MCF-7 ląstelių linija: Krūties vėžio tyrimų ir vaistų bandymų kertinis akmuo
1973 m. iš žmogaus krūties adenokarcinomos ląstelių sukurta MCF-7 ląstelių linija yra krūties vėžio tyrimų priešakyje, nes yra labai svarbus modelis, padedantis atskleisti sudėtingą estrogenų ir progesterono receptoriams teigiamų krūties vėžio biologiją. Šios ląstelės yra žmogaus krūties vėžio mikrokosmosas, pasižymintis savybėmis, kurios labai svarbios tiriant tiek nuo hormonų priklausomą, tiek nepriklausomą naviko augimą. Mokslininkai naudoja MCF-7 ląsteles, kad ištirtų sudėtingą hormonų, tokių kaip estrogenas ir tamoksifenas, šokį reguliuojant vėžinių ląstelių dauginimąsi, gilindamiesi į molekulines subtilybes nuo sferoidų formavimosi iki klinikinio krūties vėžio progresavimo
Atliekant metastazinio krūties vėžio tyrimus, MCF-7 ląstelės yra labai svarbios, jos naudojamos taikant pažangiausius metodus, pavyzdžiui, įterpiant į mikrotinklus pastoliuose arba laisvuose hidrogeliuose, imituojančiuose natūralią naviko aplinką. Tai padeda tirti metastazinę ligą, ypač moterims po menopauzės, ir skirtingą poveikį kairei ir dešinei krūtinei. Šių tyrimų pagrindas - farmakogenetiniai ir farmakoepigenetiniai aspektai, o MCF-7 ląstelės atskleidžia ligos stadijos ypatumus ir atsaką į gydymą in vivo.
MCF-7 ląstelės taip pat yra pagrindas onkologiniuose tyrimuose, kuriuose bandomi naujoviški gydymo būdai, pavyzdžiui, aukštos įtampos elektrochemoterapija, ir gyvūnų modeliuose, kurie tiksliai atkartoja žmogaus krūties naviko ląsteles. Kitas nagrinėjamas aspektas - mezenchiminių kamieninių ląstelių vaidmuo moduliuojant šių navikinių ląstelių elgseną. Be to, estrogenų, androgenų ir krūties vėžio ląstelių augimo sąveikos per MCF-7 supratimas suteikia neįkainojamų įžvalgų, skatinančių nuolatinį žinių siekimą nuolat besivystančioje vėžio tyrimų srityje.
MCF-7 ląstelių linija: Kilmė ir bendra informacija
Prieš pradedant dirbti su MCF-7 ląstelių linija, būtina suprasti, morfologiją, ląstelių dydį ir kitas bendrąsias savybes.
Pavadinimas "MCF-7" reiškia "Michigan Cancer Foundation - 7". Ją sukūrė daktaras Soule'as Mičigano vėžio fonde Detroite, Mičigano valstijoje. Ši ląstelių linija buvo išskirta 1970 m. iš 69 metų kaukazietės, sergančios metastazavusia krūties adenokarcinoma, pleuros išskyrų. MCF-7 yra krūties vėžio A liuminalinio potipio vėžys, kuriame ekspresuojami estrogenų, progesterono ir gliukokortikoidų receptoriai [1, 2].
MCF-7 ląstelės yra nuo hormonų priklausomos krūties vėžio ląstelės. Šios krūties epitelio ląstelės pasižymi mažu metastazavimo potencialu ir yra mažiau agresyvios, palyginti su nuo hormonų nepriklausomomis MDA-MB-231 ląstelėmis [3].
