Paskelbta: 2023 m. | Paskutinis peržiūrėjimas: 2026 m. gegužė

Jurkat E6.1 ląstelių linija

Jurkat E6.1 yra Jurkat ląstelių linijos klonas – tai iš periferinio kraujo gauta nemirtinga žmogaus T-limfocitų ląstelių linija. Pirmą kartą sukurta 1977 m., ji naudojama tyrimuose, susijusiuose su T ląstelių receptorių signalizacija, T ląstelių ir kitų limfocitų adoptine terapija prieš vėžį, su krauju susijusių protoonkogenų tyrimais, ląstelių išlikimu ir ląstelių diferenciacija.

Šiame straipsnyje pateiksime visą informaciją ir būtinas žinias, kurias turite žinoti prieš pradėdami darbą su Jurkat E6.1 klonuotomis ląstelių linijomis, įskaitant:

1. Kilmę, istoriją ir bendrąją informaciją
2. Ląstelių kultūros charakteristikos
3. Jurkat E6.1 ląstelių linijų taikymo sritys
4. Moksliniai straipsniai
5. Privalumai ir trūkumai
6. Ištekliai: protokolai, vaizdo įrašai ir kita

 1. Kilmė, istorija ir bendroji informacija

Čia pateikiama visa reikalinga informacija apie Jurkat E6.1 ląstelių linijos istoriją, kilmę ir bendrąsias charakteristikas bei jų tvarkymą ląstelių kultūroje.

• „Jurkat E6.1“ yra nemirtinga žmogaus T-limfocitų ląstelių linija. Ši klonuota ląstelių linija yra „Jurkat“ ląstelių linijos atmaina, gauta 1976 m. iš 14-mečio berniuko, sergančio ūmia limfoblastine leukemija, periferinio kraujo. Išskyrus ląsteles iš kraujo, ši ląstelių linija iš pradžių buvo pavadinta JM, nes pavadinimai „JM“ ir „Jurkat“ rodo, kad šios ląstelių linijos buvo išskirtos iš to paties paciento. Jurkat E6.1 ląstelių linija buvo klonuota iš ląstelių atmainų, žinomų kaip Jurkat-FHCRC.
• E6.1 ląstelių linijos yra kilusios iš leukemijos; šios ląstelių linijos naudojamos IL-2 ekspresijai padidinti stimuliuojant monokloniniais antikūnais arba lektinu. Jos ekspresuoja T ląstelių antigenų receptorius; todėl šios ląstelių linijos gali būti naudojamos imuninės sistemos sutrikimų tyrimams ir imunologinės onkologijos moksliniams tyrimams.
• Jurkat E6.1 ląstelių morfologija: Jurkat E6.1 ląstelės buvo izoliuotos iš leukemijos sergančio paciento ir, palyginti su T-limfocitais, turi pakitusią morfologiją, dėl ko jos tampa nemirtingomis ląstelių linijomis. Limfoblastų ląstelės susidaro, kai naivios limfocitai aktyvuojami antigeną pateikiančių ląstelių. Dėl to padidėja branduolio, citoplazmos, mRNR ir baltymų augimas.
• Ląstelių dydis: Jurkat E6.1 ląstelių linijos yra klonuotos ir nemirtingos, dažniausiai jų skersmuo svyruoja nuo 10 iki 16 μm (skersmuo gali skirtis priklausomai nuo suspensijos tipo). Šių ląstelių linijų ląstelės yra labai sferinės formos.
• Genomas ir chromosomų skaičius: Šios ląstelių linijos yra žmogaus T-limfocitų pseudodiploidinės ląstelių linijos, kurių modelinė chromosoma yra 46-oji. Taip pat nustatyta, kad modelinė chromosoma pasitaiko maždaug 74 % atvejų, o poliploidijos lygis siekia apie 5,3 %. Kariotipo tyrimai parodė kariotipą 46, X, Y, -2, -18, del (2) (p21p23), del (18) (p11.2). X ir Y chromosomos paprastai turi reguliarią kopiją daugumoje ląstelių linijų.
• Jurkat ląstelių linijos ir E6.1 Jurkat ląstelių linijos: Jurkat ląstelių linijos yra pirminės motininės ląstelių linijos, pirmą kartą izoliuotos iš ūminės limfoblastinės leukemijos sergančio paciento. Tačiau E6.1 Jurkat ląstelių linijos yra klonuotos Jurkat-FHCRC ląstelių linijų atmainos.

