HT-29 ląstelių linija

HT-29 yra žmogaus storosios žarnos vėžio ląstelių linija, plačiai taikoma vėžio ir toksikologijos tyrimams. Pavyzdžiui, šios ląstelės yra jautrios standartiniam chemoterapiniam gydymui nuo storosios žarnos vėžio. Be to, HT-29 ląstelių linija yra gerai apibūdintas in vitro modelis žarnyno epitelio reakcijai į bakterinę infekciją tirti. HT-29 ląstelės imituoja subrendusių žarnyno ląstelių, t. y. enterocitų, savybes, todėl tinka prijungimo ir mechanistiniams tyrimams.

Šiame straipsnyje aptariami visi HT-29 ląstelių linijos aspektai, kuriuos reikia žinoti prieš pradedant su ja dirbti. Daugiausia bus aptarta:

HT-29 ląstelės: Kilmė ir bendra informacija
Informacija apie HT-29 ląstelių linijos ląstelių kultūrą
HT-29 ląstelės: Privalumai ir trūkumai
HT-29 ląstelės: Taikymo sritys
Moksliniai leidiniai apie HT-29 ląsteles
HT-29 ląstelės Šaltiniai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt

1. HT-29 ląstelės: Kilmė ir bendra informacija

Prieš naudodami bet kokią ląstelių liniją, turėtumėte žinoti apie bendrąsias jos savybes ir kilmę. Šis skyrius padės jums sužinoti: Kas yra HT-29 ląstelės? Ar HT-29 yra storosios žarnos vėžio ląstelių linija? Kokia HT-29 ląstelių morfologija?

Kas yra HT-29 ląstelių linija? HT-29 yra storosios žarnos adenokarcinomos ląstelių linija, kurią 1964 m. sukūrė Trempe ir Fogh. Iš pradžių ląstelės buvo gautos iš pirminio kolorektaline adenokarcinoma sirgusios 44 metų amžiaus kaukazietės pirminio naviko [1]. Nuo pat jos sukūrimo ši ląstelių linija buvo naudojama vėžio biologijai tirti.

HT-29 ląstelių morfologija: HT-29 ląstelių linijos morfologija paprastai panaši į epitelio. Diferencijuotos ląstelės auga monosluoksniais, sudaro glaudžias ląstelių jungtis ir turi viršūninę šepetėlio ribą. Jei šios ląstelės auginamos terpėje, kurioje trūksta gliukozės, arba joms duodama induktorių, tokių kaip butiratas ar rūgštis, jos įgauna į enterocidus panašių bruožų.

Ląstelių dydis: HT-29 storosios žarnos vėžio ląstelių linijos skersmuo yra 11 μm.

Genomas ir ploidija: HT-29 ląstelių linijos modalinis chromosomų skaičius yra 71. Jis gali svyruoti nuo 68 iki 72. Be to, supaprastintas HT-29 ląstelių chromosomų skaičius yra hipertriploidinis, o 2S komponentas pasitaiko 2,4 %.

Kas yra HT29 MTX? HT29 MTX yra metotreksatui atspari ląstelių linija, išskirta iš originalios HT-29 žmogaus storosios žarnos vėžio ląstelių linijos, pritaikius ją 10 µM metotreksatui. Šios ląstelės pasižymi gleives išskiriančių subrendusių taurelių ląstelių savybėmis.

Storosios žarnos vėžio ląstelių dalijimasis ir judėjimas mikroskopu.

2. Informacija apie HT-29 ląstelių linijos ląstelių kultūrą

Žinodami pagrindinius ląstelių linijos auginimo reikalavimus, galėsite lengviau dirbti su ja. Turėtumėte žinoti: koks yra HT-29 ląstelių linijos padvigubėjimo laikas? Koks yra HT-29 ląstelių sėjos tankis? Kokią terpę naudoti HT-29 ląstelėms?

