KG-1 ląstelių linija

KG-1 ląstelės yra žmogaus leukemijos ląstelių linija, plačiai naudojama biomedicininiuose tyrimuose. Jos gali būti įvairiai naudojamos imunologijos, vėžio ir toksikologijos tyrimuose. Mokslininkai šias ląsteles naudoja ligų mechanizmams tirti ir galimiems gydymo būdams išbandyti. Šiame straipsnyje pateikiama išsami informacija apie KG-1 ląstelių liniją, kuri gali būti naudinga jūsų darbe. Jame bus aptarta:

  1. KG-1 ląstelių linijos bendrosios savybės ir kilmė
  2. KG-1 ląstelių linijos kultivavimo informacija
  3. KG-1 ląstelių linija: Privalumai ir apribojimai
  4. KG-1 ląstelių taikymas moksliniuose tyrimuose
  5. Publikacijos apie KG-1 ląsteles
  6. KG-1 ląstelių linijos šaltiniai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt


1. Bendrosios KG-1 ląstelių linijos savybės ir kilmė

Ląstelių linijos kilmė ir bendrosios charakteristikos padeda tyrėjui apsispręsti dėl jos naudojimo savo darbe. Šią informaciją galite ištirti prieš pradėdami su ja dirbti. Šiame straipsnio skyriuje rašoma apie KG-1 makrofagų kilmę ir savybes. Čia sužinosite: Kas yra KG-1 ląstelės? Kas yra KG-1a ląstelių linija? Kokia yra KG-1 ląstelių linijos kilmė? Kokia yra KG-1 morfologija?

  • KG-1 yra į limfoblastus panaši ląstelių linija, gauta iš kaulų čiulpų aspirato, gauto iš kaukaziečio vyro (59 m.), sergančio ūmine mielogenine leukemija. Ją 1978 m. sukūrė Koeffleris ir Golde. Šios ląstelės daugiausia yra promielocitų arba mieloblastų brendimo stadijos [1].
  • KG-1 ląstelės pasižymi į limfoblastus panašia morfologija.
  • KG-1 ląstelių linijos kariotipui būdingas pseudodiploidinis modalinis chromosomų skaičius.

KG-1 ir KG-1a

KG-1a yra tėvinių KG-1 ląstelių sublinija. Ji buvo sukurta po 35 KG1 ląstelių linijos perėjimų. Ji yra mažiau diferencijuota, palyginti su KG-1 ląstelių linija. Be to, ši sublinija yra mažiau brandi citocheminiu, morfologiniu ir funkciniu požiūriu, palyginti su tėvine ląstelių linija (KG-1).

Žmogaus kraujo raudonųjų kraujo kūnelių analizė realiuoju laiku po mikroskopu atliekant biologinius laboratorinius tyrimus.

2. Informacija apie KG-1 ląstelių linijos kultūrą

Šiame straipsnio skyriuje bus pateikta visa būtina informacija apie KG-1 ląstelių kultūrą, kuri gali palengvinti jūsų darbą. Čia sužinosite: Koks yra KG 1 ląstelių linijos padvigubėjimo laikas? Kokios yra KG-1 makrofagų kultūros sąlygos? Kaip kultivuoti KG-1 ląsteles?

Pagrindiniai KG-1 ląstelių kultivavimo aspektai

Padvigubėjimo laikas:

KG-1 dvigubėjimo laikas yra maždaug 45 valandos. Tačiau jis gali skirtis priklausomai nuo kultivavimo sąlygų.

Adherentinės arba suspensijos:

KG-1 ląstelės auga suspensijoje.

Ląstelių tankis:

Optimalus KG1 ląstelių linijos tankis yra nuo 1 iki 3 x105 ląstelių/ml. Norint atlikti subkultūrą, ląstelių suspensija perkeliama į sterilią mėgintuvėlį ir centrifuguojama. Tada surinktos ląstelės sumaišomos su šviežia terpe ir atsargiai resuspenduojamos. Po to ląstelės išpilamos į naujus kolbelius ir auginamos optimaliu ląstelių tankiu. Ląstelės gali būti padalytos, kai pasiekia maksimalų ląstelių tankį 1–2 x106 ląstelių/ml.

Auginimo terpė:

KG-1 ląstelėms auginti naudojama IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) terpė, kurioje yra 10 % FBS, 4,5 g/l gliukozės, 4 mM L-glutamino, 1,0 mM natrio piruvato ir 3,0 g/l NaHCO3. Terpė turėtų būti keičiama po trijų dienų.

Augimo sąlygos:

KG1 AML ląstelių linija kultivuojama drėgname inkubatoriuje 37 °C temperatūroje ir su 5 % CO2 tiekimu.

