Eiti į pagrindinį puslapį

HT-29 ląstelių linija

HT-29 yra žmogaus storosios žarnos vėžio ląstelių linija, turinti platų vėžio ir toksikologinių tyrimų pritaikymą. Pavyzdžiui, šios ląstelės yra jautrios standartiniams chemoterapiniams storosios žarnos vėžio gydymo metodams. Be to, HT-29 ląstelių linija yra gerai apibūdintas in vitro modelis, skirtas tirti žarnyno epitelio reakciją į bakterinę infekciją. HT-29 ląstelės imituoja subrendusių žarnyno ląstelių, t. y. enterocitų, savybes, todėl tinka prisijungimo ir mechanizmo tyrimams.

📋 HT-29 ląstelių linija — trumpi faktai
Auginimo terpė
Žiūrėti produkto puslapį
Padvigubėjimo laikas
Žiūrėti produkto puslapį
Augimo tipas
Adhezinis
Biologinio saugumo lygis
BSL-1

HT-29 ląstelės: kilmė ir bendroji informacija

Prieš naudodami bet kokią ląstelių liniją, turėtumėte žinoti apie jos bendras charakteristikas ir kilmę. Šiame skyriuje sužinosite: Kas yra HT-29 ląstelės? Ar HT-29 yra storosios žarnos vėžio ląstelių linija? Kokia yra HT-29 ląstelių morfologija?

Kas yra HT-29 ląstelių linija? HT-29 yra storosios žarnos adenokarcinomos ląstelių linija, 1964 m. sukurta Trempe ir Fogh. Ląstelės iš pradžių buvo gautos iš pirminio naviko, nustatyto 44 metų amžiaus kaukazietės moteriai, sergančiai kolorektaline adenokarcinoma [1]. Nuo sukūrimo ši ląstelių linija naudojama vėžio biologijos tyrimams.

HT-29 ląstelių morfologija: HT-29 ląstelių linija paprastai turi epitelio tipo morfologiją. Diferencijuotos ląstelės auga monosluoksniuose, sudaro tvirtas ląstelių jungtis ir turi apikalinį šepetėlinį kraštą. Jei šios ląstelės auginamos gliukozės trūkumo terpėje arba joms suteikiami induktoriai, tokie kaip butiratas ar rūgštis, jos rodo enterocitams būdingas savybes.

Ląstelių dydis: HT-29 storosios žarnos vėžio ląstelių linijos skersmuo yra 11 μm.

Genomas ir ploidiškumas: HT-29 ląstelių linijos modalusis chromosomų skaičius yra 71. Jis gali svyruoti nuo 68 iki 72. Be to, HT-29 ląstelių supaprastintas chromosomų skaičius yra hipertriploidinis, o 2S komponentas pasitaiko 2,4 % dažniu.

Kas yra HT29 MTX? HT29 MTX yra metotreksatui atspari ląstelių linija, izoliuota iš originalios HT-29 žmogaus storosios žarnos vėžio ląstelių linijos, pritaikant ją prie 10 µM metotreksato. Šios ląstelės pasižymi gleivių išskiriančių subrendusių taurinių ląstelių savybėmis.

Kolorektalinio vėžio ląstelių dalijimasis ir judėjimas mikroskopu.

Informacija apie HT-29 ląstelių linijos kultūrą

Žinant pagrindinius ląstelių linijos kultivavimo reikalavimus, darbas su ja tampa lengvesnis. Turėtumėte žinoti: koks yra HT-29 ląstelių linijos dvigubėjimo laikas? Koks yra HT-29 ląstelių sėjimo tankis? Kokios terpės tinka HT-29 ląstelėms?

Padvigubėjimo laikas

Vidutinis HT-29 ląstelių linijos dvigubėjimo laikas yra 24 valandos.

Adhezinės/suspensinės

HT-29 yra adhezyvinė ląstelių linija. 

