HK-2 ląstelės - inkstų funkcijos ir patologijos tyrimai su HK-2 ląstelėmis inkstų tyrimuose

HK-2 yra imortalizuota žmogaus inkstų epitelio ląstelių linija, dažnai naudojama toksikologiniuose tyrimuose. Mokslininkai vertina aplinkos toksinų poveikį šioms inkstų ląstelėms. Be to, HK-2 ląstelės naudojamos inkstų ligoms ir jas lemiantiems mechanizmams tirti.

Šiame straipsnyje bus paaiškinta beveik visa svarbiausia informacija apie HK-2 ląsteles, įskaitant jų bendrąsias savybes, ląstelių auginimo sąlygas, taikymą moksliniuose tyrimuose ir daug daugiau. Sužinosite šiuos dalykus:

HK-2 ląstelės: HK HK 2: kilmė ir bendrosios savybės
HK-2 ląstelių linija: Informacija apie auginimą
HK-2 ląstelių privalumai ir trūkumai
HK-2 ląstelių linijos taikymas moksliniuose tyrimuose
HK-2 ląstelės: Mokslinių tyrimų publikacijos
HK-2 ląstelių linijos šaltiniai: HK-2 šaltiniai: protokolai, vaizdo įrašai ir kt

1.hK-2 ląstelės: Kilmė ir bendrosios savybės

Ląstelių linijos kilmę ir bendrąsias savybes būtina žinoti, kad būtų galima tinkamai tvarkyti, prižiūrėti ir naudoti ląstelių liniją. Šioje straipsnio dalyje bus aptarti šie dalykai: Kas yra HK-2 žmogaus inkstų 2 ląstelės? Koks HK2 vaidmuo? Kas yra HK2 ląstelės? Kokia yra HK-2 ląstelių linijos kilmė? Koks yra HK-2 ląstelių dydis ir morfologija?

Žmogaus inksto 2 (HK-2) ląstelės yra proksimalinių kanalėlių ląstelių, kilusių iš suaugusio europiečio normalaus inkstų audinio, tipas. HK-2 ląstelių linija buvo sukurta inkstų ląsteles transfektuojant rekombinantiniu retrovirusu, sudarytu iš 16-ojo žmogaus papilomos viruso E6/E7 genų. Šis eksperimentas lėmė HK-2 inkstų epitelio ląstelių linijos imortalizaciją ir nuolatinį augimą.
HK-2 ląstelės pasižymi epitelio morfologija.
HK-2 ląstelių dydis svyruoja nuo 17,4 iki 18,6 µm skersmens. Vidutinis skersmuo yra 18,2 µm [1].

Sveiko žmogaus inkstų ląstelės mikroskopu.

2.hK-2 ląstelių linija: Informacija apie kultivavimą

Informacija apie žmogaus inkstų 2 ląstelių linijos kultivavimą gali būti labai naudinga prieš pradedant su ja dirbti. Šiame straipsnio skyriuje paminėta būtina informacija apie HK-2 ląstelių kultivavimą. Jūs sužinosite: Ar HK-2 ląstelės yra adherentiškos? Koks yra HK-2 ląstelių padvigubėjimo laikas? Kokia terpė naudojama HK-2 ląstelėms auginti?

Pagrindiniai HK-2 ląstelių kultivavimo aspektai

Populiacijos padvigubėjimo laikas:	HK-2 ląstelių padvigubėjimo laikas svyruoja nuo 47,3 iki 61,7 val.
Prigludusios arba suspenduotos:	HK-2 inkstų epitelio ląstelių linija yra lipni.
Subkultivavimo santykis:	HK-2 ląstelės kultivuojamos santykiu nuo 1:2 iki 1:4. Adheravusios HK-2 ląstelės praplaunamos 1 x PBS ir, įpylus "Accutase" tirpalo, inkubuojamos aplinkos temperatūroje 8-10 min. Į disocijuotas ląsteles įpilama kultūrinės terpės ir centrifuguojama. Surinktos ląstelės atsargiai resuspenduojamos ir supilamos į naujas kolbas kultivavimui.
Auginimo terpė:	Keratinocitų ląstelių linijos terpė, kurioje yra 10 % galvijų fetalinio serumo, 0,05 mg/ml galvijų hipofizės ekstrakto (BPE) ir 5 ng/ml epidermio augimo faktoriaus (EGF), yra ideali HK-2 ląstelių terpė. Medžiaga turėtų būti keičiama kas 2-3 dienas per savaitę.
Augimo sąlygos:	Žmogaus inkstų 2 ląstelių linijos kultūros laikomos drėkinamajame inkubatoriuje, kuriame yra 5 % CO2, 37 °C temperatūroje.
Laikymas:	Užšaldytos ląstelės laikomos skysto azoto garų fazėje arba žemesnėje nei -150 °C temperatūroje itin žemos temperatūros šaldiklyje.
Šaldymo procesas ir terpė:	CM-1 arba CM-ACF šaldymo terpė idealiai tinka HK-2 ląstelėms užšaldyti. Trumpai tariant, pasirenkamas lėtas šaldymo metodas, leidžiantis temperatūrai sumažėti tik 1 laipsniu Celsijaus per minutę ir apsaugantis ląsteles nuo bet kokio šoko.
Atšildymo procesas:	Užšaldytos ląstelės atšildomos 37 laipsnių Celsijaus temperatūros vandens vonelėje. Šios ląstelės užpilamos šviežia mitybine terpe ir resuspenduojamos. Po to ląstelės išpilstomos į naują kolbą su auginimo terpe. Po 24 valandų terpė pakeičiama, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai.
Biologinės saugos lygis:	HK-2 ląstelių kultūros laikomos 1 biologinės saugos lygio laboratorijose.

