HL-60 ląstelės: Ūminės mieloidinės leukemijos tyrimų pagrindai

HL-60 yra nemirtinga žmogaus leukemijos ląstelių linija. Ji plačiai naudojama vėžio biologijai tirti ir vaistų nuo vėžio veiksmingumui tirti. Be to, ją taip pat galima naudoti siekiant suprasti įvairius ląstelinius ir molekulinius mechanizmus, susijusius su leukeminių ląstelių proliferacija ir diferenciacija.

HL-60 ląstelių linija: Kilmė ir bendroji informacija

HL-60 ląstelių linija yra labai svarbus hematologinių tyrimų modelis, leidžiantis giliai suprasti ūminės promielocitinės leukemijos prigimtį ir gydymą. Šiame tinklaraščio įraše nagrinėjama HL-60 ląstelių linijos kilmė ir išskirtiniai bruožai, atskleidžiant jos lemiamą vaidmenį medicininiuose tyrimuose ir gydymo metodų kūrime.

HL-60 pirmą kartą buvo sukurta iš 36 metų kaukazietės, kuriai buvo diagnozuota ūminė promielocitinė leukemija, leukeminių ląstelių. Šį novatorišką darbą atliko S. J. Collinsas ir jo komanda, ir tai buvo reikšmingas laimėjimas, nes HL-60 buvo pirmoji mieloidinės leukemijos ląstelių linija, kurią pavyko išskirti ir išauginti suspensijoje. Šis pasiekimas palengvino daugybę mokslinių tyrimų galimybių tiriant leukemiją ir kitas susijusias ligas. Kalbant apie fizines savybes, HL-60 ląstelės pasižymi limfoblastine morfologija ir yra žinomos kaip augančios suspensijoje, atrodančios apvalios formos. Šių ląstelių dydis skiriasi, jų skersmuo svyruoja nuo 9 iki 25 μm, o tai rodo jų heterogeniškumą. Pagal genomą HL-60 ląstelių linija yra daugiausia pseudodiploidinė, jos modalinis chromosomų skaičius yra 43. Įdomu tai, kad nedidelė dalis (6,2 %) ląstelių turi 2S komponentą, o tai dar labiau apsunkina jų genetinę sandarą [1].

Šių esminių HL-60 ląstelių aspektų supratimas ne tik pagilina mūsų žinias apie leukemiją ląsteliniu lygmeniu, bet ir padeda tęsti mokslinius tyrimus, siekiant atrasti naujų gydymo būdų. Tolesniuose skyriuose nagrinėsime, kaip unikalios HL-60 ląstelių linijos savybės prisidėjo prie reikšmingos medicinos tyrimų pažangos.

Vienaląstelinės leukemijos audinys mikroskopu.

HL-60 ląstelių kultūros informacija

HL-60 ląstelių kultivavimas yra paprastas ir lengvas. Šiame skyriuje susipažinsite su pagrindiniais klausimais, pavyzdžiui, koks yra HL-60 ląstelių linijos padvigubėjimo laikas? Ar HL-60 yra adherentinė, ar suspensinė kultūra? Koks yra HL-60 ląstelių linijos sėjos tankis? Kokia terpė naudojama HL-60 auginimui?

Padvigubėjimo laikas:	HL-60 ląstelių padvigubėjimo laikas yra maždaug 36-48 valandos.
Adherentinės ar suspensinės:	HL-60 ląstelės auga kaip suspensinės kultūros.
Sėjimo tankis:	Šios ląstelės sėjamos 1 x¹⁰⁶ ląstelių/ml tankumu, kai jos subkultūruojamos, ir 2 x¹⁰⁵ ląstelių/ml tankumu, kai pradedama nauja kultūra.
Auginimo terpė:	HL-60 ląstelėms auginti naudojama RPMI 1640 augimo terpė su 10 % FBS ir 2,5 mM L-glutamino. Terpė turėtų būti atnaujinama 2-3 kartus per savaitę.
Augimo sąlygos:	HL-60 ląstelės auginamos drėkinamame inkubatoriuje, esant 37 °C temperatūrai ir 5 %_CO2 kiekiui.
Laikymas:	HL-60 ląstelės laikomos žemesnėje nei -150 °C temperatūroje arba skysto azoto garų fazėje, kad kuo daugiau ląstelių išliktų gyvybingos.
Šaldymo terpė ir procesas:	HL-60 ląstelėms užšaldyti naudojama CM-1 arba CM-ACF šaldymo terpė. HL-60 ląstelėms užšaldyti pirmenybė teikiama lėto užšaldymo metodui.
Atšildymo procesas:	HL-60 ląstelių buteliukas su užšaldytomis ląstelėmis greitai maišomas 37 °C temperatūros vandens vonelėje. Po to ląstelės centrifuguojamos, kad būtų pašalinta šaldymo terpė. Įpilama naujos auginimo terpės, ląstelės resuspenduojamos ir išpilstomos į kolbą auginimui.
Biologinės saugos lygis:	HL-60 kultūroms tvarkyti rekomenduojamas 1 biologinės saugos lygis.

