HT-29 ląstelių linija
HT-29 yra žmogaus storosios žarnos vėžio ląstelių linija, turinti platų vėžio ir toksikologinių tyrimų pritaikymą. Pavyzdžiui, šios ląstelės yra jautrios standartiniams chemoterapiniams storosios žarnos vėžio gydymo metodams. Be to, HT-29 ląstelių linija yra gerai apibūdintas in vitro modelis, skirtas tirti žarnyno epitelio reakciją į bakterinę infekciją. HT-29 ląstelės imituoja subrendusių žarnyno ląstelių, t. y. enterocitų, savybes, todėl tinka prisijungimo ir mechanizmo tyrimams.
- Auginimo terpė
- Žiūrėti produkto puslapį
- Padvigubėjimo laikas
- Žiūrėti produkto puslapį
- Augimo tipas
- Adhezinis
- Biologinio saugumo lygis
- BSL-1
- Galima įsigyti
- Cytion — Užsakykite HT-29
- HT-29 ląstelės: kilmė ir bendroji informacija
- HT-29 ląstelių linijos ląstelių kultūros informacija
- HT-29 ląstelės: privalumai ir trūkumai
- HT-29 ląstelės: pritaikymas
- 5. Moksliniai straipsniai apie HT-29 ląsteles
- HT-29 ląstelių ištekliai: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
- Nuorodos
- Dažnai užduodami klausimai
HT-29 ląstelės: kilmė ir bendroji informacija
Prieš naudodami bet kokią ląstelių liniją, turėtumėte žinoti apie jos bendras charakteristikas ir kilmę. Šiame skyriuje sužinosite: Kas yra HT-29 ląstelės? Ar HT-29 yra storosios žarnos vėžio ląstelių linija? Kokia yra HT-29 ląstelių morfologija?
Kas yra HT-29 ląstelių linija? HT-29 yra storosios žarnos adenokarcinomos ląstelių linija, 1964 m. sukurta Trempe ir Fogh. Ląstelės iš pradžių buvo gautos iš pirminio naviko, nustatyto 44 metų amžiaus kaukazietės moteriai, sergančiai kolorektaline adenokarcinoma [1]. Nuo sukūrimo ši ląstelių linija naudojama vėžio biologijos tyrimams.
HT-29 ląstelių morfologija: HT-29 ląstelių linija paprastai turi epitelio tipo morfologiją. Diferencijuotos ląstelės auga monosluoksniuose, sudaro tvirtas ląstelių jungtis ir turi apikalinį šepetėlinį kraštą. Jei šios ląstelės auginamos gliukozės trūkumo terpėje arba joms suteikiami induktoriai, tokie kaip butiratas ar rūgštis, jos rodo enterocitams būdingas savybes.
Ląstelių dydis: HT-29 storosios žarnos vėžio ląstelių linijos skersmuo yra 11 μm.
Genomas ir ploidiškumas: HT-29 ląstelių linijos modalusis chromosomų skaičius yra 71. Jis gali svyruoti nuo 68 iki 72. Be to, HT-29 ląstelių supaprastintas chromosomų skaičius yra hipertriploidinis, o 2S komponentas pasitaiko 2,4 % dažniu.
Kas yra HT29 MTX? HT29 MTX yra metotreksatui atspari ląstelių linija, izoliuota iš originalios HT-29 žmogaus storosios žarnos vėžio ląstelių linijos, pritaikant ją prie 10 µM metotreksato. Šios ląstelės pasižymi gleivių išskiriančių subrendusių taurinių ląstelių savybėmis.
Informacija apie HT-29 ląstelių linijos kultūrą
Žinant pagrindinius ląstelių linijos kultivavimo reikalavimus, darbas su ja tampa lengvesnis. Turėtumėte žinoti: koks yra HT-29 ląstelių linijos dvigubėjimo laikas? Koks yra HT-29 ląstelių sėjimo tankis? Kokios terpės tinka HT-29 ląstelėms?