Laikymas:

Užšaldytos ląstelės laikomos skysto azoto garų fazėje arba žemesnėje nei -150 °C temperatūroje elektrinėje ultražemos temperatūros šaldiklyje, siekiant apsaugoti ląstelių gyvybingumą.

Užšaldymo procesas ir terpė:

CM-1 arba CM-ACF tinka KG-1 ląstelių užšaldymui. Ląstelės užšaldomos naudojant lėto užšaldymo procesą, kad būtų apsaugotos nuo bet kokio šoko. Šis metodas leidžia temperatūrą mažinti po 1 °C per minutę.

Atšildymo procesas:

Ląstelės atšildomos iš anksto pašildytame 37 °C vandens vonioje, kol lieka tik nedidelis ledo gabalėlis. Atšildytoms ląstelėms pridedama šviežia terpė ir centrifuguojama, kad būtų pašalinti šaldymo terpės komponentai. Ląstelių nuosėdos atsargiai resuspenduojamos ir supilamos į naujas kolbas, kuriose yra augimo terpė.

Biologinio saugumo lygis:

Biologinio saugumo 1 lygio laboratorija yra būtina KG-1 ląstelių kultūrų išlaikymui.

KG-1 ląstelės, rodančios mažų ląstelių klasterių susidarymą suspensijos kultūroje, 20x ir 10x padidinimas.

3. KG-1 ląstelių linija: Privalumai ir trūkumai

KG-1 mieloidinės leukemijos ląstelių linija, kaip ir kitos ląstelių linijos, turi daug privalumų ir trūkumų. Šiame skirsnyje sužinosime apie keletą svarbiausių iš jų, kurie gali būti labai svarbūs priimant sprendimą dėl jos naudojimo jūsų tyrimuose.

Privalumai

Pagrindiniai KG-1 ląstelių privalumai yra šie:

  • Lengvas kultivavimas

    KG-1 ląstelės yra lengvai auginamos mokslinių tyrimų laboratorijose, nes joms keliami nesudėtingi ląstelių auginimo reikalavimai. Lengva jų priežiūra ir augimo sąlygos yra prieinamos daugeliui tyrėjų, turinčių pagrindinius ląstelių kultūrų auginimo įrenginius.

  • Ūminės mieloidinės leukemijos (AML) modelis

    Iš ūmine mieloidine leukemija (ŪML) sergančio vyro gauta KG-1 ŪML ląstelių linija yra vertingas įrankis tiriant ŪML biologiją ir atliekant galimų gydymo būdų tyrimus, leidžiantis suprasti šios ligos pagrindinius mechanizmus ir gydymo strategijas.

apribojimai

Su KG1 ląstelių linija susiję šie apribojimai:

  • In vitro modelis

    KG-1 ląstelės yra vertingas in vitro modelis AML tyrimams, tačiau svarbu pažymėti, kad jos gali nevisiškai atkartoti ligos sudėtingumą in vivo, jos yra supaprastintas ląstelių modelis, kuris gali neaprėpti visų AML biologijos aspektų.

4. KG-1 ląstelių pritaikymas moksliniams tyrimams

KG-1 ląstelės turi keletą perspektyvių pritaikymo biomedicininiuose tyrimuose galimybių. Kai kurie iš svarbių KG1 makrofagų panaudojimo moksliniams tyrimams pavyzdžių yra šie:

  • Vėžio tyrimai: KG-1 ląstelės buvo gautos iš ūmine mieloidine leukemija sergančio paciento, todėl jos laikomos vertinga mokslinių tyrimų priemone tiriant AML biologiją. Mokslininkai šias ląsteles naudoja ląsteliniams ir molekuliniams mechanizmams, lemiantiems AML vystymąsi, augimą ir atsparumą vaistams, tirti. Taip pat nustatomi ir atrandami nauji biologiniai žymenys, genetinės mutacijos ir signaliniai keliai, susiję su AML. Pavyzdžiui, 2019 m. atliktame tyrime buvo tiriama, kad ilgoji nekoduojanti RNR linc00239 palengvina ūminės mieloidinės leukemijos ląstelių KG-1 atsparumą doksorubicinui ir piktybinį elgesį. Tolesnis tyrimas atskleidė, kad lncRNA aktyvuoja PI3K/Akt/mTOR signalizaciją, kad sukeltų šį poveikį AML ląstelėms [2].
  • Toksikologija: KG1 ląstelių linija plačiai naudojama toksikologiniuose tyrimuose. Mokslininkai tiria potencialių terapinių medžiagų, įskaitant chemoterapinius vaistus ir tikslinę terapiją, toksiškumą ir veiksmingumą KG1 mieloidinės leukemijos ląstelėse, kad nustatytų perspektyvius vaistus kandidatus būsimiems ikiklinikiniams ir klinikiniams vertinimams. 2018 m. atliktuose tyrimuose buvo analizuojamas doksorubicino turinčių nanonozomų toksiškumas KG1 AML ląstelių linijai. Tyrime pasiūlyta, kad nano-nizomos yra tinkamas nešiklis vaistui pristatyti, nes padidina gydymo efektyvumą [3]. Kito tyrimo metu mokslininkai tyrė dilgėlių arbatos, paruoštos iš Urtica dioica augalo lapų, gydomąjį poveikį. Tyrimas atskleidė, kad šio augalo vandeninis lapų ekstraktas pasižymi priešvėžiniu poveikiu ūminės mieloidinės leukemijos ląstelėms KG-1 ir U937 [4].