- MCF-7 ląstelių morfologija:epitelio morfologija; ląstelės auga kaip monosluoksniai su stipriomis ląstelių jungtimis; panašios į grindinį
- Ląstelių dydis: Nuo 19,9 μm iki 33,9 μm
- Genomas ir ploidija: Modalinis chromosomų skaičius: 82; plojidiškumo intervalas: nuo 66 iki 87
- MCF-7 ląstelių linijos variantai: yra daug KO variantų, pasižyminčių skirtingais genetiniais profiliais ir genų raiška, palyginti su originaliomis MCF-7 ląstelėmis [4]
Informacija apie MCF-7 ląstelių kultūrą
MCF-7 yra plačiai kultivuojama ląstelių linija krūties vėžio tyrimų laboratorijose. Prieš kultivuojant šias ląsteles, jums gali kilti daug klausimų, pavyzdžiui, koks yra MCF-7 ląstelių padvigubėjimo laikas? Ar MCF-7 ląstelės yra lipnios? Ir kokia yra MCF-7 ląstelių auginimo terpė? Šiame skyriuje aptarsime šiuos svarbiausius dalykus:
|
Aspektas |
Aprašymas |
|
Padvigubėjimo laikas |
MCF-7 ląstelių vidutinė padvigubėjimo trukmė yra 24 valandos |
|
Prigludusios arba suspenduotos |
MCF-7 ląstelės yra adherentiškos ląstelės, kurios auga kaip monosluoksniai ir sudaro ląstelių sankaupas |
|
Sėjimo tankis |
Lėtai augančios MCF-7 ląstelės sėjamos 3 x 10^4 ląstelių/cm^2 tankiu. Pašalinus terpę, adherentinės MCF-7 ląstelės plaunamos 1 x PBS. Ląstelės atskiriamos naudojant "Accutase" perėjimo tirpalą. Įpilama kultūrinės terpės ir ląstelės centrifuguojamos. Ląstelių granulės resuspenduojamos ir perkeliamos į naujas kolbas su šviežia augimo terpe |
|
Augimo terpė |
MCF-7 ląstelėms auginti naudojama Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM), papildyta 10 % FBS ir 2,5 mM L-glutaminu. Medžiaga atnaujinama 2-3 kartus per savaitę |
|
Augimo sąlygos |
MCF-7 ląstelės auginamos drėkinamame inkubatoriuje 37 °C temperatūroje, esant 5 % CO2 |
|
Laikymas |
Ląstelės laikomos skysto azoto garų fazėje (-195 °C), kad būtų išlaikytas ląstelių gyvybingumas |
|
Šaldymo procesas ir terpė |
MCF-7 ląstelėms užšaldyti pirmenybė teikiama lėto užšaldymo metodui, palaipsniui mažinant temperatūrą 1 °C, kad būtų išsaugotas ląstelių gyvybingumas. MCF-7 ląstelėms šaldyti naudojama CM-1 arba CM-ACF |
|
Atšildymo procesas |
Sušaldytos MCF-7 ląstelės 40-60 sekundžių greitai maišomos iš anksto pašildytoje vandens vonelėje (37 °C). Buteliuke paliekamas nedidelis ledo gabalėlis, kad jis būtų vėsus. Ląstelės gali būti tiesiogiai auginamos kolboje su šviežia augimo terpe arba centrifuguojamos, kad būtų pašalinta užšaldymo terpė. Gautos ląstelių granulės atsargiai resuspenduojamos šviežioje terpėje ir išpilstomos į kolbas auginimui |
|
Biologinės saugos lygis |
Dirbant su MCF-7 ląstelėmis, kurioms nustatytas trigubai teigiamas biologinės saugos lygis, taikomas 1 biologinės saugos lygis |
MCF-7 ląstelės: Privalumai ir trūkumai
Visos vėžio ląstelių linijos turi tam tikrų privalumų ir trūkumų. Taigi, kokie yra MCF-7 ląstelių privalumai, dėl kurių jos yra patrauklios naudoti moksliniams tyrimams? Ir kokie yra MCF-7 ląstelių linijos apribojimai?
Privalumai
MCF-7 ląstelių linija turi daug privalumų. Štai keletas svarbiausių:
- Gerai apibūdintos: MCF-7 ląstelių linija yra gerai apibūdinta, todėl ji dažnai pasirenkama vėžio tyrimų laboratorijose
- Reaguoja į estrogenus: MCF-7 yra į estrogenus reaguojančios krūties vėžio ląstelės. Jų augimas ir dauginimasis priklauso nuo estrogenų, o estrogenų receptoriaus alfa (ERα) mRNA kiekis yra didesnis nei ERβ. Dėl to MCF-7 ląstelės yra labai naudingos tiriant estrogenų receptorių signalų vaidmenį krūties vėžio biologijoje.
- Priklauso nuo hormonų: MCF-7 ląstelės yra tipiškas nuo hormonų priklausomo teigiamų receptorių krūties vėžio modelis.
Apribojimai
MCF-7 ląstelėms dažniausiai priskiriami šie apribojimai:
- Lėtas augimo greitis: Lyginant su kitomis krūties vėžio ląstelių linijomis, MCF-7 ląstelės auga lėtai. Todėl, norint atlikti įvairius ląstelių kultūrų eksperimentus, šios ląstelės sėjamos palyginti dideliu ląstelių tankumu.
