Hep3B ląstelės: Kepenų ląstelių karcinomos tyrimai ir atradimai

HEP3B yra imortalizuota žmogaus hepatocitinės karcinomos ląstelių linija. Ji plačiai naudojama hepatotoksiškumo ir vaistų metabolizmo tyrimams. HEP3B transfekcijos efektyvumas yra didelis, todėl šios ląstelės dažniausiai naudojamos kepenų vėžio vystymuisi, progresavimui ir terapinėms intervencijoms tirti. Šiame straipsnyje pateikiama visa būtina informacija apie HEP3B ląstelių liniją, kuri padės jums dirbti su ja. Jame daugiausia bus aptarta:

Bendrosios HEP3B ląstelių savybės ir kilmė
Informacija apie HEP3B ląstelių linijos kultivavimą
HEP3B ląstelių linija: Privalumai ir apribojimai
HEP3B ląstelių taikymas moksliniuose tyrimuose
Publikacijos apie HEP3B ląstelių liniją
Šaltiniai, susiję su HEP3B ląstelių linija: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt

1.bendrosios HEP3B ląstelių savybės ir kilmė

Pagrindinė informacija, kurios reikia apie ląstelių liniją, yra jos kilmė ir bendrosios savybės. Tai gali padėti jums apsispręsti dėl jos naudojimo tyrimuose ir padėti su ja dirbti. Šiame straipsnio skyriuje pateikiama visa svarbiausia informacija apie HEP3B kilmę ir savybes. Čia sužinosite: Kas yra Hep 3B ląstelių linija? Kokia yra Hep3B ląstelių kilmė? Kokia yra HEP3B ląstelių morfologija?

HEP3B - nuolatinė žmogaus hepatomos ląstelių linija, kilusi iš 8 metų afrikiečio berniuko, sergančio hepatoceluline karcinoma (HCC), kepenų audinio. Ją 1979 m. sukūrė Adenas su kolegomis Barbaros B. Knowles laboratorijoje, Wistar institute, Filadelfijoje, JAV [1].
HEP3B ląstelės turi hepatito B viruso (HBV) genomo integraciją į savo chromosomą.
Šios hepatocitų karcinomos ląstelės pasižymi epitelio morfologija.
HEP3B ląstelių modalinis chromosomų skaičius yra 60. Skirtingai nei HepG2, jos neturi pertvarkytos 1 chromosomos.

Kuo skiriasi HepG2 ir Hep3B?

HepG2 ir HEP3B skiriasi chromosomų skaičiumi ląstelėje. HEP3B turi 60 chromosomų, o HepG2 ląstelės turi vidutiniškai 55 chromosomas. Be to, HepG2 nėra navikinės ir neigiamos hepatito B atžvilgiu, o HEP3B yra navikinės ir teigiamos HBV atžvilgiu.

Kepenų karcinoma mikroskopu žiūrint dideliu padidinimu.

2.informacija apie HEP3B ląstelių linijos kultivavimą

Žinodami informaciją apie ląstelių linijos kultivavimą, galėsite lengviau su ja dirbti. Šiame skyriuje aptariami visi svarbiausi HEP3B HBV ląstelių linijos kultivavimo klausimai, įskaitant: Koks yra HEP3B ląstelių padvigubėjimo laikas? Kokios yra HEP3B kultivavimo sąlygos? Kaip kultivuoti HEP3B HCC ląsteles?

Pagrindiniai HEP3B ląstelių kultivavimo aspektai

Padvigubėjimo laikas:	HEP3B ląstelių padvigubėjimo laikas yra maždaug 36 valandos.
Prigludusios arba suspenduotos:	Ši hepatomos ląstelių linija yra adherentiška.
Padalijimo santykis:	HEP3B ląstelės kultivuojamos santykiu nuo 1:2 iki 1:4. Adheravusios HEP3B ląstelės nuplaunamos 1 x PBS ir inkubuojamos su "Accutase" disociacijos tirpalu. Po 8-10 min. įpilama šviežios terpės ir ląstelės centrifuguojamos. Surinktos ląstelės atsargiai resuspenduojamos ir supilamos į kolbas su terpe rekomenduojamu padalijimo santykiu.
Auginimo terpė:	HEP3B ląstelėms auginti naudojama EMEM terpė, kurioje yra 10 % FBS, 2,2 g/l NaHCO3, 2 mM L-glutamino ir Earle'o subalansuotas druskos tirpalas (EBSS).
Augimo sąlygos:	HEP3B ląstelės auginamos 37 °C temperatūros drėkinamame inkubatoriuje, kuriame nuolat tiekiamas 5 % CO2.
Laikymas:	HEP3B ląstelės laikomos žemesnėje nei -150 °C temperatūroje elektriniame šaldiklyje arba skysto azoto garų fazėje.
Šaldymo procesas ir terpė:	HEP3B ląstelėms užšaldyti rekomenduojama CM-1 arba CM-ACF terpė. Ląstelės užšaldomos taikant lėtą užšaldymo procesą, kai temperatūra per minutę sumažėja tik 1 °C, kad būtų apsaugotas ląstelių gyvybingumas.
Atšildymo procesas:	Užšaldytos ląstelės 40-60 sekundžių atšildomos vandens vonelėje, įjungtoje 37 °C temperatūroje. Vėliau šios ląstelės sudedamos į šviežią augimo terpę ir centrifuguojamos, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės elementai. Surinktos ląstelės resuspenduojamos ir išpilstomos į naujas augimo kolbas.
Biologinės saugos lygis:	HEP3B ląstelių kultivavimui reikalinga 1 biologinės saugos lygio laboratorija.