Padvigubėjimo laikas
Vidutinis HT-29 ląstelių linijos dvigubėjimo laikas yra 24 valandos.
Adhezinės/suspensinės
HT-29 yra adhezyvinė ląstelių linija.
Sėjimo tankis
Rekomenduojamas HT-29 ląstelių sėjimo tankis yra 3 x 104 ląstelės/cm2. Išaugintos ląstelės nuplaunamos 1X PBS ir atskiriamos po 8–10 minučių inkubacijos su „Accutase“. Įpilama šviežio terpės ir ląstelės centrifuguojamos. Ląstelių nuosėdos resuspenduojamos, o ląstelės išpilamos į naujus kolbelius rekomenduojamu ląstelių tankumu.
Auginimo terpė
HT-29 ląstelių optimaliam auginimui naudojama Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) terpė, papildyta 2,5 mM L-glutaminu ir 10 % FBS. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
Auginimo sąlygos
HT-29 ląstelėms augti reikalingas drėgnas inkubatorius, kurio temperatūra yra 37 °C, o CO2 koncentracija – 5 %.
Laikymas
Šios ląstelės laikomos skysto azoto garų fazėje, esant žemesnei nei -195 °C temperatūrai.
Šaldymo terpė ir procesas
HT-29 ląstelių linijai naudojama užšaldymo terpė yra CM-1 arba CM-ACF. Ląstelės užšaldomos taikant lėto užšaldymo procesą, kurio metu temperatūra nukrinta 1 °C ir efektyviai apsaugomas ląstelių gyvybingumas.
Atšildymo procesas
Užšaldytos HT-29 ląstelės atšildomos vandens vonioje, nustatant 37 °C temperatūrą. Šias ląsteles galima resuspenduoti ir tiesiogiai perpilti į kolbą su šviežia auginimo terpe. Priešingai, atšildytos ląstelės gali būti centrifuguojamos, siekiant pašalinti šaldymo terpės elementus, resuspenduojamos šviežioje terpėje ir kultivuojamos kolbose.
Biologinio saugumo lygis
HT-29 ląstelių linijai tvarkyti ir išlaikyti taikomas 1 biologinio saugumo lygis.
HT-29 ląstelės: privalumai ir trūkumai
Kiekviena ląstelių linija turi savitų privalumų ir trūkumų, kurie ją išskiria iš kitų ląstelių linijų. Šiame skyriuje aptariami pagrindiniai HT-29 ląstelių privalumai ir trūkumai.
Privalumai
Pagrindiniai HT-29 ląstelių privalumai yra šie:
-
Lengva auginti
HT-29 ląstelių linija yra lengvai tvarkoma ir prižiūrima, jos auginimui nereikalingi sudėtingi reikalavimai. Ji plačiai auginama mokslinių tyrimų laboratorijose.
-
Žarnyno ląstelių in vitro modelis
HT-29 ląstelės tam tikromis auginimo sąlygomis gali diferencijuotis į subrendusias žarnyno ląsteles (enterocitus ir gleives gaminančias ląsteles). Jos naudojamos kaip ląstelinis modelis maisto virškinimui ir biologiniam prieinamumui tirti.
-
Didelis transfekcijos efektyvumas
HT-29 storosios žarnos vėžio ląstelės pasižymi aukštu transfekcijos efektyvumu, todėl jos tinka genų ekspresijos ir reguliacijos tyrimams. Naudojant įvairius metodus galima atlikti tiek laikinos, tiek stabilios transfekcijos eksperimentus.
-
Jautrumas vaistams
HT-29 ląstelės yra jautrios chemoterapiniams vaistams, pvz., fluorouracilui ir oksaliplatinui, kurie dažniausiai naudojami storosios žarnos vėžio gydymui. Jos naudojamos vaistų atsparumo tyrimams ir potencialių vaistų, skirtų kolorektalinės karcinomos gydymui, atrankai.