Paskelbta: 2023 m. | Paskutinis peržiūrėjimas: 2026 m. gegužė

Jurkat E6.1 ląstelių linijų taikymas

Jurkat E6.1 ląstelių linija dažniausiai naudojama tyrimams ir ligų, susijusių su imunine sistema bei su ja susijusių vėžio formų, studijavimui. Be to, ji tinka tam tikrų su ŽIV infekcija susijusių sudėtingų reiškinių tyrimams, nes CD4 T ląstelių receptorius yra būtinas retrovirusui patekti į ląstelę.

Toliau aptariamos kelios pagrindinės sritys, kuriose naudojamos šios ląstelių linijos:

T ląstelių signalizacijos ir apoptozės kelių modelinė sistema: ši iš T ląstelių leukemijos išskirta ląstelių linija plačiai naudojama tyrimuose, susijusiuose su TCR signalizacijos kaskada. „Jurkat E6.1“ išskiria daugiau IL-2 ir IL-8, kurie vėliau padeda aktyvuoti T ląsteles ir sukelia uždegiminius procesus. Ši ląstelių linija taip pat žinoma dėl savo hiperfosforiluoto Pyk2 ir padidėjusios Vav1 gamybos, kuri turi lemiamą įtaką aktino citoскеleto pertvarkymui T ląstelėse. TCR segregaciją Jurkat E6-1 ląstelių linijoje taip pat galima pagerinti priverstine LFA-1 ekspresija, kuri dėl to sustiprina TCR signalizavimą ir IL-2 ekspresiją. Jurkat E6.1 ląstelių linijose taip pat atliekami ląstelių proliferacijos ir ląstelių ciklo tyrimai. Jos yra dažniausiai pasirenkamos tiriant apoptozės signalinius kelius ir DNR pažeidimų indukciją junginiais, gautais iš jūrinių ir augalinių šaltinių. 2013 m. tyrime, naudojant šias ląstelių linijas, buvo vertinamas ryklių epigoninių kondicionuotų terpių poveikis žmogaus ląstelėms. Panašiai Jurkat E6.1 ląstelių linijose buvo tiriamas augalinės kilmės hirsutino slopinamasis poveikis ląstelių proliferacijai. Dažnai vėžio tyrimai taip pat naudoja Jurkat E6.1, siekdami įvertinti pasirinktus tikslus. Šiose ląstelių linijose taip pat buvo tiriamas jūrinių neurotoksinų, pavyzdžiui, brevetoksinų (PbTx), poveikis.

HIV tyrimai: Viena iš svarbiausių „Jurkat E6.1“ ląstelių linijų pritaikymo sričių yra jų gebėjimas tarnauti kaip tinkamas modelis HIV tyrimams dėl savybės reaguoti į įvairius signalinius įvykius, kurie indukuoja TCA. „Jurkat E6.1“ ląstelių linijos buvo naudojamos ne tik siekiant suprasti ŽIV aktyvaciją, bet ir analizuojant mechanizmus, lemiančius ŽIV latentinę būseną. ŽIV replikacija ir infekcija buvo išsamiai tiriamos šiose ląstelių linijose, kuriose galima atlikti genų redagavimą ir genų išjungimą, kaip buvo padaryta 2021 m. tyrime. Tiriant vaistų pristatymo poveikį ŽIV infekcijai, pavyzdžiui, ilgai veikiančio efavirenz (Efa) ir enfuvirtido (Enf) mišinio polimero-lipidų hibridinių nanodalelių (PLN) poveikį viruso patekimui į ląstelę, buvo naudojamos Jurkat E6.1 ląstelių linijos. CRISPR/Cas9 technologija modifikuotos Jurkat E6.1 ląstelės buvo ne kartą naudojamos HIV patekimo, replikacijos ir infekcijos mechanizmams tirti.