HK-2 ląstelės, augančios salelėse, 10x ir 20x padidinimas.

3.hK-2 ląstelių privalumai ir apribojimai

HK-2 yra plačiai naudojama žmogaus proksimalinių kanalėlių epitelio ląstelių linija. Kaip ir kitos ląstelių linijos, ji taip pat turi tam tikrų privalumų ir trūkumų. Šiame skyriuje bus aptarti kai kurie pagrindiniai žmogaus inkstų 2 ląstelių linijos privalumai ir trūkumai.

Privalumai

Pagrindiniai HK-2 ląstelių linijos privalumai yra šie:

Gerai apibūdinta	HK-2 ląstelių linija yra išsamiai apibūdinta pagal morfologiją, dydį ir genomą. Su šiomis normaliomis inkstų ląstelėmis atlikta daug mokslinių tyrimų.
Nemortizuotos	HK-2 yra nuolatinė ląstelių linija, pasižyminti ilgesne gyvavimo trukme, todėl ją galima dauginti kelis kartus. Ši savybė užtikrina nuolatinį ląstelių tiekimą laboratoriniams eksperimentams.
Proksimalinių kanalėlių epitelio savybės	HK-2 ląstelės pasižymi gerai diferencijuotu fenotipu, būdingu proksimalinių kanalėlių ląstelėms (PTC), aptinkamoms žmogaus inkstuose. Dėl šios unikalios savybės HK-2 ląstelės yra vertingas in vitro modelis inkstų fiziologijai, ląstelių procesams ir reakcijoms į įvairius dirgiklius tirti.

Apribojimai

Štai keletas HK-2 ląstelių linijos apribojimų:

In vitro modelis

HK-2 yra normalių inkstų ląstelių, ypač pasižyminčių proksimalinių kanalėlių epitelio ląstelių savybėmis, in vitro modelis. Tačiau ji gali nevisiškai atkartoti žmogaus inkstų audinio sudėtingumą ir mikroaplinką, esančią in vivo.

4.hK-2 ląstelių linijos taikymas moksliniuose tyrimuose

HK-2 ląstelių linija turi daugybę pritaikymo būdų toksikologiniuose tyrimuose. Čia aptarėme kai kuriuos konkrečius ir svarbius šios žmogaus proksimalinių kanalėlių ląstelių linijos panaudojimo tyrimams būdus.

Inkstų fiziologija : HK-2 ląstelės paprastai naudojamos normaliai inkstų fiziologijai ir funkcijoms tirti. Mokslininkai šias proksimalinių kanalėlių epitelio ląsteles naudoja jonų kanalams, pernašos procesams ir kitiems ląstelių mechanizmams, reguliuojantiems inkstų homeostazę, tirti. Pavyzdžiui, mokslininkai tyrinėjo pereinamojo receptoriaus potencialo kanalo 6 (TRPC6) kanalų vaidmenį (+)-konokarpano (CNCP), neolignano, sukeltoje ląstelių mirtyje inkstų epitelio ląstelėse HK-2 [2].
Inkstų ligos: Žmogaus inkstų 2 ląstelių linija naudojama įvairioms inkstų ligoms, t. y. ūminiam inkstų pažeidimui ir diabetinei nefropatijai, bei jas lemiantiems ląstelių ir molekuliniams mechanizmams tirti. Pavyzdžiui, tyrimais nustatyta, kad klotho baltymų metilinimo lygis yra susijęs su inkstų pažeidimu. Klotho geno promotoriaus metilinimo sumažinimas gali padidinti jo ekspresiją ir sušvelninti inkstų pažeidimą, sukeltą diabetinių db/db pelių modeliuose ir dideliu gliukozės kiekiu apdorotose HK-2 ląstelėse [3].
Toksikologiniai tyrimai: HK-2 ląstelės yra puikus mokslinių tyrimų įrankis vertinant galimą įvairių vaistų, cheminių medžiagų ir aplinkos teršalų poveikį. Tyrimai gali padėti mokslininkams įvertinti vaistų saugumą ir šalutinį poveikį inkstų ląstelėms. Pavyzdžiui, 2022 m. paskelbtame tyrime buvo vertinamas galimas natūralaus augalo Polygonatumkingianum (PK) polisacharidų ir vandeninio ekstrakto poveikis urano sukeltam nefrotoksiškumui HK-2 ląstelėse. Jie nustatė, kad PK daro apsauginį poveikį ir apsaugo inkstų ląsteles nuo apsinuodijimo uranu [4].

