HL-60 ląstelės: pagrindiniai duomenys apie ūminės mieloidinės leukemijos tyrimus
HL-60 yra nemirtinga žmogaus leukemijos ląstelių linija. Ji plačiai naudojama vėžio biologijos tyrimams ir priešvėžinių vaistų veiksmingumo tyrimams. Be to, ji taip pat gali būti naudojama siekiant suprasti įvairius ląstelių ir molekulių mechanizmus, susijusius su leukeminių ląstelių proliferacija ir diferenciacija.
- Auginimo terpė
- Žiūrėti produkto puslapį
- Padvigubėjimo laikas
- Žiūrėti produkto puslapį
- Augimo tipas
- Adhezinis
- Biologinio saugumo lygis
- BSL-1
- Galima įsigyti
- Cytion — Užsakyti HL-60
- HL-60 ląstelių linija: kilmė ir bendroji informacija
- HL-60 ląstelių kultūros informacija
- HL-60 ląstelės: privalumai ir trūkumai
- HL-60 ląstelių linijos pritaikymas moksliniuose tyrimuose: nuo vėžio iki imunologijos ir dar daugiau
- HL-60 ląstelių linija jūsų tyrimams
- HL-60 ląstelės: mokslinių tyrimų publikacijos
- HL-60 ląstelių linijos ištekliai: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
- HL-60 ląstelių linija: svarbiausi DUK mokslininkams
- Nuorodos
- Dažnai užduodami klausimai
HL-60 ląstelių linija: kilmė ir bendroji informacija
HL-60 ląstelių linija yra svarbus modelis hematologiniuose tyrimuose, suteikiantis gilių įžvalgų apie ūminės promielocitinės leukemijos pobūdį ir gydymą. Šiame tinklaraščio įraše gilinamasi į HL-60 ląstelių linijos kilmę ir išskirtines savybes, atskleidžiant jos svarbų vaidmenį medicininiuose tyrimuose ir terapijos plėtroje.
HL-60 pirmą kartą buvo išskirta iš 36 metų amžiaus kaukazietės, kuriai buvo diagnozuota ūminė promielocitinė leukemija, leukeminių ląstelių. Šį novatorišką darbą atliko S.J. Collinsas ir jo komanda, o tai tapo reikšmingu proveržiu, nes HL-60 buvo pirmoji mieloidinės leukemijos ląstelių linija, sėkmingai izoliuota ir išauginta suspensijoje. Šis pasiekimas atvėrė daugybę tyrimų galimybių leukemijos ir kitų susijusių ligų srityje. Fizinių savybių atžvilgiu HL-60 ląstelės pasižymi limfoblastine morfologija ir yra žinomos kaip augančios suspensijoje, atrodančios apvalios formos. Šių ląstelių dydis skiriasi, o skersmuo svyruoja nuo 9 iki 25 μm, atspindėdamas jų heterogeniškumą. Genominio lygio požiūriu HL-60 ląstelių linija yra daugiausia pseudodiploidinė, o modalusis chromosomų skaičius yra 43. Įdomu tai, kad nedidelė ląstelių dalis (6,2 %) pasižymi 2S komponentu, o tai dar labiau sudėtingina jų genetinę sandarą [1].
Šių pagrindinių HL-60 ląstelių aspektų supratimas ne tik praplečia mūsų žinias apie leukemiją ląstelių lygiu, bet ir remia vykstančius mokslinius tyrimus, kuriais siekiama atrasti naujus gydymo būdus. Toliau aptarsime, kaip unikalios HL-60 ląstelių linijos savybės prisidėjo prie reikšmingų medicininių tyrimų pažangos.
Informacija apie HL-60 ląstelių kultūrą
HL-60 ląstelių kultivavimas yra paprastas ir lengvas. Šiame skyriuje susipažinsite su pagrindiniais dalykais, pvz., koks yra HL-60 ląstelių linijos dvigubėjimo laikas? Ar HL-60 yra adhezinė, ar suspensinė kultūra? Koks yra HL-60 ląstelių linijos sėjos tankis? Kokia terpė naudojama HL-60 auginimui?