Padvigubėjimo laikas	HT-29 ląstelių linijos vidutinė padvigubėjimo trukmė yra 24 valandos.
Adhezija / suspensija	HT-29 yra adherentinė ląstelių linija.
Sėjimo tankis	Rekomenduojamas HT-29 ląstelių sėjos tankis yra 3 x¹⁰⁴ ^{ląstelės/cm2}. Išaugintos ląstelės plaunamos 1 X PBS ir atskyrimas atliekamas 8-10 min. inkubavus su "Accutase". Įpilama šviežios terpės ir ląstelės centrifuguojamos. Ląstelių granulės resuspenduojamos ir ląstelės paskirstomos į naujas kolbas rekomenduojamu ląstelių tankiu.
Auginimo terpė	Optimaliam HT-29 ląstelių auginimui naudojama Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM), papildyta 2,5 mM L-glutaminu ir 10 % FBS. Terpė turėtų būti keičiama 2-3 kartus per savaitę.
Augimo sąlygos	HT-29 ląstelėms augti reikia humifikuoto inkubatoriaus, kuriame vyrauja 37 °C temperatūra ir 5 %_CO2.
Laikymas	Šios ląstelės laikomos skysto azoto garų fazėje žemesnėje nei -195 °C temperatūroje.
Šaldymo terpė ir procesas	HT-29 ląstelių linijai naudojama šaldymo terpė yra CM-1 arba CM-ACF. Ląstelės užšaldomos lėto užšaldymo būdu, dėl kurio temperatūra sumažėja 1 °C ir veiksmingai apsaugomas ląstelių gyvybingumas.
Atšildymo procesas	Užšaldytos HT-29 ląstelės atšildomos 37 °C temperatūros vandens vonelėje. Šias ląsteles galima resuspenduoti ir tiesiogiai išpilstyti į šviežios augimo terpės kolbą. Priešingai, atšildytas ląsteles galima centrifuguoti, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės elementai, resuspenduoti šviežioje terpėje ir auginti kolbose.
Biologinės saugos lygis	Dirbant su HT-29 ląstelių linija ir ją prižiūrint taikomas 1 biologinės saugos lygis.

HT-29 ląstelės 10x ir 20x didinimo sąlygomis.

3. HT-29 ląstelės: Privalumai ir trūkumai

Kiekviena ląstelių linija turi unikalių privalumų ir trūkumų, kurie ją išskiria iš kitų ląstelių linijų. Šiame skyriuje bus aptarti pagrindiniai HT-29 ląstelių privalumai ir apribojimai.

Privalumai

Pagrindiniai HT-29 ląstelių privalumai yra šie:

Lengva auginti
HT-29 ląstelių liniją lengva tvarkyti ir prižiūrėti, jai netaikomi sudėtingi kultivavimo reikalavimai. Ji plačiai kultivuojama mokslinių tyrimų laboratorijose.
In vitro žarnyno ląstelių modelis
HT-29 ląstelės gali diferencijuotis į subrendusias žarnyno ląsteles (enterocitus ir gleives gaminančias ląsteles), esant tam tikroms auginimo sąlygoms. Jos naudojamos kaip ląstelių modelis maisto virškinimui ir biologiniam prieinamumui tirti.
Didelis transfekcijos efektyvumas
HT-29 storosios žarnos vėžio ląstelės pasižymi dideliu transfekcijos efektyvumu, todėl tinka genų raiškos ir reguliavimo tyrimams. Įvairiais metodais galima atlikti tiek pereinamojo, tiek stabilaus transfekcijos eksperimentus.
Jautrumas vaistams
HT-29 ląstelės yra jautrios chemoterapiniams vaistams, tokiems kaip fluorouracilas ir oksaliplatina, kurie dažniausiai naudojami gydant storosios žarnos vėžį. Jos naudojamos atsparumui vaistams tirti ir potencialiems gydomiesiems vaistams, skirtiems storosios žarnos karcinomai gydyti, atrinkti.

Apribojimai

Heterogeniškumas
HT-29 ląstelės, kaip ir kitos vėžio ląstelių linijos, pasižymi heterogeniškumu ir gali nesudaryti vienodos ląstelių populiacijos. Tai gali turėti įtakos tam tikrų tyrimų rezultatų atkuriamumui ir lemti nedidelius eksperimentų rezultatų skirtumus.
Ribota diferenciacija
HT-29 ląstelės turi ribotą diferenciacijos potencialą. Jos ne visiškai diferencijuojasi į žarnyno ar gaubtinės žarnos ląsteles, bet pasižymi tik keletu būdingų bruožų. Šis apribojimas gali riboti jų naudojimą sudėtingesniems biologiniams procesams tirti.

