MX-1 ląstelių linija

MX-1 yra žmogaus krūties adenokarcinomos ląstelių linija, išvesta iš krūties vėžio ksenograftų modelio atiminėse pelėse. Žmogaus krūties adenokarcinomos ląstelės buvo gautos iš 29 metų kaukazietės krūties naviko. MX1 ląstelės yra trigubai neigiamo krūties vėžio (TNBC) ląstelės, kurios plačiai naudojamos atsparumo vaistams, ląstelių signalų, atsako į vaistus mechanizmo ir kt. tyrimams.

MX-1 ląstelių kilmė ir bendra informacija apie jas

Prieš pradėdami dirbti su šia ląstelių linija, turėtumėte sužinoti jos pagrindinius principus. Apžvelgsime beveik visą bendrąją informaciją apie MX-1 ląstelių liniją.

Nemirtinga MX-1 ląstelių linija yra navikinė ląstelių linija, sukurta iš naviko ksenografto. MX-1 ląstelės laikomos trigubai neigiamo krūties vėžio (TNBC) tipu [1]. Be to, šios ląstelės yra neigiamos estrogenų receptorių ir p53 atžvilgiu, nes jos šių genų neekspresuoja.

MX-1 ląstelės - trigubai neigiamo krūties vėžio modelinė sistema

MX-1 ląstelių linijos kultivavimo sąlygos nėra išrankios. Šias ląsteles galima lengvai dauginti ir naudoti įvairiose mokslinių tyrimų laboratorijose transfekcijos tyrimams. Taikant pereinamosios transfekcijos metodą paprastai tiriami šios ląstelių linijos pagrindiniai ląsteliniai mechanizmai ir genų raiškos dėsningumai [2, 3].

Ši ląstelių linija yra tinkama krūties karcinomų modelinė sistema. Ji gali būti naudojama siekiant suprasti molekulinius mechanizmus, lemiančius ligos progresavimą, ir atrinkti bei kurti vaistus, skirtus kovai su liga. Tiksliau, žmogaus MX-1 krūties adenokarcinomos ląstelių linija gali būti alternatyva TNBC ląstelėms, nes ji yra neigiama estrogenų receptoriams [4].

MX-1 ląstelių linija: Kultivavimo informacija

• Padvigubėjimo laikas: INS-1 ląstelių populiacijos padvigubėjimo laikas yra maždaug 44 valandos.
• Prisitvirtinusios arba suspensijoje: INS-1 ląstelės auga ir suspensijos, ir adherentinės.
• Subkultivavimo santykis: INS-1 ląstelės subkultūruojamos 1:3 santykiu. Trumpai tariant, surenkamos suspenduotos ląstelės. Adheravusios ląstelės nuplaunamos PBS ir inkubuojamos su Accutase tirpalu. Po atskyrimo ląstelės užpilamos šviežia terpe. Po to tiek suspenduotos, tiek adherentinės ląstelės centrifuguojamos ir surenkamos. Ląstelės kruopščiai resuspenduojamos ir paskirstomos į naujas kolbas auginimui.
• Augimo terpė: INS-1 žiurkių insulinomos ląstelių linijai auginti naudojama RPMI 1640. Medžiaga papildyta 10 % termiškai inaktyvuoto galvijų embrioninio serumo, 2,1 mM stabilaus glutamino, 10 mM HEPES, 2,0 g/l NaHCO3 ir 1 mM natrio piruvato.
• Augimo sąlygos: INS-1 ląstelės laikomos drėkinamajame inkubatoriuje, kurio temperatūra 37 °C, nuolat tiekiamas 5 % CO2.
• Laikymas: INS-1 beta ląstelės gali būti ilgai laikomos skysto azoto garų fazėje arba žemesnėje nei -150 °C temperatūroje elektriniame šaldiklyje.
• Šaldymo procesas ir terpė: INS-1 ląstelėms užšaldyti naudojama CM-1 arba CM-ACF terpė, kurioje vyksta lėtas užšaldymo procesas. Per minutę temperatūra sumažėja tik 1 °C, kad būtų apsaugotas ląstelių gyvybingumas.
• Atšildymo procesas: INS-1 ląstelės atšildomos vandens vonelėje, iš anksto nustatytoje 37 °C temperatūroje, 40-60 sekundžių. Po atšildymo ląstelės užpilamos šviežia terpe ir tiesiogiai supilamos į naują kolbą augimui. Po 24 valandų terpė pakeičiama, kad būtų pašalinti užšaldytos terpės komponentai.
• Biologinės saugos lygis: INS-1 žiurkių insulinomos ląstelėms auginti reikalinga 1 biologinės saugos lygio laboratorija.