Padvigubėjimo laikas:
HL-60 ląstelių dvigubėjimo laikas yra maždaug 36–48 valandos.
Adhezinė ar suspensinė:
HL-60 ląstelės auga suspensijos kultūrose.
Sėjimo tankis:
Šios ląstelės sėjamos 1 x 106 ląstelių/ml tankumu, kai atliekama subkultūra, ir 2 x 105 ląstelių/ml tankumu, kai pradedama nauja kultūra.
Auginimo terpė:
HL-60 ląstelėms auginti naudojama RPMI 1640 auginimo terpė, į kurią įpilama 10 % FBS ir 2,5 mM L-glutamino. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
Auginimo sąlygos:
HL-60 ląstelės auginamos drėgname inkubatoriuje 37 °C temperatūroje ir esant 5 % CO2 koncentracijai.
Laikymas:
HL-60 ląstelės laikomos žemesnėje nei -150 °C temperatūroje arba skysto azoto garų fazėje, kad išliktų kuo daugiau gyvybingų ląstelių.
Užšaldymo terpė ir procesas:
HL-60 ląstelių užšaldymui naudojamos CM-1 arba CM-ACF užšaldymo terpės. HL-60 ląstelių užšaldymui pirmenybė teikiama lėto užšaldymo metodui.
Atšildymo procesas:
Užšaldytas HL-60 ląstelių buteliukas greitai maišomas vandens vonioje, nustatytos 37 °C temperatūroje. Po to ląstelės centrifuguojamos, kad būtų pašalinta užšaldymo terpė. Įpilama naujos kultūrinės terpės, ląstelės resuspenduojamos ir perpilamos į kolbą augimui.
Biologinio saugumo lygis:
Dirbant su HL-60 kultūromis rekomenduojamas 1 biologinio saugumo lygis.
HL-60 ląstelės: privalumai ir trūkumai
Prieš pradėdami dirbti su bet kuria ląstelių linija, galbūt norėsite sužinoti apie jos privalumus ir trūkumus. Šioje straipsnio dalyje aptarsime keletą HL-60 ląstelių naudojimo privalumų ir trūkumų.
Privalumai
Keletas pagrindinių HL-60 ląstelių linijos privalumų:
- Universalumas: tinkamomis auginimo sąlygomis HL-60 ląstelės gali diferencijuotis į įvairius ląstelių tipus, įskaitant monocitus, makrofagus ir granuliocitus. Dėl to jos yra naudingos ląstelių diferenciacijai ir kitiems ląstelių procesams tirti.
- Lengva auginti: HL-60 ląsteles lengva auginti ir išlaikyti suspensijos kultūrose, todėl jos yra patogus įrankis įvairių ląstelių procesų tyrimams.
- Leukemijos in vitro modelis: šios ląstelės buvo gautos iš paciento, sergančio ūmia mieloidine leukemija, todėl turi genetines ir molekulinės savybes, panašias į šią ligą.
Trūkumai
HL-60 ląstelių linijos trūkumai yra šie:
- Ribotas diferenciacijos potencialas: HL-60 gali diferencijuotis į kai kurias mieloidines linijas reaguodamos į stimuliavimą, tačiau jų diferenciacijos potencialas yra ribotas, palyginti su pirminėmis ląstelėmis.
HL-60 ląstelių linijos pritaikymas moksliniuose tyrimuose: nuo vėžio iki imunologijos ir dar daugiau
HL-60 ląstelių linija, gauta iš paciento, sergančio ūmia promielocitine leukemija, tapo medicininių tyrimų pagrindu dėl savo universalumo ir lengvo auginimo. Šios lengvai prižiūrimos kultūros yra svarbios daugybėje mokslinių tyrimų sričių, todėl siekiame išnagrinėti kai kurias iš svarbiausių, įtraukdami platų tyrimų raktinių žodžių spektrą, kad pateiktume išsamų apžvalgą.