650,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 305021

5.hK-2 ląstelės: Mokslinės publikacijos

Toliau pateikiamos įdomios mokslinių tyrimų publikacijos apie HK-2 inkstų epitelio ląsteles.

CircHIPK3 mažina didelio gliukozės kiekio toksiškumą žmogaus inkstų kanalėlių epitelio HK-2 ląstelėms reguliuojant miR-326/miR-487a-3p/SIRT1

Šiame tyrime žurnale Diabetes, Metabolic Syndrome, and Obesity (2022) siūloma, kad žiedinė RNR HIPK3 gali sumažinti HK-2 ląstelių proliferacijos slopinimą, kurį sukelia didelis gliukozės toksiškumas. Be to, ji gali slopinti ląstelių mirtį reguliuodama miR-326/miR-487a-3p/SIRT1 kaskadą.

Skirtingas aukso nanodalelių toksiškumo HK-2 inkstų proksimalinių kanalėlių ląstelėms ir 786-0 karcinomos ląstelėms mechanizmas

Šiame moksliniame leidinyje "Nanomedicine" (2020) paskelbtame straipsnyje vertinami skirtingi aukso nanodalelių (AuNP) toksiškumo mechanizmai 786-0 vėžio ląstelėse ir HK-2 proksimalinių kanalėlių epitelio ląstelėse.

HK-2 ląstelėse didelio gliukozės kiekio sukeltą toksiškumą galima sumažinti slopinant miRNA-320c

Šis straipsnis paskelbtas žurnale "Renal Failure" (2022). Išvadose teigiama, kad mikroRNA-320c gali sumažinti didelės gliukozės sukeltą toksiškumą inkstų ląstelėse (HK-2), veikdama PTEN ir slopindama PI3K/AKT signalizaciją.

Iš mezenchiminių kamieninių ląstelių gautos egzosomos silpnina HK-2 ląstelių epitelio-mezenchiminį perėjimą

Šiame tyrime, paskelbtame žurnale "Tissue Engineering Part A" (2022 m.), siūloma, kad iš mezenchiminių kamieninių ląstelių gautos egzosomos užkerta kelią HK-2 inkstų ląstelių epiteliniam-mezenchiminiam perėjimui.

LncRNA TapSAKI skatina HK-2 ląstelių uždegiminį pažeidimą ir šlapimo sukeltą sepsio sukeltą inkstų pažeidimą

Journal of Pharmacy and Pharmacology (2019) straipsnyje teigiama, kad lncRNA TapSAKI stiprina HK-2 uždegiminį atsaką ir ląstelių mirtį reguliuodama mikroRNA-22/PTEN/TLR4/NF-κB signalinį kelią.

6.hK-2 ląstelių linijos ištekliai: HK-2 šaltinių šaltiniai: protokolai, vaizdo įrašai ir kt

HK-2 yra garsi ląstelių linija. Čia pateikiami kai kurie šaltiniai, kuriuose aprašomas HK-2 ląstelių auginimo protokolas.

HK-2 ląstelių kultūra: Šioje svetainėje pateikiama daug informacijos apie HK-2 ląstelių kultūrą. Pavyzdžiui, joje pateikiamas HK-2 ląstelių terpės receptas, perėjimo protokolas, proliferacinių ir kriokonservuotų kultūrų tvarkymo ir palaikymo protokolas.
Ląstelių perleidimas: Šiame vaizdo įraše rasite bendrą adherentinių ląstelių linijų ląstelių padalijimo arba perleidimo protokolą.

Nuorodos

Handl, J., et al., The effect of repeated passaging on the susceptibility of human proximal tubular HK-2 cells to toxic compounds (Pakartotinio pasažavimo poveikis žmogaus proksimalinių kanalėlių HK-2 ląstelių jautrumui toksiniams junginiams ). Physiological Research, 2020. 69(4): p. 731.
Yang, G., et al., TRPC6 kanalų aktyvavimas prisideda prie (+)-konokarpano sukeltos apoptozinės ląstelių žūties HK-2 ląstelėse. Food and Chemical Toxicology, 2019. 129: p. 281-290.
Yang, X.H., et al., EGCG attenuates renal damage via reversing klotho hypermethylation in diabetic db/db mice and HK-2 cells. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, 2020. 2020.
Li, W., et al., Polygonatum kingianum polisacharidų ir vandeninio ekstrakto apsauginis poveikis urano sukeltam toksiškumui žmogaus inkstų (HK-2) ląstelėms. International Journal of Biological Macromolecules, 2022. 202: p. 68-79.