Moksliniai leidiniai

Čia pateikiami keli reikšmingi pavyzdžiai iš gausios mokslinių tyrimų kolekcijos, įskaitant Jurkat E6.1 ląstelių linijas.

Seleno metabolitas metilselenolis reguliuoja tų ligandų ekspresiją, kurie per limfocitų receptorių NKG2D sukelia imuninę aktyvaciją

Naudojant Jurkat E6.1 ląstelių linijas, inkubuotas skirtinguose seleno junginiuose, buvo tiriamas ligandų ekspresija ir MICA/B paviršinė ekspresija.

Karakazino rūgštis, ent-3,4-seko-kaurenas, skatina apoptozę ir ląstelių diferenciaciją, slopindama NFkB signalinį kelią leukemijos ląstelėse.

Karakasino rūgšties sukeltos citotoksiškumo mechanizmų tyrimas žmogaus T ląstelių linijose, pvz., Jurkat E6.1 ir HL-60.

Įrodymai apie azidotimidino atsparumo vystymąsi in vitro T-limfocitinių leukemijos ląstelių linijose (Jurkat E6–1/AZT-100) ir vaikams, sergantiems ŽIV-1 infekcija

Naudota Jurkat E6.1 ląstelių linija, ilgą laiką inkubuota su AZT vaistu, siekiant ištirti atsparumą azidotimidino (AZT) vaistui ŽIV-1 užsikrėtusiems pacientams.

Jurkat E6.1 ląstelių linijos tyrimai, susiję su kai kurių bioindolų poveikiu membranos sklandumui

Šiame tyrime buvo naudojama poliarizuotos fluorescencijos analizės sistema, siekiant išsiaiškinti bioindolų, įskaitant serotoniną, triptofaną ir melatoniną, poveikį Jurkat E6.1 ląstelių linijų membranų sklandumui.

Tribulus terrestris alkaloidų ekstrakto sukeliamos apoptozės Jurkat E6-1 ląstelėse molekulinis mechanizmas

Iš „Tribulus terrestris“ gautas alkaloidų ekstraktas indukavo apoptozę Jurkat E6.1 ląstelėse, siekiant išsiaiškinti pagrindinį veikimo mechanizmą.

LFA-1 ekspresijos padidinimas stiprina imuninių sinapsų struktūrą ir T ląstelių receptorių signalizavimą Jurkat E6.1 ląstelėse

T ląstelių receptorių signalizacija Jurkat E6.1 ląstelėse buvo sustiprinta priverstinai padidinus LFA-1 ekspresiją.

Privalumai ir trūkumai

Kaip ir kitos ląstelių linijos, Jurkat E6.1 turi savo privalumų ir trūkumų.

Privalumai

Yra daug priežasčių, kodėl ši ląstelių linija yra labiau tinkama šioms taikymo sritims:

• Augimo būdas

  „Jurkat E6.1“ yra suspensinė ir neprisitvirtinanti ląstelių linija, tai reiškia, kad ji auga suspensijoje ir neprisitvirtina prie kultūros paviršiaus.

• Genų ekspresija

  Jurkat E6.1 ląstelių linija ekspresuoja genus, koduojančius interleukiną-2 (IL‑2) ir CD3. Nustatyta, kad stimuliuojant monokloniniais antikūnais, lektinais arba forbolo esteriais, nukreiptais prieš T3 antigeninį kompleksą, šios ląstelės gamina padidintą IL-2 kiekį.

• Antigenų ekspresija

  Jurkat E6.1 ląstelių linija ekspresuoja CD3 antigeną, susijusį su T ląstelių aktyvacija ir signalizacija.

• Ekspresijos žymekliai

  Ląstelių linija ekspresuoja T ląstelių antigenų receptorių (TCR) žymeklius, kurie yra labai svarbūs T ląstelių atpažinimui ir imuniniam atsakui.

• Tinkamumas transfekcijai

  Jurkat klono E6.1 ląstelių linija tinka šeimininko transfekcijos eksperimentams, leidžiantiems įvesti egzogeninę genetinę medžiagą į ląsteles įvairiais mokslinių tyrimų tikslais.