MX-1 ląstelės: Taikymas moksliniuose tyrimuose

Ši žmogaus krūties adenokarcinomos MX-1 ląstelių linija paprastai naudojama krūties vėžio tyrimams vietoj tokių ląstelių kaip MDA-MB-231 ar MCF-7. Štai keletas specialių šios ląstelių linijos taikymo vėžio tyrimuose būdų.

Atsparumo vaistams mechanizmai

MX-1 ląstelės naudojamos molekuliniams veiksniams, lemiantiems atsparumo krūties vėžio vaistams vystymąsi, tirti. Tyrimuose MX-1 ląstelės plačiai naudojamos atsparumo vaistams modeliams sukurti. 2021 m. paskelbtame tyrime pranešta apie MX-1 ląstelių panaudojimą doksorubicinui atspariai krūties vėžio ląstelių linijai sukurti. Sukurtas ląstelių modelis patvirtino ABC transporterio ABCB1 ir epitelio-mezenchiminio virsmo (EMT) dalyvavimą įgyjant chemorezistentiškumą [5].

Genų raiška / ląstelių signalų kelias

MX-1 ląstelių liniją galima transfekuoti pereinamuoju būdu, kad būtų galima išsiaiškinti genų raiškos modelius ir ląstelių signalizacijos kelius. Tyrimuose MX-1 ląstelės buvo naudojamos shRNA (trumposios plaukų smeigtukų RNR) ir nekoduojančių RNR transfekcijai, siekiant ištirti jų poveikį krūties vėžio ląstelių proliferacijai ir augimui. Be to, išaiškinti susiję genų signaliniai keliai [2, 6].

Potencialių inhibitorių atranka

MX-1 ląstelės gali būti naudojamos potencialių vaistų nuo krūties vėžio atrankai, nes jos imituoja vėžio ląstelių mikroaplinką. Atliktas mokslinis tyrimas parodė gydomąjį vinorelbino, mikrotubulų toksino, kuris sukėlė ląstelių mirtį ir poliploidiją MX-1 ląstelėse, aktyvumą [4].

Užsisakykite savo MX-1 ląstelių liniją šiandien

MX-1 ląstelių linija Ištekliai: Ataskaitos: protokolai, vaizdo įrašai ir kt

Šaltinių, susijusių su kultivavimo ir transfekcijos metodais, yra nedaug, tačiau mes surinkome kuo daugiau informacijos.

Ląstelių auginimo protokolai

MX-1 ląstelės naudojamos daugelyje tranzitinės transfekcijos analizės tyrimų. Čia pateikėme keletą šaltinių, padėsiančių jums su transfekcijos protokolais.

• MX-1 ląstelių transfekcija: Šiame leidinyje aprašomas transfekcijos siRNA MX-1 ląstelėse protokolas, skirtas genų išstūmimo modeliui sukurti.
• Žinduolių ląstelių transfekcija: Šiame straipsnyje pateikiama visa svarbiausia informacija apie žinduolių ląstelių linijų transfekcijos metodus.

Tikimės, kad šis straipsnis suteikė vertingų žinių apie MX-1 ląstelių liniją ir kad geriau supratote, kaip auginti, prižiūrėti ir naudoti šias ląsteles savo tyrimuose. Jei jus domina darbas su MX-1 ląstelių linija, nedvejodami užsisakykite iš mūsų ir pradėkite savo mokslinių tyrimų kelionę!

Dažniausiai užduodami klausimai apie MX-1 krūties karcinomos ląstelių liniją

Nuorodos

1. Stefanski, C.D. ir J.R. Prosperi, Kova su CHK1 atsparumu trigubai neigiamam krūties vėžiui: EGFR slopinimas kaip galimas kombinuotas gydymas. Vėžio atsparumas vaistams, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al. cGAMP analogas, c-di-AMP, aktyvuoja STING tarpininkaujamą ląstelių mirties kelią estrogenų receptoriams neigiamose krūties vėžio ląstelėse. Apoptozė, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Apoptozės inhibitoriaus į apoptozępanašaus baltymo-2poveikio krūties vėžio ląstelių proliferacijai proteominė analizė. Molekulinės medicinos ataskaitos, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa ir J. Magae, Vinorelbinas, mikrotubulų toksinas, sukelia apoptozę ir poliploidiją žmogaus trigubai neigiamo krūties vėžio ląstelių linijoje MX-1. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Kubiliūtė, R., ir kiti, Nongenotoksinis ABCB1 aktyvatorius tetrafenilfosfonijus gali prisidėti prie MX-1 krūties vėžio ląstelių linijos atsparumo doksorubicinui. Moksliniai pranešimai, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Jiang, R., et al., Mixomics analysis of breast cancer (Krūties vėžio mikskominė analizė): Ilga nekoduojanti RNR linc01561 veikia kaip ceRNA, dalyvaujanti krūties vėžio progresavime. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: p. 1-9.