5. Publikacijos apie KG-1 ląsteles

Šioje straipsnio dalyje pateikiama keletas įdomių mokslinių publikacijų apie KG-1 ląsteles.

Kvercetinas jautrina žmogaus mieloidinės leukemijos KG-1 ląsteles nuo TRAIL sukeltos apoptozės

Šis straipsnis paskelbtas žurnale "Journal of Cellular Physiology" (2019 m.). Tyrime siūloma, kad kvercetino junginys jautrina KG1 AML ląstelių liniją prieš su TNF susijusį apoptozę sukeliantį ligandą (TRAIL) ir gali padidinti TRAIL sukelto citotoksiškumo poveikį ląstelėms.

KLF8 skatina ūminės mieloidinės leukemijos ląstelių augimą ir glikolizę per AKT/mTOR kelią

Šiame "Tropical Journal of Pharmaceutical Research" (2022 m.) straipsnyje siūloma, kad į krüppel panašaus transkripcijos faktoriaus 8 mažinimas slopina AML ląstelių dauginimąsi ir glikolizę, skatindamas apoptozę per AKT/mTOR signalinio kelio reguliavimą.

Sorafenibo ir arseno trioksido poveikis U937 ir KG-1 ląstelių linijoms: Apoptozė ar autofagija?

Šiame žurnale "Cell Journal" (Yakhteh) (2020 m.) atliktame tyrime nagrinėtas galimas arseno trioksido ir sorafenibo poveikis U937 ir KG-1 ląstelėms.

Ūminės mieloidinės leukemijos jautrumas metaboliniams inhibitoriams: glikolizė pasirodė esanti geresnis terapinis taikinys

Šiame žurnale "Medical Oncology" (2020) paskelbtame tyrime buvo vertinama OXPHOS ir glikolizė kaip terapiniai taikiniai AML ląstelių linijoje KG-1.

Kurkuminas kartu su talidomidu mažina STAT3 ir Bcl-xL ekspresiją, todėl ūminės mieloidinės leukemijos ląstelių linijose vyksta apoptozė

Šiame 2020 m. leidinyje "Vaistų projektavimas, kūrimas ir terapija" siūloma, kad kurkumino ir talidomido junginiai sinergiškai veikia apoptotiškai KG-1 ląstelėse, mažindami STAT3 ir Bcl-xL raišką.

6. KG-1 ląstelių linijos ištekliai: Ataskaitos, vaizdo įrašai ir kt

Toliau pateikiami keli internetiniai ištekliai apie KG-1 ląsteles.

Šioje nuorodoje pateikiamas KG-1 ląstelių kultūros protokolas:

  • KG-1 ląstelių linija: Šioje svetainėje pateikiama pagrindinė informacija apie KG-1 ląstelių liniją. Joje pateikiama informacija apie ląstelių linijos terpę ir subkultūrinimo bei kriokonservuotų ir proliferacinių kultūrų tvarkymo protokolai.


Nuorodos

  1. Pelliccia, F., V. Ubertini ir N. Bosco, Molekulinės citogenetinės analizės svarba prieš naudojant ląstelių linijas moksliniams tyrimams: KG-1a leukemijos ląstelių linijos atvejis. Oncol Lett, 2012. 4(2): p. 237-240.
  2. Yang, Y., et al., IlganekoduojantiRNR linc00239 skatina piktybinį elgesį ir chemorezistentiškumą doksorubicinui iš dalies per PI3K/Akt/mTOR kelio aktyvinimą ūminės mieloidinės leukemijos ląstelėse. Oncology Reports, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
  3. Bahrami-Banan, F., et al. nano-jonosomų, kuriose yra doksorubicino, paruošimas ir tyrimas bei jų toksiškumo vertinimas ūminės mieloblastinės leukemijos ląstelių linijai KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): p. 309-323.
  4. Hodroj, M.H., et al. dilgėlių arbata slopina ūminės mieloidinės leukemijos ląstelių augimą in vitro, skatindama apoptozę. Nutrients, 2020. 12(9): p. 2629.

Nustatėme, kad esate kitoje šalyje arba naudojate kitą naršyklės kalbą nei šiuo metu pasirinkta. Ar norite priimti siūlomus nustatymus?

Uždaryti