Vėžio tyrimai
Onkologijos srityje HL-60 ląstelių linija buvo labai svarbi atskleidžiant vėžio ląstelių signalizacijos subtilybes, gilinant mūsų supratimą apie onkogenų ekspresiją ir skatinant naujų terapinių tikslų atradimą. Ši ląstelių linija yra dalis leukemijos ląstelių linijų rinkinio, naudojamo naujų chemoterapinių vaistų atrankai. Vienas ryškus pavyzdys yra HL-60 ląstelių naudojimas siekiant nustatyti iš jūrinių organizmų ekstrahuotų junginių antileukemines savybes, atskleidžiant tiek antiproliferacinius, tiek proapoptozinius poveikius [2]. Be to, ši ląstelių linija palengvino pagrindinių signalizacijos kelių, pvz., JAK/STAT, ir jų įtakos leukeminių ląstelių proliferacijai tyrimą, taip pat bioaktyvių junginių, pvz., timokinono, terapinio potencialo vertinimą [3].
Imunologija
HL-60 ląstelės yra patikima in vitro sistema įvairiems imuniniams atsakams tirti, įskaitant sudėtingą chemotaksio procesą ir pagrindinių imuninių mediatorių ekspresijos reguliavimą. Šios ląstelės gali diferencijuotis į mieloidines ląsteles, panašias į makrofagus ir neutrofilus, ir taip tarnauja kaip universalus modelis uždegiminių kelių tyrimams. Pavyzdžiui, iš HL-60 gautos makrofagams panašios ląstelės buvo panaudotos Brassica genties fitocheminių medžiagų priešuždegiminiam potencialui tirti [4]. Kitoje studijoje HL-60 ląstelių diferenciacija į neutrofilams panašias ląsteles leido mokslininkams identifikuoti genus, kurie yra esminiai ląstelių diferenciacijai ir susijusioms imuninėms funkcijoms [5].
Vaistų atradimas
HL-60 mieloidinės diferenciacijos galimybės taip pat buvo panaudotos vaistų atradimuose, ypač identifikuojant kandidatus, kurie galėtų potencialiai moduliuoti diferenciacijos kelią, kuris yra lemiamas leukemijos gydyme. Tai iliustruoja tyrimai, kuriuose HL-60 ląstelių linija buvo naudojama natūralių produktų priešvėžinio potencialo vertinimui [6].
Be to, HL-60 ląstelių linija naudojama įvairiems mieloidinių ląstelių linijos biologijos aspektams tirti, pavyzdžiui, siekiant suprasti, kaip gydymas tokiais preparatais kaip retinoinė rūgštis gali sukelti monocitų diferenciaciją, arba kaip šios ląstelės imituoja pirminius neutrofilus, generuodamos ekstraląstelines gaudykles. Šio modelio naudojimas hematologinių piktybinių navikų molekulinės eigos išsiaiškinimui dar labiau išplečiamas jo pritaikymu mutacijų ląstelių panelio tyrimuose, ypač leukemijos p53 karštųjų taškų analizės kontekste.
Tiems, kurie tiria ląstelių mechaniką, HL-60 ląstelių dvigubėjimo laiką ir jų reakciją į elektroporaciją mikroskysčių kanaluose, ši ląstelių linija suteikia patikimą tyrimų platformą.
HL-60 ląstelių linija jūsų tyrimams
HL-60 ląstelės: Moksliniai straipsniai
Yra keletas mokslinių tyrimų apie HL-60 ląsteles. Čia pateikiame keletą žymesnių pavyzdžių:
Šiame moksliniame straipsnyje buvo pasiūlytas junginio Stigmast-5-en-3-ol priešvėžinis poveikis HL-60 leukemijos ląstelėms ir MCF7 krūties vėžio ląstelėms.
Šiame tyrime aprašomas JAK/STAT signalizacijos vaidmuo HL-60 ląstelių proliferacijoje. Be to, mokslininkai tiria timokinono junginio terapinį potencialą, naudodami šią leukemijos ląstelių liniją. Junginys slopina ląstelių proliferaciją ir indukuoja ląstelių mirtį, atgaivindamas JAK/STAT kaskados neigiamų reguliatorių ekspresiją.
Šiame tyrime buvo naudojamos HL-60 ląstelės, siekiant sukurti makrofagų tipo ląstelių modelį, skirtą Brassica augalų junginių priešuždegiminio aktyvumo tyrimui.