Sėjimo tankis

Rekomenduojamas HT-29 ląstelių sėjimo tankis yra 3 x 104 ląstelės/cm2. Išaugintos ląstelės nuplaunamos 1X PBS ir atskiriamos po 8–10 minučių inkubacijos su „Accutase“. Įpilama šviežio terpės ir ląstelės centrifuguojamos. Ląstelių nuosėdos resuspenduojamos, o ląstelės išpilamos į naujus kolbelius rekomenduojamu ląstelių tankumu.

Auginimo terpė

HT-29 ląstelių optimaliam auginimui naudojama Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) terpė, papildyta 2,5 mM L-glutaminu ir 10 % FBS. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.

Auginimo sąlygos

HT-29 ląstelėms augti reikalingas drėgnas inkubatorius, kurio temperatūra yra 37 °C, o CO2 koncentracija – 5 %.

Laikymas

Šios ląstelės laikomos skysto azoto garų fazėje, esant žemesnei nei -195 °C temperatūrai.  

 

Šaldymo terpė ir procesas

HT-29 ląstelių linijai naudojama užšaldymo terpė yra CM-1 arba CM-ACF. Ląstelės užšaldomos taikant lėto užšaldymo procesą, kurio metu temperatūra nukrinta 1 °C ir efektyviai apsaugomas ląstelių gyvybingumas.

Atšildymo procesas

Užšaldytos HT-29 ląstelės atšildomos vandens vonioje, nustatant 37 °C temperatūrą. Šias ląsteles galima resuspenduoti ir tiesiogiai perpilti į kolbą su šviežia auginimo terpe. Priešingai, atšildytos ląstelės gali būti centrifuguojamos, siekiant pašalinti šaldymo terpės elementus, resuspenduojamos šviežioje terpėje ir kultivuojamos kolbose.

Biologinio saugumo lygis

HT-29 ląstelių linijai tvarkyti ir išlaikyti taikomas 1 biologinio saugumo lygis.

Ht 29 cells

HT-29 ląstelės, padidintos 10 ir 20 kartų.

HT-29 ląstelės: privalumai ir trūkumai

Kiekviena ląstelių linija turi savitų privalumų ir trūkumų, kurie ją išskiria iš kitų ląstelių linijų. Šiame skyriuje aptariami pagrindiniai HT-29 ląstelių privalumai ir trūkumai.

Privalumai

Pagrindiniai HT-29 ląstelių privalumai yra šie:

  • Lengva auginti

    HT-29 ląstelių linija yra lengvai tvarkoma ir prižiūrima, jos auginimui nereikalingi sudėtingi reikalavimai. Ji plačiai auginama mokslinių tyrimų laboratorijose.

  • Žarnyno ląstelių in vitro modelis

    HT-29 ląstelės tam tikromis auginimo sąlygomis gali diferencijuotis į subrendusias žarnyno ląsteles (enterocitus ir gleives gaminančias ląsteles). Jos naudojamos kaip ląstelinis modelis maisto virškinimui ir biologiniam prieinamumui tirti.

  • Didelis transfekcijos efektyvumas

    HT-29 storosios žarnos vėžio ląstelės pasižymi aukštu transfekcijos efektyvumu, todėl jos tinka genų ekspresijos ir reguliacijos tyrimams. Naudojant įvairius metodus galima atlikti tiek laikinos, tiek stabilios transfekcijos eksperimentus.

  • Jautrumas vaistams

    HT-29 ląstelės yra jautrios chemoterapiniams vaistams, pvz., fluorouracilui ir oksaliplatinui, kurie dažniausiai naudojami storosios žarnos vėžio gydymui. Jos naudojamos vaistų atsparumo tyrimams ir potencialių vaistų, skirtų kolorektalinės karcinomos gydymui, atrankai.

Apribojimai

  • Heterogeniškumas

    HT-29 ląstelės, kaip ir kitos vėžio ląstelių linijos, pasižymi heterogeniškumu ir gali nesudaryti vienalytės ląstelių populiacijos. Tai gali turėti įtakos tam tikrų tyrimų rezultatų atkuriamumui ir lemti nedidelius eksperimentų rezultatų skirtumus.