HL-60 suspensijos ląstelės 10x ir 20x padidinimu.

HL-60 ląstelės: Privalumai ir trūkumai

Prieš pradėdami dirbti su bet kuria ląstelių linija, galbūt norėsite sužinoti apie jos privalumus ir trūkumus. Šiame straipsnio skyriuje bus aptarti keli HL-60 ląstelių naudojimo privalumai ir trūkumai.

Privalumai

Keletas svarbiausių HL-60 ląstelių linijos privalumų yra šie:

HL-60 ląstelės, esant tinkamoms augimo sąlygoms, gali diferencijuotis į įvairių tipų ląsteles, įskaitant monocitus, makrofagus ir granulocitus. Dėl to jos naudingos tiriant ląstelių diferenciaciją ir kitus ląstelinius procesus
Lengva auginti: HL-60 ląsteles lengva auginti ir palaikyti suspensinėse kultūrose, todėl jos yra patogus įrankis įvairiems ląsteliniams procesams tirti
In vitro leukemijos modelis: Šios ląstelės buvo gautos iš paciento, sergančio ūmine mieloidine leukemija, todėl jų genetinės ir molekulinės savybės yra panašios į šios ligos savybes

Trūkumai

HL-60 ląstelių linijos trūkumai:

HL-60 gali diferencijuotis į kai kurias mieloidines linijas, reaguodamos į stimulus, tačiau jų diferenciacijos potencialas yra ribotas, palyginti su pirminėmis ląstelėmis.

HL-60 ląstelių linijos taikymas moksliniuose tyrimuose: Nuo vėžio iki imunologijos ir ne tik

HL-60 ląstelių linija, gauta iš paciento, sergančio ūmine promielocitine leukemija, tapo kertiniu medicinos tyrimų akmeniu dėl savo universalumo ir paprastumo auginti. Šios mažai priežiūros reikalaujančios kultūros yra labai svarbios daugybėje mokslinių tyrimų, todėl siekiame išnagrinėti kai kurias svarbiausias iš jų, įtraukdami platų tyrimo raktažodžių spektrą, kad pateiktume išsamią apžvalgą.

Vėžio tyrimai

Onkologijos srityje HL-60 ląstelių linija padėjo atskleisti vėžinių ląstelių signalizacijos subtilybes, pagerinti mūsų supratimą apie onkogenų raišką ir atrasti naujus terapinius taikinius. Ši ląstelių linija yra leukeminių ląstelių linijų, naudojamų naujiems chemoterapiniams preparatams tirti, grupės dalis. Vienas iš pikantiškų pavyzdžių - HL-60 ląstelių naudojimas siekiant nustatyti iš jūros organizmų išgautų junginių antileukemines savybes, atskleidžiančias tiek antiproliferacinį, tiek proapoptozinį poveikį [2]. Be to, ši ląstelių linija padėjo ištirti pagrindinius signalinius kelius, tokius kaip JAK/STAT, ir jų įtaką leukeminių ląstelių proliferacijai, taip pat įvertinti biologiškai aktyvių junginių, tokių kaip timokvinonas, terapinį potencialą [3].