Šiame tyrime, paskelbtame žurnale „International Immunopharmacology“, naudojant dimetilsulfoksidą buvo sukurtas neutrofilų ląstelių imitatorius iš HL-60 ląstelių linijos. Tyrime pastebėta, kad ERK genas dalyvauja šių ląstelių diferenciacijoje.
Šiame moksliniame straipsnyje tiriamas augalinių polifenolinių junginių, t. y. gallio rūgšties ir elagino rūgšties, priešvėžinis potencialas vaistams jautrioms ir atsparioms HL-60 leukemijos ląstelėms.
HL-60 ląstelių linija Ištekliai: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
Internete galima rasti daugybę mokomųjų išteklių apie HL-60 ląstelių liniją. Šiame skyriuje bus aptarti keli ištekliai, aprašantys šios ląstelių linijos kultivavimą ir transfekciją.
Ląstelių kultivavimo protokolai
Ištekliai, aprašantys HL-60 ląstelių kultivavimo metodus, yra šie:
- HL-60 dauginimas: Šiame dokumente pateikiama informacija apie HL-60 ląstelių subkultūravimą.
- HL-60 ląstelių linija: šioje svetainėje pateikiama pagrindinė informacija apie HL-60 ląsteles ir protokolus, įskaitant ląstelių kultivavimą, užšaldymą ir atšildymą.
Transfekcijos protokolai
Čia pateikiami šaltiniai, aprašantys transfekcijos metodus, pasirinktus HL-60 ląstelėms.
- HL-60 ląstelių transfekcija: Šioje nuorodoje pateikta išsami HL-60 leukemijos ląstelių transfekcijos procedūra.
- HL-60 ląstelių laikina transfekcija: Šiame dokumente pateikiama naudinga informacija apie ląstelių liniją ir išsamus HL-60 ląstelių laikinos transfekcijos protokolas.
Vaizdo įrašai, susiję su HL-60 ląstelių linija
Vaizdo įrašų apie HL-60 ląsteles yra labai nedaug.
- HL-60 ląstelių perėjimas: Šiame vaizdo įraše paaiškinamas HL-60 ląstelių subkultivavimo protokolas.
Tikimės, kad šis straipsnis suteiks jums pagrindinę informaciją apie HL-60 ląstelių linijos kultivavimą ir išlaikymą. Be to, jis gali padėti jums geriau suprasti šių leukemijos ląstelių naudojimo moksliniuose tyrimuose privalumus. Jei planuojate naudoti šią ląstelių liniją, užsisakykite ją pas mus.
HL-60 ląstelių linija: svarbiausi klausimai ir atsakymai mokslininkams
HL-60 ląstelių linija yra promielocitinės leukemijos ląstelių linija, gauta iš paciento, sergančio ūmia promielocitine leukemija. Ši ląstelių linija plačiai naudojama moksliniuose tyrimuose, kuriuose tiriamas mieloidinių ląstelių diferenciacija ir onkogenų ekspresija.
Retinoinė rūgštis skatina HL-60 ląstelių linijos diferenciaciją, verčiant ląsteles bręsti į granuliocitams panašias ląsteles. Šis procesas yra itin svarbus tiriant mieloidinės diferenciacijos mechanizmus.
Serumas yra esminė kraujodaros ląstelių auginimo terpės sudedamoji dalis, teikianti būtinus augimo veiksnius ir maistines medžiagas, reikalingas HL-60 ląstelių dauginimuisi ir išlaikymui kultūroje.
Taip, HL-60 ląstelių linija gali vykdyti chemotaksį, t. y. ląstelių judėjimą reaguojant į cheminius dirgiklius. Dėl to jos yra naudingos atliekant chemotaksio tyrimus ir siekiant suprasti ląstelių migraciją.
HL60 ląstelių linija, kurioje pasireiškia onkogenų ekspresija, naudojama kaip modelinė sistema onkogenų ekspresijos reguliavimui ir jų vaidmeniui leukemogenezėje tirti.
HL-60 ląstelių linija yra nepakeičiama atliekant ląstelių biologijos tyrimus, ypač tiriant ląstelių ciklą, ląstelių diferenciacijos procesus ir molekulinius procesus, vedančius prie leukemijos.