  • Ribotas diferencijavimas

    HT-29 ląstelės turi ribotą diferenciacijos potencialą. Jos nevisiškai diferencijuojasi į žarnyno ar storosios žarnos ląsteles, o pasižymi tik keliais būdingais bruožais. Šis apribojimas gali riboti jų naudojimą sudėtingesnių biologinių procesų tyrimams.

HT-29 ląstelės: pritaikymas

HT-29 ląstelių linija yra plačiai kultivuojama mokslinių tyrimų laboratorijose dėl jos plačios taikymo srities. Šiame skyriuje bus aptariami tik keli svarbūs HT-29 ląstelių taikymo atvejai.

Vėžio tyrimai: HT-29 yra storosios žarnos adenokarcinomos ląstelių linija, todėl ji naudojama vėžio progresavimo, vystymosi ir pagrindinių molekulinės mechanizmų tyrimams. 2018 m. atliktame tyrime HT-29 ląstelių linija buvo naudojama metastazių atsakingų ląstelių molekulių tyrimams. Šio tyrimo metu buvo pastebėta, kad vimentino ir CXCR4 genai reguliuoja ląstelių metastazavimą. Tuo tarpu mikroRNR-193a-5p mimiko transfekcija gali sumažinti šių genų mRNR lygį ir sėkmingai sumažinti vėžio ląstelių metastazavimą [2].

Toksikologiniai tyrimai: HT-29 ląstelių linija plačiai naudojama toksikologiniuose tyrimuose. Šios storosios žarnos karcinomos ląstelės naudojamos įvairių vaistų kandidatų toksiškumui įvertinti, taikant skirtingus tyrimus. Pavyzdžiui, viename tyrime buvo tiriamas augalo Syzygium cumini etanolinio ekstrakto toksiškumo potencialas HT-29 ląstelių linijoje. Rezultatai parodė žymų HT-29 ląstelių augimo slopinimą, o tai rodo daug žadančias ekstrakto priešvėžines savybes [3].

Mikrobiologija: HT-29 gali būti naudojama kaip šeimininkės ląstelių sistema, siekiant tirti potencialių mikrobų, t. y. bakterijų ir virusų, patogenezę. Mokslininkai gali užkrėsti HT-29 ląsteles mikroorganizmais, kad ištirtų jų virulentiškumą ir šeimininko reakciją. Viename tokiame tyrime HT-29 ląstelės buvo naudojamos pieno rūgšties bakterijų probiotinėms savybėms tirti [4]. Kitame tyrime HT-29 ląstelės buvo naudojamos bakteriofagų terapijos veiksmingumui ir saugumui įvertinti [5].

5. Moksliniai straipsniai apie HT-29 ląsteles

Šiame skyriuje bus aptarti keli svarbūs leidiniai apie HT-29 ląsteles, kurie padės jums parengti savo tyrimą.

Syzygium cumini etanolinio ekstrakto priešvėžinio poveikio HT-29 storosios žarnos ląstelių linijai vertinimas

Šiame tyrime Syzygium cumini etanolinis ekstraktas buvo pasiūlytas kaip potencialus priešvėžinis agentas prieš storosios žarnos vėžio ląstelių liniją HT-29. Ekstraktas žymiai slopino vėžio ląstelių augimą.

Tetrandrinas slopina storosios žarnos karcinomos HT-29 ląstelių augimą per Bcl-2/Caspase 3/PARP kelią ir G1/S fazę

Šiame leidinyje „Bioscience Reports“ buvo tiriamas junginio tetrandrino priešvėžinis aktyvumas HT-29 ląstelėse. Rezultatai parodė, kad tetrandrinas slopina vėžio ląstelių proliferaciją ir augimą reguliuodamas ląstelių signalizacijos takus.

mikroRNR-193a-5p slopina žmogaus HT-29 storosios žarnos vėžio ląstelių migraciją, slopindamas metastazių kelią

Šiame tyrime buvo iškelta hipotezė, kad miRNA-193a-5p gali reguliuoti HT-29 ląstelių metastazavimą, reguliuodamas su metastazavimu susijusius genus.