Apribojimai

Išnagrinėję privalumus, apžvelkime apribojimus, susijusius su Jurkat E6.1 ląstelių linijų naudojimu:

• Ląstelių transfekcija naudojant virusinį vektorių

  Jurkat E6.1 ląstelių transfekcija yra sudėtinga dėl jų T-ląstelių kilmės. Paprastai genetiniam modifikavimui reikalingi brangūs ir laiko reikalaujantys virusiniai vektoriai. Nevirusiniai vektoriai Jurkat ląstelėse pasižymi mažu transfekcijos efektyvumu ir dideliu toksiškumu.

• Bakterinis užteršimas

  Siekiant užtikrinti eksperimentų rezultatų patikimumą, Jurkat E6.1 ląstelių kultūros turi būti stebimos dėl galimo bakterinio užteršimo.

• Virusinis užteršimas

  Jurkat E6.1 ląstelių linijos ekspresuoja įvairius chemokinų receptorius ir nedidelį CD4 kiekį, o tai palengvina virusų patekimą į ląsteles. Dėl to jos yra jautrios T ląsteles užkrečiančioms virusams, pvz., HTLV ir HIV.

6. Ištekliai: protokolai, vaizdo įrašai ir kita

Šiame skyriuje bus aptariami ląstelių kultivavimo ir transfekcijos metodai bei protokolai, taip pat su šia ląstelių linija susiję mokomieji vaizdo įrašai:

Ląstelių kultivavimo protokolai

Čia pateikiami keli pagrindiniai šios ląstelių linijos kultivavimo procedūrų aprašymai:

• Ląstelių kultivavimo standartinė darbo tvarka (SOP), Jurkat ląstelių dauginimas: Kalifornijos universitetas savo USCS Genome naršyklėje taip pat pateikė Jurkat klono E6-1 kultivavimo metodą.
• „Jurkat“, klono E6-1 kultivavimas ir tvarkymas: „Elabscience“ savo produktų aprašymo svetainėje pateikė ląstelių kultivavimo ir tvarkymo protokolą.

Transfekcijos protokolai

Čia pateikiamas įvairių transfekcijos protokolų sąrašas:

• „Jurkat“ ląstelių transfekcijos protokolas su „Lipofectamine LTX“ reagentu: „Jurkat“ ląstelių transfekcijos protokolas, naudojant „Lipofectamine LTX“ reagentą, pagamintą „ThermoFisher“. 
• „Amaxa™ 4D-Nucleofector™“ protokolas, skirtas Jurkat klonui E6.1 [ATCC®]: „Lonza Group AG“ pateikė Jurkat klono E6.1 iš ATCC transfekcijos protokolą, naudojant „4D-Nucleofector® X Unit“.

Vaizdo įrašai apie Jurkat E6.1

Yra keletas puikių vaizdo įrašų, kuriuose aptariamos ląstelių kultūros sąvokos, procedūros, proliferacija, pasėjimas ir kitos temos.

• Ląstelių perauginimas: Ląstelių kultūros pagrindai: Tai puikus „ThermoFisher“ vaizdo įrašas, pateikiantis pagrindinį žmogaus ląstelių linijų perauginimo vadovą.
• Ląstelių atšildymas: Ląstelių kultūros pagrindai: Šiame „ThermoFisher“ vaizdo įraše pateikiamos pagrindinės instrukcijos dėl ląstelių kultivavimo ir atšildymo.
• Plazmidinės DNR transfekcijos protokolas: Šiame „ThermoFisher“ vaizdo įraše daugiausia dėmesio skiriama plazmidinės DNR transfekcijos protokolui naudojant „Lipofectamine® LTX“ ir „Plus™“ reagentus.
• Apoptozės matavimas naudojant Jurkat ląstelių suspensiją, apdorotą 3 mikromoliariu staurosporino: Šiame vaizdo įraše „Nexcelom Bioscience“ demonstruoja, kaip atlikti apoptozės tyrimą „Celigo“ vaizdo citometru, naudojant „Hoechst“ ir kaspazės 3/7 reagentus.