MCF-7 ląstelės: Daugiadisciplininiai tyrimai ir reikšmė krūties vėžiui
Krūties vėžio apibūdinimas naudojant MCF-7 ląsteles
MCF-7 ląstelės yra kertinis krūties vėžio tyrimų akmuo. 1973 m. jos buvo gautos iš žmogaus krūties adenokarcinomos audinio. Šios ląstelės yra ypač svarbios tiriant estrogenų receptoriams teigiamą krūties vėžį, nes jose yra estrogenų receptorių. Jos leidžia mokslininkams tirti nuo estrogenų priklausomo augimo niuansus ir hormoninės terapijos, pavyzdžiui, tamoksifeno, veiksmingumą, toliau aiškinantis veikimo ir atsparumo šiems gydymo metodams mechanizmus
Be su hormonais susijusių tyrimų, MCF-7 ląstelės yra labai svarbios tiriant krūties vėžį molekuliniu lygmeniu. Jų taikymas apima tiek navikų molekulinio profilio analizę, tiek vėžinių ląstelių proliferacijos ir progresavimo tyrimus 2D kultūrose ir trimačiuose mikrosluoksniuose, esančiuose karkasuose, kurie tiksliai atspindi in vivo naviko mikroaplinką
Kova su krūties vėžio atsparumu vaistams
MCF-7 ląstelės labai prisidėjo prie atsparumo vaistams krūties vėžio gydyme supratimo ir įveikimo. Sukeldami atsparumą didelėmis chemoterapinių vaistų dozėmis, mokslininkai gali ištirti mechanizmus, dėl kurių vėžys atsinaujina ir sumažėja pacientų išgyvenamumas. Išsamūs tyrimai, kuriuose dalyvavo MCF-7 ląstelės, atskleidė ilgos nekoduojančios RNR HOTAIR vaidmenį atsparumo vaistams procese, todėl tai yra potencialus taikinys terapiniam įsikišimui
Nuolat tobulinant chemoterapinius vaistus, MCF-7 ląstelės taip pat naudojamos įvairių medžiagų, įskaitant natūralius produktus, sintetinius junginius ir nanodaleles, priešvėžiniam potencialui tirti. Šios pastangos yra labai svarbios siekiant sukurti veiksmingesnius krūties vėžio gydymo būdus, kuriais būtų galima kovoti su vaistams atspariomis vėžio ląstelių atmainomis
Terapijos kūrimo ir klinikinio taikymo pažanga
Tyrimų, atliktų naudojant MCF-7 ląsteles, metu gautos įžvalgos taikomos ir kuriant krūties vėžio gydymo metodus. MCF-7 ląstelės yra labai svarbi ikiklinikinių tyrimų priemonė, naudojama junginių atrankai, citotoksiškumo nustatymui ir apoptozės indukcijos įvertinimui. Šie tyrimai turi didelę reikšmę būsimiems klinikiniams taikymams, nes MCF-7 ląstelėmis atliktų tyrimų išvados ir toliau bus naudojamos naujoviškoms strategijoms, kuriomis siekiama pagerinti pacientų priežiūrą ir gydymo rezultatus
Išlaisvinkite savo mokslinių tyrimų potencialą: Pirkite MCF-7 ląstelių produktus šiandien!
MCF-7 ląstelės: Publikacijos
Yra daugybė publikacijų apie MCF-7 ląsteles. Šiame skyriuje bus pateikti tik keli svarbūs pavyzdžiai:
Šis straipsnis publikuotas žurnale "Experimental and Therapeutic Medicine" 2019 m. Zhixiang Li ir kolegos. Tyrime pasiūlyta, kad ilgųjų nekoduojančių RNR HOTAIR nukabinimas pašalina MCF-7 krūties vėžio ląstelių atsparumą doksorubicinui reguliuojant PI3K/AKT/mTOR kelią.
Šioje Chemico-Biological Interactions žurnale publikuotoje publikacijoje, tiriant Guajadial junginio poveikį atsparumui vaistams, naudotos motininės ir vaistams atsparios MCF-7 ląstelės. Šis junginys slopina ABC transporterio raišką ir mažina PI3K/AKT kelio reguliavimą, kad būtų panaikintas atsparumas daugeliui vaistų.
Šiame publikuotame straipsnyje aprašoma kanabidiolio ir penkių chemoterapinių vaistų sinergetinė sąveika MCF-7 ląstelėse. Tyrime siūloma kanabidioliu pagrįsta sinergetinė adjuvantinė terapija krūties vėžiui gydyti.
Šiame straipsnyje, paskelbtame žurnale "The EuroBiotech Journal", vertinant kai kuriuose Tuniso vaistiniuose augaluose esančių fenolinių junginių antivėžinį poveikį, naudotos MCF-7 ląstelės.
Tyrime pasiūlytos Allium cepa lapų ekstraktu užterštos žaliosios nanodalelės kaip kandidatas į vaistus. Šios nanodalelės pasižymi priešvėžiniu ir antioksidaciniu aktyvumu MCF-7 ląstelėse.
MCF-7 ląstelių ištekliai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt
MCF-7 yra dažnai kultivuojama krūties vėžio ląstelių linija. Yra keletas šaltinių apie šią ląstelių liniją, kuriuose paaiškinamas jos tvarkymas, kultivavimas ir transfekcijos protokolai.
Ląstelių auginimo protokolai
Toliau pateikiami keli šaltiniai, kuriuose pateikiama informacija apie MCF-7 ląstelių kultivavimą.