Adheravęs pusiau susiliejęs Hep3B ląstelių sluoksnis 10× ir 20× padidinimu.

3.hEP3B ląstelių linija: Privalumai ir apribojimai

HEP3B yra plačiai naudojama hepatocelulinės karcinomos ląstelių linija. Šiame skirsnyje daugiausia dėmesio skiriama kai kuriems pagrindiniams šių hepatomos ląstelių privalumams ir apribojimams.

Privalumai

Pagrindiniai HEP3B ląstelių privalumai:

Lengva kultivuoti	HEP3B ląstelėms nekeliami jokie įmantrūs ląstelių auginimo reikalavimai, todėl jas lengva tvarkyti ir prižiūrėti mokslinių tyrimų laboratorijoje. Tai supaprastina eksperimentines procedūras.
Didelis transfekcijos efektyvumas	HEP3B ląstelės pasižymi ypatingu transfekcijos efektyvumu, todėl jos plačiai naudojamos genetinėms manipuliacijoms ir su genų raiška susijusiems tyrimams.
Tumorigeniškumas	HEP3B yra navikinė hepatocelulinės karcinomos ląstelių linija, galinti formuoti navikus, kai suleidžiama į imunosupresinę pelę. Tai padeda tirti vėžio progresavimą ir vystymąsi naudojant HEP3B ksenograftinius modelius.
HEP3B P53 būklė	HEP3B ląstelės turi P53 geno mutaciją, panašią į hepatocelulinės karcinomos (HCC) ir kitų vėžinių susirgimų, todėl jos yra tinkamos tiriant P53 mutacijos poveikį vėžio augimui, vystymuisi ir progresavimui.

Apribojimai

Su HEP3B ląstelių linija susiję apribojimai:

In vitro ląstelių modelis

HEP3B ląstelių linija yra in vitro hepatocelulinės karcinomos (HCC) ląstelių modelis. Tačiau ji gali nevisiškai atspindėti gyvuose organizmuose esančios HCC sudėtingumą. Todėl eksperimentų rezultatai in vitro gali skirtis nuo tų, kurie stebimi in vivo.

4.hEP3B ląstelių taikymas moksliniams tyrimams

HEP3B ląstelių linija gali būti naudojama biomedicininiuose tyrimuose. Keletas pagrindinių HEP3B ląstelių pritaikymo moksliniams tyrimams būdų yra šie:

Vėžio biologija : HEP3B yra žmogaus hepatocelulinės karcinomos ląstelių linija. Tai neįkainojamas ląstelių modelis, kuriuo galima tirti ląstelių ir molekulinius mechanizmus, lemiančius HCC vystymąsi ir progresavimą. Mokslininkai šias ląsteles naudoja genetinėms mutacijoms, ląsteliniams procesams ir ląstelių signalizacijos keliams, susijusiems su kepenų vėžiu, tirti. Pavyzdžiui, tyrime panaudotos HEP3B ląstelės ir nustatyta, kad mikroRNA-223-3p reguliuoja NLRP3 inflamazomos komponentus, slopina HEP3B hepatokarcinomos ląstelių proliferaciją ir didina jų apoptozę [2].
Vaistų atranka ir kūrimas: HEP3B ląstelių linija taip pat naudojama naujiems vaistams nuo kepenų karcinomos išbandyti, atrinkti ir kurti. Be to, ji naudojama įvairių priešvėžinių vaistų ir gydymo metodų toksiškumui ir veiksmingumui įvertinti. Mokslininkai taip pat naudojo šias hepatomos ląsteles vaistų metabolizmui tirti. Mokslininkai naudojo HEP3B ląsteles ir vertino Cotinus coggygria augalinio ekstrakto citotoksinį potencialą HEP3B hepatocitinės karcinomos ląstelėms [3].
Virusinės infekcijos: HEP3B yra hepatito B virusui teigiama ląstelių linija, todėl ji naudojama tiriant virusines infekcijas, galinčias sukelti kepenų vėžio išsivystymą, t. y. HBV ir HCV. Tai gali padėti geriau suprasti virusines infekcijas ir sukurti galimus antivirusinius gydymo būdus. Pavyzdžiui, tyrime buvo naudojamos HEP3B hepatocitų vėžio ląstelės ir tiriama ubikvitinacijos svarba hepatito c viruso dauginimuisi. Gauti rezultatai rodo, kad ubikvitinui specifinė proteazė 15 (USP15) dalyvauja HCV plitime reguliuodama hepatocitams būdingas funkcijas, įskaitant lipidinių lašelių formavimąsi ir HCV RNR transliaciją [4].