4. hT-29 ląstelės: Taikymo sritys

HT-29 ląstelių linija plačiai kultivuojama mokslinių tyrimų laboratorijose dėl jos plataus pritaikymo spektro. Šiame skyriuje bus aptarti tik keli svarbūs HT-29 ląstelių panaudojimo būdai.

Vėžio tyrimai: HT-29 yra storosios žarnos adenokarcinomos ląstelių linija, todėl ji naudojama vėžio progresavimui, vystymuisi ir pagrindiniams molekuliniams mechanizmams tirti. 2018 m. atliktame tyrime HT-29 ląstelių linija naudota tiriant ląstelių molekules, atsakingas už metastazes. Šio tyrimo metu pastebėta, kad vimentino ir CXCR4 genai reguliuoja ląstelių metastazavimą. O transfekcija mikroRNA-193a-5p imitatoriumi gali sumažinti šių genų mRNA kiekį ir sėkmingai sumažinti vėžio ląstelių metastazavimą [2].

Toksikologiniai tyrimai: HT-29 ląstelių linija plačiai naudojama toksikologiniuose tyrimuose. Šios storosios žarnos vėžio karcinomos ląstelės naudojamos įvairių kandidatų į vaistus toksiškumui vertinti taikant įvairius tyrimus. Pavyzdžiui, tyrime buvo tiriamas augalo Syzygium cumini etanolinio ekstrakto toksiškumo potencialas HT-29 ląstelių linijai. Gauti rezultatai parodė, kad HT-29 ląstelių augimas gerokai slopinamas, o tai rodo perspektyvias ekstrakto priešvėžines savybes [3].

Mikrobiologija: HT-29 gali būti naudojama kaip ląstelių šeimininkių sistema tiriant galimų mikrobų, t. y. bakterijų ir virusų, patogenezę. Mokslininkai gali užkrėsti HT-29 ląsteles mikrobais ir ištirti jų virulentiškumą bei šeimininko atsaką. Tokiame tyrime HT-29 ląstelės buvo naudojamos pieno rūgšties bakterijų probiotinėms savybėms tirti [4]. Kitame tyrime HT-29 ląstelės naudotos siekiant įvertinti gydymo bakteriofagais veiksmingumą ir saugumą [5].

430,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 300215

5. Mokslinės publikacijos apie HT-29 ląsteles

Šiame skirsnyje rasite keletą svarbių publikacijų apie HT-29 ląsteles, kurios padės jums parengti mokslinį tyrimą.

Syzygium cumini etanolinio ekstrakto priešvėžinio poveikio HT-29 storosios žarnos ląstelių linijai vertinimas

Šiame tyrime Syzygium cumini etanolinis ekstraktas pasiūlytas kaip potenciali priešvėžinė priemonė prieš storosios žarnos vėžio ląstelių liniją HT-29. Ekstraktas reikšmingai slopino vėžinių ląstelių augimą.

Tetrandrinas slopina storosios žarnos karcinomos HT-29 ląstelių augimą per Bcl-2/Caspaza 3/PARP kelią ir G1/S fazę

Šioje publikacijoje žurnale "Bioscience Reports" buvo tiriamas junginio tetradrino priešvėžinis aktyvumas HT-29 ląstelėms. Rezultatai atskleidė, kad tetradrinas slopina vėžinių ląstelių proliferaciją ir augimą reguliuodamas ląstelių signalinius kelius.

mikroRNA-193a-5p slopina žmogaus HT-29 gaubtinės žarnos vėžio ląstelių migraciją, slopindama metastazavimo kelią

Šiame tyrime pasiūlyta, kad miRNA-193a-5p potencialiai gali reguliuoti HT-29 ląstelių metastazavimą reguliuodama su metastazavimu susijusius genus.