Apribojimai
-
Heterogeniškumas
HT-29 ląstelės, kaip ir kitos vėžio ląstelių linijos, pasižymi heterogeniškumu ir gali nesudaryti vienalytės ląstelių populiacijos. Tai gali turėti įtakos tam tikrų tyrimų rezultatų atkuriamumui ir lemti nedidelius eksperimentų rezultatų skirtumus.
-
Ribotas diferencijavimas
HT-29 ląstelės turi ribotą diferenciacijos potencialą. Jos nevisiškai diferencijuojasi į žarnyno ar storosios žarnos ląsteles, o pasižymi tik keliais būdingais bruožais. Šis apribojimas gali riboti jų naudojimą sudėtingesnių biologinių procesų tyrimams.
HT-29 ląstelės: pritaikymas
HT-29 ląstelių linija yra plačiai kultivuojama mokslinių tyrimų laboratorijose dėl jos plačios taikymo srities. Šiame skyriuje bus aptariami tik keli svarbūs HT-29 ląstelių taikymo atvejai.
Vėžio tyrimai: HT-29 yra storosios žarnos adenokarcinomos ląstelių linija, todėl ji naudojama vėžio progresavimo, vystymosi ir pagrindinių molekulinės mechanizmų tyrimams. 2018 m. atliktame tyrime HT-29 ląstelių linija buvo naudojama metastazių atsakingų ląstelių molekulių tyrimams. Šio tyrimo metu buvo pastebėta, kad vimentino ir CXCR4 genai reguliuoja ląstelių metastazavimą. Tuo tarpu mikroRNR-193a-5p mimiko transfekcija gali sumažinti šių genų mRNR lygį ir sėkmingai sumažinti vėžio ląstelių metastazavimą [2].
Toksikologiniai tyrimai: HT-29 ląstelių linija plačiai naudojama toksikologiniuose tyrimuose. Šios storosios žarnos karcinomos ląstelės naudojamos įvairių vaistų kandidatų toksiškumui įvertinti, taikant skirtingus tyrimus. Pavyzdžiui, viename tyrime buvo tiriamas augalo Syzygium cumini etanolinio ekstrakto toksiškumo potencialas HT-29 ląstelių linijoje. Rezultatai parodė žymų HT-29 ląstelių augimo slopinimą, o tai rodo daug žadančias ekstrakto priešvėžines savybes [3].
Mikrobiologija: HT-29 gali būti naudojama kaip šeimininkės ląstelių sistema, siekiant tirti potencialių mikrobų, t. y. bakterijų ir virusų, patogenezę. Mokslininkai gali užkrėsti HT-29 ląsteles mikroorganizmais, kad ištirtų jų virulentiškumą ir šeimininko reakciją. Viename tokiame tyrime HT-29 ląstelės buvo naudojamos pieno rūgšties bakterijų probiotinėms savybėms tirti [4]. Kitame tyrime HT-29 ląstelės buvo naudojamos bakteriofagų terapijos veiksmingumui ir saugumui įvertinti [5].
5. Moksliniai straipsniai apie HT-29 ląsteles
Šiame skyriuje bus aptarti keli svarbūs leidiniai apie HT-29 ląsteles, kurie padės jums parengti savo tyrimą.
Šiame tyrime Syzygium cumini etanolinis ekstraktas buvo pasiūlytas kaip potencialus priešvėžinis agentas prieš storosios žarnos vėžio ląstelių liniją HT-29. Ekstraktas žymiai slopino vėžio ląstelių augimą.
Šiame leidinyje „Bioscience Reports“ buvo tiriamas junginio tetrandrino priešvėžinis aktyvumas HT-29 ląstelėse. Rezultatai parodė, kad tetrandrinas slopina vėžio ląstelių proliferaciją ir augimą reguliuodamas ląstelių signalizacijos takus.
Šiame tyrime buvo iškelta hipotezė, kad miRNA-193a-5p gali reguliuoti HT-29 ląstelių metastazavimą, reguliuodamas su metastazavimu susijusius genus.
