

MX-1 ląstelių linija: informacija apie kultivavimą

• Padvigubėjimo laikas: INS-1 ląstelių populiacijos padvigubėjimo laikas yra maždaug 44 valandos.
• Adhezinės ar suspensijos formos: INS-1 ląstelės auga tiek suspensijos, tiek adhezinės formos.
• Subkultivavimo santykis: INS-1 ląstelės subkultivuojamos 1:3 santykiu. Trumpai tariant, surenkamos suspensijos ląstelės. Prisijungusios ląstelės nuplaunamos PBS tirpalu ir inkubuojamos su „Accutase“ tirpalu. Atsiskyrus ląstelėms, į jas įpilama šviežios terpės. Vėliau tiek suspensijos, tiek adhezinės ląstelės centrifuguojamos ir surenkamos. Ląstelės atsargiai resuspenduojamos ir išpilamos į naujus kolbelius augimui.
• Auginimo terpė: žiurkių insulinomos ląstelių linijai INS-1 kultivuoti naudojama RPMI 1640 terpė. Terpė papildoma 10 % šilumos inaktyvuotu veršelių serumu, 2,1 mM stabiliu glutaminu, 10 mM HEPES, 2,0 g/l NaHCO₃ ir 1 mM natrio piruvatu.
• Auginimo sąlygos: INS-1 ląstelės laikomos drėkinamame inkubatoriuje, nustatytame 37 °C temperatūrai ir nuolat aprūpinamame 5 % CO₂.
• Laikymas: INS-1 beta ląstelės gali būti ilgam laikomos skysto azoto garų fazėje arba elektrinėje šaldymo kameroje esant žemesnei nei -150 °C temperatūrai.
• Užšaldymo procesas ir terpė: INS-1 ląstelės užšaldomos lėtu užšaldymo procesu, naudojant CM-1 arba CM-ACF terpes. Siekiant apsaugoti ląstelių gyvybingumą, temperatūra leidžiama sumažėti tik 1 °C per minutę.
• Atšildymo procesas: Užšaldytos INS-1 ląstelės atšildomos vandens vonioje, iš anksto nustatytos 37 laipsnių Celsijaus temperatūroje, 40–60 sekundžių. Po atšildymo į ląsteles įpilama šviežios terpės ir jos tiesiogiai supilamos į naują kolbą auginimui. Po 24 valandų terpė pakeičiama, siekiant pašalinti užšalusių terpių komponentus.
• Biologinio saugumo lygis: INS-1 žiurkių insulinomos ląstelėms auginti reikalinga 1 biologinio saugumo lygio laboratorija.

MX-1 ląstelės: pritaikymas moksliniuose tyrimuose

Ši žmogaus krūties adenokarcinomos MX-1 ląstelių linija dažnai naudojama krūties vėžio tyrimuose vietoj tokių ląstelių kaip MDA-MB-231 ar MCF-7. Toliau pateikiami keli specialūs šios ląstelių linijos pritaikymai vėžio tyrimuose.  

Vaistų atsparumo mechanizmai

MX-1 ląstelės naudojamos tirti molekulinius veiksnius, lemiančius atsparumo krūties vėžio vaistams išsivystymą. Tyrimuose MX-1 ląstelės plačiai naudojamos vaistams atsparių modelių kūrimui. 2021 m. paskelbtame tyrime pranešta apie MX-1 ląstelių panaudojimą doksorubicinui atsparios krūties vėžio ląstelių linijos sukūrimui. Sukurtas ląstelių modelis patvirtino ABC transporterio ABCB1 ir epitelio-mezenchiminės transicijos (EMT) dalyvavimą chemoresistencijos įgijime [5].

Genų ekspresija / ląstelių signalizacijos keliai

MX-1 ląstelių liniją galima laikinai transfekuoti, siekiant išsiaiškinti genų ekspresijos modelius ir ląstelių signalizacijos kelius. Tyrimuose MX-1 ląstelės buvo naudojamos shRNA (trumpųjų kilpinių RNR) ir nekoduojančios RNR transfekcijai, siekiant ištirti jų poveikį krūties vėžio ląstelių proliferacijai ir augimui. Be to, išaiškinami susiję genų signalizacijos keliai [2, 6].

Potencialių inhibitorių atranka

MX-1 ląstelės gali būti naudojamos potencialių vaistų nuo krūties vėžio atrankai, nes jos imituoja vėžinių ląstelių mikroaplinką. Vienas tyrimas parodė mikrotubulių toksino vinorelbino terapinį aktyvumą, kuris MX-1 ląstelėse sukėlė ląstelių mirtį ir poliploidiją [4].

Užsisakykite „MX-1“ ląstelių liniją jau šiandien

MX-1 ląstelių linija. Ištekliai: protokolai, vaizdo įrašai ir kita

Išteklių, susijusių su kultivavimo ir transfekcijos metodais, yra nedaug, tačiau jūsų labui surinkome kuo daugiau informacijos.

Ląstelių kultivavimo protokolai

MX-1 ląstelės naudojamos daugelyje laikinų transfekcijos analizės tyrimų. Čia pateikiame keletą išteklių, kurie padės jums parengti transfekcijos protokolus.

• MX-1 ląstelių transfekcija: Šiame leidinyje aprašomas siRNA transfekcijos į MX-1 ląsteles protokolas, skirtas genų išjungimo modelio kūrimui.
• Žinduolių ląstelių transfekcija: šiame straipsnyje pateikiama visa būtina informacija apie transfekcijos metodus, taikomus žinduolių ląstelių linijose.

Tikimės, kad šis straipsnis suteikė jums vertingų žinių apie MX-1 ląstelių liniją ir kad dabar geriau suprantate, kaip šias ląsteles kultivuoti, prižiūrėti ir panaudoti savo tyrimuose. Jei jus domina darbas su MX-1 ląstelių linija, nedvejodami užsisakykite ją pas mus ir pradėkite savo mokslinių tyrimų kelionę!

Dažniausiai užduodami klausimai apie MX-1 krūties karcinomos ląstelių liniją

Literatūra

1. Stefanski, C.D. ir J.R. Prosperi, „Kova su CHK1 atsparumu trigubai neigiamame krūties vėžyje: EGFR slopinimas kaip potenciali kombinuota terapija“. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H. ir kt., cGAMP analogas c-di-AMP aktyvuoja STING mediatorių ląstelių mirties kelią estrogenų receptorių neigiamose krūties vėžio ląstelėse. „Apoptosis“, 2021. 26: p. 293–306.
3. Xiang, S., ir kt., Apoptozės inhibitoriui panašaus baltymo-2 proteominė analizė, susijusi su krūties vėžio ląstelių proliferacija. „Molecular Medicine Reports“, 2022. 25(3): p. 1–11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa ir J. Magae, „Vinorelbinas, mikrotubulių toksinas, indukuoja apoptozę ir poliploidiją MX-1, žmogaus trigubai neigiamų krūties vėžio ląstelių linijoje“. Gan to Kagaku ryoho. „Cancer & Chemotherapy“, 2019. 46(3): p. 447–451.
5. Kubiliute, R. ir kt., Negenotoksinis ABCB1 aktyvatorius tetrafenilfosfonis gali prisidėti prie atsparumo doksorubicinui MX-1 krūties vėžio ląstelių linijoje. „Scientific reports“, 2021. 11(1): p. 1–11.
6. Jiang, R., ir kt., Krūties vėžio miksomikos analizė: ilgas nekoduojantis RNR linc01561 veikia kaip ceRNR, dalyvaujantis krūties vėžio progresavime. „The International Journal of Biochemistry & Cell Biology“, 2018. 102: p. 1–9.