430,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 305141

5.publikacijos apie HEP3B ląstelių liniją

Šioje straipsnio dalyje bus aprašytos kelios įdomios mokslinių tyrimų publikacijos apie HEP3B ląsteles.

Apoptozės ir autofagijos reguliavimas luteolinu žmogaus hepatocelulinio vėžio Hep3B ląstelėse

Šioje publikacijoje Biochemical and Biophysical Research Communications (2019 m.) siūloma, kad liuteolino junginio sukeltas endoplazminio tinklo stresas gali turėti nuo P53 nulinių HEP3B ląstelių priešvėžinį poveikį nuo P53 nepriklausomu būdu.

Iš Avicennia marina išskirto lupeolio potencialus poveikis Hep3B kepenų vėžio ląstelėms

Šiame Archiv der Pharmazie (2021 m.) paskelbtame tyrime siūloma, kad penkiaciklinis triterpenoidas lupeolis būtų potencialus priešvėžinis agentas, veikiantis HEP3B ląsteles.

Cnidium monnieri (L.) Cusson etanolio ekstraktas sukelia ląstelių ciklo sustojimą ir apoptozę reguliuojant nuo p53 nepriklausomą kelią HepG2 ir Hep3B hepatocelulinės karcinomos ląstelėse

Šis straipsnis publikuotas žurnale "Molecular Medicine Reports" (2017). Tyrimo išvadose teigiama, kad Cnidium monnieri (L.) Cusson etanolio ekstraktas sukelia ląstelių mirtį (apoptozę) ir ląstelių ciklo sustojimą HepG2 ir HEP3B hepatokarcinomos ląstelėse reguliuojant p53 ir Akt/GSK-3β signalinį kelią.

Auranofinas sustiprina sulforafano sukeltą apoptozę hepatocelulinės karcinomos Hep3B ląstelėse per PI3K/Akt signalinio kelio inaktyvavimą

Šiame žurnale "Biomolecules and Therapeutics" (2020) paskelbtame tyrime siūloma, kad auranofinas pasižymi sinergetiniu aktyvumu ir skatina sulforafano medijuojamą HEP3B ląstelių apoptozę per PI3K/AKT kelio aktyvinimą.

Cirkuliacinė RNR-0072309 turi priešvėžinį poveikį Hep3B ląstelių linijai, veikdama mikro RNR-665

Šiame žurnale "BioFactors" (2023) paskelbtame moksliniame straipsnyje siūloma, kad žiedinė RNR-0072309 daro priešvėžinį poveikį HEP3B hepatocelulinės karcinomos ląstelėms, veikdama miRNA-665.

6.hEP3B ląstelių linijos šaltiniai: HEP3B kamieno šaltiniai: protokolai, vaizdo įrašai ir kt

Toliau pateikiami keli šaltiniai apie HEP3B ląsteles:

HEP3B transfekcija: Šiame vaizdo įraše paaiškinamas HEP3B ląstelių transfekcijos protokolas.
HEP3B transfekcijos efektyvumas: Ši nuoroda padės sužinoti HEP3B DMEM terpės sudėtį, ląstelių pasiskirstymą ir HEP3B ląstelių transfekcijos protokolą. Be to, joje pateikiama informacija, kaip optimizuoti HEP3B lipofectamine 3000 reagentą jūsų transfekcijos protokole.

Šioje nuorodoje pateikiamas HEP3B ląstelių auginimo protokolas:

HEP3B auginimo sąlygos: Šioje nuorodoje rasite Huh7 ir HEP3B kultūrų tvarkymo ir priežiūros protokolą.
HEP3B ląstelės: Šioje svetainėje pateikiama daug informacijos apie HEP3B ląsteles, įskaitant HEP3B terpę, ląstelių padalijimo, atšildymo ir proliferacinių bei kriokonservuotų kultūrų tvarkymo protokolą.

Nuorodos

Puttahanumantharayappa, L.D., ir kiti, Hepatoceliulinės karcinomos ląstelių linijų kilmė ir savybės. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
Wan, L., et al., miRNA-223-3p reguliuoja NLRP3, kad skatintų apoptozę ir slopintų hep3B ląstelių proliferaciją. Eksperimentinė ir terapinė medicina, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
Danjolli-Hashani, D. and S. Selen-Isbilir, Cytotoxic effect of Cotinus coggygria extract on Hep3B cancer cell line. Natural Product Research, 2022: p. 1-4.
Kusakabe, S. ir kiti, USP15 dalyvauja hepatito C viruso dauginime reguliuojant viruso RNR transliaciją ir lipidų lašelių susidarymą. Journal of Virology, 2019 m. 93(6): p. 10.1128/jvi. 01708-18.