- Ląstelių skaidymas: Šis dokumentas padės sužinoti apie MCF-7 ląstelių dalijimo ir atšildymo procesą.
- MCF-7 ląstelės: Šiame straipsnyje rasite visas pagrindines ir išplėstines žinias apie MCF-7 ląsteles. Jame taip pat pateikiamas MCF-7 ląstelių kultivavimo protokolas.
Transfekcijos protokolai
Čia pateikiami keli šaltiniai, kuriuose pateikiami MCF-7 ląstelių linijos transfekcijos metodai.
- Plazmidinės DNR transfekcija į MCF-7 ląsteles: Šioje svetainės nuorodoje rasite išsamų MCF-7 ląstelių transfekcijos protokolą.
- MCF-7 ląstelių transfekcija: Šioje nuorodoje pateikiami optimizuoti transfekcijos protokolai, susiję su MCF-7 ląstelių linija, kuriais dalijasi mokslininkai iš viso pasaulio.
Vaizdo įrašai, susiję su MCF-7 ląstelių linija
Yra daug vaizdo įrašų apie MCF-7 ląsteles. Čia kalbėsime apie kai kuriuos, susijusius su MCF-7 transfekcija ir kultivavimu.
- MCF-7 ląstelių transfekcija: Šiame vaizdo įraše parodytas MCF-7 ląstelių transfekcijos protokolas.
- Ląstelių perleidimas: Šiame vaizdo įraše paaiškinamas pagrindinis ląstelių linijų kultivavimo protokolas.
- Prigludusių ląstelių užšaldymas: Šiame vaizdo įraše pateikiama informacija apie adherentinių ląstelių linijų užšaldymą.
Tikimės, kad šiame straipsnyje gerai susipažinote su MCF-7 ląstelių tvarkymu, subkultūravimu ir priežiūra. Be to, jis gali padėti jums sužinoti apie šios ląstelių linijos privalumus ir pritaikymo moksliniams tyrimams galimybes. Jei planuojate dirbti su MCF-7 ląstelėmis, užsisakykite iš mūsų.
Atsakymai į dažniausiai užduodamus klausimus: MCF-7 ląstelių linijų tyrinėjimas
Nuorodos
- Moon, H.-r. ir kt., "Krūties vėžio invazijos apibūdinimas pagal potipį naudojant mikrofluidinę naviko platformą" PloS one, 2020, 15(6)
- Hegde, S.M., ir kt, "Branduolinių receptorių (ER, PR ir GR) ir jų steroidinių hormonų sąveika MCF-7 ląstelėse" Mol Cell Biochem, 2016, 422(1-2)
- Comşa, Ş., A. M. Cimpean ir M. Raica, "MCF-7 krūties vėžio ląstelių linijos istorija: 40 metų mokslinių tyrimų patirties" Priešvėžiniai tyrimai, 2015, 35(6)
- Lee, A. V., S. Oesterreich ir N. E. Davidson, "MCF-7 ląstelės - 45 metus keičiančios krūties vėžio tyrimų ir priežiūros kryptį" JNCI: Nacionalinio vėžio instituto žurnalas, 2015, 107(7)
- Li, Z., ir kt. "LncRNA-HOTAIR nukabinimas mažina krūties vėžio ląstelių atsparumą doksorubicinui per PI3K/AKT/mTOR signalinį kelią" Eksperimentinė ir terapinė medicina, 2019, 18(1)
- Li, Y., ir kt, "Guajadialas keičia atsparumą daugeliui vaistų slopindamas ABC transporterio raišką ir slopindamas PI3K/Akt kelią vaistams atspariose krūties vėžio ląstelėse" Cheminės ir biologinės sąveikos, 2019, 305
- Ruenraroengsak, P., et al. "Frizzled-7-targeted delivery of cinc oxide nanoparticles to drug-resistant breast cancer cells" ("Į Frizzled-7 nukreiptas cinko oksido nanodalelių pristatymas vaistams atsparioms krūties vėžio ląstelėms") Nanoscale, 2019, 11(27)
- Shrihastini, V., et al, "Augalinės kilmės bioaktyvūs junginiai, jų priešvėžinis poveikis ir in silico metodai kaip alternatyvi tikslinė krūties vėžio gydymo strategija: Atnaujinta apžvalga" Vėžys, 2021, 13(24)
- Erdogan, O., et al, "Green synthesis of silver nanoparticles via Cynara scolymus leaf extracts: The characterization, anticancer potential with photodynamic therapy in MCF7 cells" PloS one, 2019, 14(6)
- Barbosa, A. M. ir F. Martel, "Targeting glucose transporters for breast cancer therapy: Gliukozės gliukozės gliukozės šalinimas: natūralių ir sintetinių junginių poveikis" Cancers, 2020, 12(1)