Imunologija

HL-60 ląstelės yra patikima in vitro sistema įvairioms imuninėms reakcijoms tirti, įskaitant sudėtingą chemotaksio procesą ir pagrindinių imuninių mediatorių raiškos reguliavimą. Šios ląstelės gali diferencijuotis į mieloidines ląsteles, panašias į makrofagus ir neutrofilus, todėl jos yra universalus modelis uždegimo keliams tirti. Pavyzdžiui, HL-60 išvestos į makrofagus panašios ląstelės buvo panaudotos Brassica genties fitocheminių medžiagų priešuždegiminiam potencialui tirti [4]. Kitame tyrime HL-60 ląstelių diferenciacija į neutrofilus panašiose ląstelėse leido mokslininkams nustatyti genus, kurie yra svarbiausi ląstelių diferenciacijai ir susijusioms imuninėms funkcijoms [5].

Vaistų atradimas

HL-60 mieloidinių ląstelių diferenciacijos galimybės taip pat buvo panaudotos vaistų atradimui, ypač nustatant kandidatus, kurie potencialiai galėtų moduliuoti diferenciacijos kelią, kuris yra labai svarbus leukemijos gydymui. To pavyzdys - tyrimai, kuriuose HL-60 ląstelių linija naudota natūralių produktų priešvėžiniam potencialui įvertinti [6].

Be to, HL-60 ląstelių linija naudojama įvairiems mieloidinių ląstelių linijos biologijos aspektams tirti, pavyzdžiui, siekiant suprasti, kaip gydymas tokiomis medžiagomis kaip retinoinė rūgštis gali lemti monocitų diferenciaciją arba kaip šios ląstelės mėgdžioja pirminius neutrofilus generuodamos ekstraląstelines gaudykles. Modelio panaudojimas aiškinantis molekulinius hematologinių piktybinių navikų reiškinius dar labiau išsiplėtė jį taikant ląstelių mutacijų grupės tyrimams, ypač leukemijos p53 "karštųjų taškų" analizei.

Tiems, kurie tiria HL-60 ląstelių mechaniką, padvigubėjimo laiką ir jų reakciją į elektroporaciją mikrofluidiniuose kanaluose, ši ląstelių linija yra patikima tyrimų platforma.

HL-60 ląstelių linija jūsų tyrimams

430,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 300209

HL-60 ląstelės: Mokslinės publikacijos

Yra keletas mokslinių tyrimų apie HL-60 ląsteles. Čia pateikiame keletą svarbių pavyzdžių:

Stigmast-5-en-3-olio iš Dendronephthya gigantea apoptozinis ir antiproliferacinis poveikis žmogaus leukemijos HL-60 ir žmogaus krūties vėžio MCF-7 ląstelėms

Šiame moksliniame straipsnyje siūlomas junginio Stigmast-5-en-3-ol priešvėžinis poveikis HL-60 leukemijos ląstelėms ir MCF7 krūties vėžio ląstelėms.

Timochinonas slopina HL60 leukemijos ląstelių proliferaciją ir didina apoptozę dėl JAK/STAT neigiamų reguliatorių pakartotinės ekspresijos

Šiame tyrime aprašomas JAK/STAT signalizacijos vaidmuo HL-60 ląstelių proliferacijai. Be to, mokslininkai tiria timokvinono junginio terapinį potencialą naudodami šią leukemijos ląstelių liniją. Šis junginys slopina ląstelių dauginimąsi ir sukelia ląstelių mirtį, atgaivindamas neigiamų JAK/STAT kaskados reguliatorių raišką.

Brassica biologiškai aktyvių junginių priešuždegiminio potencialo analizė žmogaus makrofaginių ląstelių modelyje, gautame iš HL-60 ląstelių

Šiame tyrime, tiriant Brassica augalų junginių priešuždegiminį aktyvumą, panaudotos HL-60 ląstelės, iš kurių išvestas į makrofagus panašus ląstelių modelis.

ERK dalyvauja dimetilsulfoksidu indukuotų HL-60 į neutrofilus panašių ląstelių, imituojančių uždegiminius neutrofilus, diferenciacijoje ir veikloje

Šiame tyrime, paskelbtame žurnale "International Immunopharmacology", naudojant dimetilsulfoksidą iš HL-60 ląstelių linijos buvo sukurtos neutrofilus imituojančios ląstelės. Tyrimo metu pastebėta, kad ERK genas dalyvauja diferencijuojant šias ląsteles.