Bakteriofagai yra labiau virulentiški bakterijoms, turinčioms žmogaus ląstelių, nei bakterijų kultūroje; įžvalgos iš HT-29 ląstelių

Šis straipsnis paskelbtas žurnale „Nature Scientific Reports“ 2018 m. Šiame tyrime HT-29 navikų formuojanti ląstelių linija buvo panaudota kaip žarnyno ląstelių modelis, siekiant įvertinti siūlomo bakteriofagų gydymo veiksmingumą.

Laktobacilų probiotinės savybės ir jų gebėjimas slopinti enteropatogeninių bakterijų adheziją prie Caco-2 ir HT-29 ląstelių

Šiame tyrime mokslininkai naudojo HT-29 ląsteles, kad ištirtų pieno rūgšties bakterijų probiotines savybes. Įdomu tai, kad tyrimas parodė, jog laktobacilės neleidžia patogeninėms bakterijoms prisijungti prie storosios žarnos ląstelių.

HT-29 ląstelės Ištekliai: protokolai, vaizdo įrašai ir kita

Šiame skyriuje bus aptarti kai kurie internete prieinami ištekliai apie HT-29 ląsteles, kurie padės susipažinti su jų priežiūros, kultivavimo ir transfekcijos protokolais.

Ląstelių kultivavimo protokolai

Šie ištekliai padės jums susipažinti su HT-29 ląstelių subkultūravimu.

Transfekcijos protokolai

HT-29 ląstelių linija pasižymi puikiu transfekcijos efektyvumu ir dažnai naudojama genų ekspresijos tyrimuose. Šiuose šaltiniuose aprašomi galimi šių ląstelių transfekcijos protokolai.

Vaizdo įrašai, susiję su HT-29 ląstelių linija

Čia pateikiami keli vaizdo įrašai apie šios tumorigeninės ląstelių linijos kultivavimą ir priežiūrą.

Tikimės, kad šio straipsnio informacija bus vertinga ir pakankama, kad galėtumėte tvarkyti ir prižiūrėti HT-29 ląstelių liniją. Jei ketinate savo tyrime naudoti HT-29 ląsteles, užsisakykite jas pas mus.

Nuorodos

  1. Martínez-Maqueda, D., B. Miralles ir I. Recio, HT29 ląstelių linija. Maisto bioaktyvių medžiagų poveikis sveikatai: in vitro ir ex vivo modeliai, 2015: p. 113–124.
  2. Shirafkan, N. ir kt., mikroRNR-193a-5p slopina žmogaus HT-29 storosios žarnos vėžio ląstelių migraciją, slopindamas metastazių kelią. Ląstelių biochemijos žurnalas, 2019. 120(5): p. 8775–8783.
  3. Khodavirdipour, A., R. Zarean ir R. Safaralizadeh, Syzygium cumini etanolinio ekstrakto priešvėžinio poveikio HT-29 storosios žarnos ląstelių linijai vertinimas. Virškinimo trakto vėžio žurnalas, 2021. 52: p. 575–581.
  4. Fonseca, H.C. ir kt., Laktobacilų probiotinės savybės ir jų gebėjimas slopinti enteropatogeninių bakterijų adheziją prie Caco-2 ir HT-29 ląstelių. Probiotikai ir antimikrobiniai baltymai, 2021. 13: p. 102–112.
  5. Shan, J. ir kt., Bakteriofagai yra labiau virulentiški bakterijoms, turinčioms žmogaus ląstelių, nei bakterijų kultūroje; įžvalgos iš HT-29 ląstelių. Moksliniai pranešimai, 2018. 8(1): p. 5091.

 

Nustatėme, kad esate kitoje šalyje arba naudojate kitą naršyklės kalbą nei šiuo metu pasirinkta. Ar norite priimti siūlomus nustatymus?

Uždaryti