Leukemijos ląstelių linijų rinkiniai leidžia atlikti įvairių leukemijos ląstelių linijų lyginamuosius tyrimus, įskaitant jų genetinę sudėtį, mutacijų profilius, reakciją į vaistus ir molekulinės leukemogenezės procesus, pavyzdžiui, MAPK signalinį kelią.
Analizės ir kilmės sertifikatus paprastai galima atsisiųsti arba paprašyti tiekėjo ar saugyklos, teikiančios HL-60 ląstelių liniją, taip užtikrinant, kad mokslininkai savo tyrimams gautų autentiškas ir be teršalų ląsteles.
HL-60 ląstelių linija gali būti diferencijuojama taip, kad įgytų savybių, panašių į pirminių neutrofilų, įskaitant gebėjimą formuoti ekstraląstelines gaudykles, todėl mokslininkai gali jas naudoti kaip pakaitinį modelį neutrofilų elgsenai ir funkcijoms tirti.
HL-60 ląstelės naudojamos kaip in vitro modelis ūminės promielocitinės leukemijos, mieloidinių ląstelių linijų biologijos bei įvairių junginių poveikio diferenciacijai ir proliferacijai tyrimams. Jos taip pat naudojamos eksperimentuose, kuriuose tiriamos ląstelių reakcijos, pavyzdžiui, chemotaksis, onkogenų ekspresija ir mutacijų įtaka ląstelių procesams.
Santrumpa „HL-60“ reiškia „Human Leukemia 60“ (žmogaus leukemija 60). Ji nurodo 60-ąją ląstelių liniją, kuri buvo sukurta iš leukemija sergančių pacientų tuo metu, kai ji buvo sukurta. Santrumpa „HL“ reiškia, kad ji susijusi su žmogaus leukemijos ląstelėmis.
Optimaliomis augimo sąlygomis HL-60 ląstelių dvigubėjimo laikas yra maždaug 36–48 valandos. Tačiau jis gali skirtis priklausomai nuo kultivavimo sąlygų ir ląstelių pasėlių skaičiaus.
Kai HL-60 ląstelės veikiama forbol-12-miristato-13-acetatu (PMA), jos paprastai diferencijuojasi į ląstelių tipą, panašų į makrofagus ar monocitus. Ši diferenciacija yra svarbi tiriant monocitų diferenciacijos kelius ir siekiant suprasti mieloidinių ląstelių diferenciacijos mechanizmus.
Literatūra
- Fleck, R., S. Romero-Steiner ir M. Nahm, „HL-60 ląstelių linijos naudojimas pneumokokinių antikūnų opsoninio pajėgumo matavimui“. Klinikinė ir vakcinų imunologija, 2005. 12(1): p. 19–27.
- Fernando, I.S. ir kt., Stigmast-5-en-3-olio iš Dendronephthya gigantea apoptozinis ir antiproliferacinis poveikis žmogaus leukemijos HL-60 ir žmogaus krūties vėžio MCF-7 ląstelėms. Toxicology in Vitro, 2018. 52: p. 297–305.
- Almajali, B., ir kt., Timokinonas slopina ląstelių proliferaciją ir stiprina HL60 leukemijos ląstelių apoptozę per JAK/STAT neigiamų reguliatorių reekspresiją. „Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP“, 2021. 22(3): p. 879.
- Ruiz-Alcaraz, A.J. ir kt., Brassica bioaktyvių junginių priešuždegiminio potencialo analizė žmogaus makrofagų tipo ląstelių modelyje, gautame iš HL-60 ląstelių. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: p. 112804.
- Wang, D., et al., ERK dalyvauja dimetilsulfoksidu indukuotų HL-60 neutrofilų tipo ląstelių, imituojančių uždegimines neutrofilų ląsteles, diferenciacijoje ir funkcionavime. International Immunopharmacology, 2020. 84: p. 106510.
- Núñez-Sánchez, M.Á. ir kt., Brassica kilmės biologiškai aktyvių junginių antileukeminis poveikis HL-60 mieloidinės leukemijos ląstelėse. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): p. 13400.