Šis straipsnis paskelbtas žurnale „Nature Scientific Reports“ 2018 m. Šiame tyrime HT-29 navikų formuojanti ląstelių linija buvo panaudota kaip žarnyno ląstelių modelis, siekiant įvertinti siūlomo bakteriofagų gydymo veiksmingumą.
Šiame tyrime mokslininkai naudojo HT-29 ląsteles, kad ištirtų pieno rūgšties bakterijų probiotines savybes. Įdomu tai, kad tyrimas parodė, jog laktobacilės neleidžia patogeninėms bakterijoms prisijungti prie storosios žarnos ląstelių.
HT-29 ląstelės Ištekliai: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
Šiame skyriuje bus aptarti kai kurie internete prieinami ištekliai apie HT-29 ląsteles, kurie padės susipažinti su jų priežiūros, kultivavimo ir transfekcijos protokolais.
Ląstelių kultivavimo protokolai
Šie ištekliai padės jums susipažinti su HT-29 ląstelių subkultūravimu.
- HT-29 ląstelių kultivavimas: Ši nuoroda suteiks pagrindinių žinių apie auginimo terpę, atšildymą ir HT-29 ląstelių subkultūravimą.
- HT-29 kultūrų priežiūra: šiame straipsnyje pateikiama visa naudinga informacija apie HT-29 ląstelių kultivavimą ir priežiūrą.
Transfekcijos protokolai
HT-29 ląstelių linija pasižymi puikiu transfekcijos efektyvumu ir dažnai naudojama genų ekspresijos tyrimuose. Šiuose šaltiniuose aprašomi galimi šių ląstelių transfekcijos protokolai.
- HT-29 transfekcija: Šioje interneto svetainėje pateikiamas išsamus HT-29 ląstelių transfekcijos protokolas.
- HT-29 ląstelių linijos transfekcija: Šiame dokumente aprašomas HT-29 ląstelių linijos transfekcijos su plazmidine DNR protokolas.
Vaizdo įrašai, susiję su HT-29 ląstelių linija
Čia pateikiami keli vaizdo įrašai apie šios tumorigeninės ląstelių linijos kultivavimą ir priežiūrą.
- Ląstelių perėjimas: Šiame vaizdo įraše parodomas adhezyvinių ląstelių linijų perėjimo protokolas.
- HT-29 ląstelių transfekcija: Šis vaizdo įrašas supažindins jus su HT-29 ląstelių transfekcijos metodu.
Tikimės, kad šio straipsnio informacija bus vertinga ir pakankama, kad galėtumėte tvarkyti ir prižiūrėti HT-29 ląstelių liniją. Jei ketinate savo tyrime naudoti HT-29 ląsteles, užsisakykite jas pas mus.
Nuorodos
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles ir I. Recio, HT29 ląstelių linija. Maisto bioaktyvių medžiagų poveikis sveikatai: in vitro ir ex vivo modeliai, 2015: p. 113–124.
- Shirafkan, N. ir kt., mikroRNR-193a-5p slopina žmogaus HT-29 storosios žarnos vėžio ląstelių migraciją, slopindamas metastazių kelią. Ląstelių biochemijos žurnalas, 2019. 120(5): p. 8775–8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean ir R. Safaralizadeh, Syzygium cumini etanolinio ekstrakto priešvėžinio poveikio HT-29 storosios žarnos ląstelių linijai vertinimas. Virškinimo trakto vėžio žurnalas, 2021. 52: p. 575–581.
- Fonseca, H.C. ir kt., Laktobacilų probiotinės savybės ir jų gebėjimas slopinti enteropatogeninių bakterijų adheziją prie Caco-2 ir HT-29 ląstelių. Probiotikai ir antimikrobiniai baltymai, 2021. 13: p. 102–112.
- Shan, J. ir kt., Bakteriofagai yra labiau virulentiški bakterijoms, turinčioms žmogaus ląstelių, nei bakterijų kultūroje; įžvalgos iš HT-29 ląstelių. Moksliniai pranešimai, 2018. 8(1): p. 5091.