Bakteriofagai su žmogaus ląstelėmis yra virulentiškesni bakterijoms nei bakterijų kultūroje; įžvalgos iš HT-29 ląstelių

Šis straipsnis paskelbtas 2018 m. žurnale "Nature Scientific Reports". Šiame tyrime buvo naudojama HT-29 navikinių ląstelių linija kaip žarnyno ląstelių modelis, siekiant įvertinti siūlomo gydymo bakteriofagais veiksmingumą.

Probiotinės laktobacilų savybės ir jų gebėjimas slopinti enteropatogeninių bakterijų adheziją prie Caco-2 ir HT-29 ląstelių

Šiame tyrime mokslininkai naudojo HT-29 ląsteles, kad ištirtų pieno rūgšties bakterijų probiotinį aktyvumą. Įdomu tai, kad tyrimas parodė, jog laktobacilos bakterijos neleidžia patogeninėms bakterijoms sukibti su storosios žarnos ląstelėmis.

6. HT-29 ląstelės Ištekliai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt

Šiame skirsnyje aprašomi kai kurie internetiniai ištekliai apie HT-29 ląsteles, kurie padės sužinoti jų priežiūros, kultivavimo ir transfekcijos protokolus.

Ląstelių auginimo protokolai

Toliau pateikti ištekliai padės jums sužinoti apie HT-29 ląstelių subkultūravimą.

HT-29 ląstelių kultivavimas: Šioje nuorodoje rasite pagrindines žinias apie HT-29 ląstelių auginimo terpę, atšildymą ir subkultūrinimą.
HT-29 kultūrų palaikymas: Šiame straipsnyje pateikiama visa naudinga informacija apie HT-29 ląstelių kultivavimą ir priežiūrą.

Transfekcijos protokolai

HT-29 ląstelių linija pasižymi dideliu transfekcijos efektyvumu, todėl ji dažnai naudojama genų raiškos tyrimams. Toliau pateikiamuose šaltiniuose aprašomi galimi šių ląstelių transfekcijos protokolai.

HT-29 transfekcija: Šioje svetainės nuorodoje pateikiamas išsamus HT-29 ląstelių transfekcijos protokolas.
HT-29 ląstelių linijos transfekcija: Šiame dokumente aprašomas HT-29 ląstelių linijos transfekcijos plazmidine DNR protokolas.

Vaizdo įrašai, susiję su HT-29 ląstelių linija

Čia pateikiama keletas vaizdo įrašų apie šios navikinių ląstelių linijos kultivavimą ir priežiūrą.

Ląstelių perleidimas: Šiame vaizdo įraše pateikiamas adherentiškų ląstelių linijų ląstelių pasavimo protokolas.
HT-29 ląstelių transfekcija: Šiame vaizdo įraše pateikiama informacija apie HT-29 ląstelėms taikomą transfekcijos metodą.

Tikimės, kad šiame straipsnyje pateikta informacija yra vertinga ir pakankama, kad galėtumėte tvarkyti ir prižiūrėti HT-29 ląstelių liniją. Jei planuojate naudoti HT-29 ląsteles savo tyrime, užsisakykite iš mūsų.

Nuorodos

Martínez-Maqueda, D., B. Miralles ir I. Recio, HT29 ląstelių linija. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: p. 113-124.
Shirafkan, N., ir kt. mikroRNA-193a-5p slopina žmogaus HT-29 gaubtinės žarnos vėžio ląstelių migraciją slopinant metastazavimo kelią. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): p. 8775-8783.
Khodavirdipour, A., R. Zarean ir R. Safaralizadeh, Evaluation of the anti-cancer effect of Syzygium cumini ethanolic extract on HT-29 colorectal cell line. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
Fonseca, H.C., et al, Probiotinės laktobacilų savybės ir jų gebėjimas slopinti enteropatogeninių bakterijų adheziją prie Caco-2 ir HT-29 ląstelių. Probiotikai ir antimikrobiniai baltymai, 2021. 13: p. 102-112.
Shan, J., et al, Bakteriofagai su žmogaus ląstelėmis yra virulentiškesni nei bakterijų kultūroje; įžvalgos iš HT-29 ląstelių. Mokslinės ataskaitos, 2018. 8(1): p. 5091.