Pasirinktų augalinių polifenolių, galo rūgšties ir elago rūgšties, priešvėžinis poveikis jautrioms ir daugeliui vaistų atsparioms leukemijos HL60 ląstelėms

Šiame moksliniame straipsnyje tiriamas augalų polifenolinių junginių, t. y. galo rūgšties ir elago rūgšties, priešvėžinis poveikis vaistams jautrioms ir atsparioms leukemijos HL-60 ląstelėms.

HL-60 ląstelių linija Šaltiniai: Šaltiniai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt

Apie HL-60 ląstelių liniją galima rasti daug internetinių mokomųjų išteklių. Šiame skirsnyje bus aptarti keli šaltiniai, kuriuose aprašomas šios ląstelių linijos kultivavimas ir transfekcija.

Ląstelių auginimo protokolai

Šaltiniai, kuriuose aprašomi HL-60 ląstelių kultivavimo metodai, yra šie:

Šiame dokumente pateikiama informacija apieHL-60 ląstelių subkultūrinimą.
HL-60 ląstelių linija: Šioje svetainėje pateikiama pagrindinė informacija apie HL-60 ląsteles ir protokolus, įskaitant ląstelių kultivavimą, užšaldymą ir atšildymą.

Transfekcijos protokolai

Čia pateikiami kai kurie šaltiniai, kuriuose aprašomi transfekcijos metodai, naudojami HL-60 ląstelėms.

HL-60 ląstelių transfekcija: Šioje nuorodoje pateikiama išsami HL-60 leukemijos ląstelių transfekcijos procedūra.
HL-60 ląstelių pereinamoji transfekcija: Šioje nuorodoje pateikiama naudinga informacija apie ląstelių liniją ir išsamus HL-60 ląstelių pereinamosios transfekcijos protokolas.

Vaizdo įrašai, susiję su HL-60 ląstelių linija

Vaizdo įrašų apie HL-60 ląsteles yra labai nedaug.

HL-60 ląstelių perėjimas: Šiame vaizdo įraše paaiškinamas HL-60 ląstelių subkultūrinimo protokolas.

Tikimės, kad šis straipsnis suteiks jums pagrindinę informaciją apie HL-60 ląstelių linijos kultivavimą ir palaikymą. Be to, jis gali pagilinti jūsų žinias apie šių leukemijos ląstelių naudojimo moksliniuose tyrimuose privalumus. Jei planuojate naudoti šią ląstelių liniją, užsisakykite iš mūsų.

HL-60 ląstelių linija: Svarbiausi DUK mokslininkams

Nuorodos

Fleck, R., S. Romero-Steiner ir M. Nahm, HL-60 ląstelių linijos panaudojimas pneumokokinių antikūnų opsoniniam pajėgumui matuoti. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1): p. 19-27.
Fernando, I.S., et al., Stigmast-5-en-3-ol from Dendronephthya gigantea Apoptotic and antiproliferative effects of Stigmast-5-en-3-ol from Dendronephthya gigantea on human leukemia HL-60 and human breast cancer MCF-7 cells. Toxicology in Vitro, 2018. 52: p. 297-305.
Almajali, B., et al, Thymoquinone suppresses cell proliferation and enhances apoptosis of HL60 leukemia cells through re-expression of JAK/STAT negative regulators. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention: APJCP, 2021 M. 22(3): p. 879.
Ruiz-Alcaraz, A.J., et al. žalumynų biologiškai aktyvių junginių priešuždegiminio potencialo analizė žmogaus makrofaginių ląstelių modelyje, gautame iš HL-60 ląstelių. Biomedicina ir farmakoterapija, 2022. 149: p. 112804.
Wang, D., et al., ERK dalyvauja dimetilsulfoksidu indukuotų HL-60 į neutrofilus panašių ląstelių, imituojančių uždegimą sukeliančius neutrofilus, diferenciacijoje ir veikloje. Tarptautinė imunofarmakologija, 2020. 84: p. 106510.
Núñez-Sánchez, M.Á., et al., Anti-leukemic Activity of Brassica-Derived Bioactive Compounds in HL-60 Myeloid Leukemia Cells. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21): p. 13400.