DU-145 ląstelės - išsamus mokslininko vadovas

DU-145 yra žmogaus prostatos karcinomos ląstelių linija, plačiai taikoma biomedicininiuose tyrimuose. Šios ląstelės yra neįkainojamas modelis prostatos vėžio biologijai tirti, vaistams bandyti ir kurti. Be to, mokslininkai DU-145 ląsteles taip pat naudoja prostatos vėžio vystymosi, augimo ir progresavimo molekuliniams mechanizmams tirti.

Šiame straipsnyje pateiksime vertingų įžvalgų apie DU-145 prostatos vėžio ląsteles. Visų pirma, jame bus aptarta:

Bendroji informacija apie DU-145 ląstelių liniją ir jos kilmę
DU-145 ląstelių kultivavimas
DU-145 ląstelių linija: Privalumai ir apribojimai
DU-145 ląstelių panaudojimas moksliniams tyrimams
Mokslinės publikacijos su DU-145 ląstelėmis
DU-145 ląstelių linijos ištekliai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt

1. Bendroji informacija apie DU-145 ląstelių liniją ir jos kilmę

Prieš pradedant dirbti su ląstelių linija, labai svarbu suprasti pagrindines jos savybes ir kilmę. Šiame skyriuje bus išsamiai supažindinama su DU-145 ląstelių linijos savybėmis ir kilme. Sužinosite: Kas yra DU145 vėžio ląstelės? Kokia yra DU145 ląstelių morfologija? Kuo skiriasi PC-3 ir DU145?

DU-145, žmogaus prostatos vėžio ląstelių linija, buvo gauta iš kaukaziečio vyro (69 m.), sergančio metastazavusia prostatos karcinoma, smegenų. Pirmą kartą šias ląsteles 1978 m. deponavo K. R. Stone'as ir jo kolegos.
Kaip ir PC-3 prostatos vėžio ląstelės, DU-145 taip pat ekspresuoja androgenų receptorius. Tačiau kai šios ląstelės veikiamos androgenų ligandais, jos nerodo jokio į androgenų receptorius reaguojančių genų aktyvumo, todėl laikomos nuo androgenų nepriklausomomis ląstelėmis.
DU-145 ląstelės pasižymi epitelio morfologija.
DU-145 ląstelės yra hipotriploidinės, o jų modalinis chromosomų skaičius yra 64. Joms būdingos kelios žyminčios chromosomos, pavyzdžiui, del (11) (q23), t(11q12q), 16q+, del (1) (p32) ir del (9) (p11).

PC-3 ir DU145

Abi prostatos vėžio ląstelių linijos yra nepriklausomos nuo androgenų receptorių. Jos skiriasi savo navikiniu ir metastaziniu potencialu. PC-3 ląstelių linija, įšvirkšta į imunokompromituotą pelę, suformuoja labai metastazuojančią IV laipsnio adenokarcinomą. Priešingai, DU-145 ląstelių linija sukuria prostatos vėžį su vidutiniu metastazavimo potencialu [1].

Žmogaus prostatos vėžio ląstelių PC-3 mikrofilamentų sutrikimas.

2. dU-145 ląstelių kultivavimas

DU-145 ląstelių linija plačiai naudojama prostatos vėžio tyrimų laboratorijose. Turėtumėte išmokti toliau nurodytus pagrindinius dalykus, kad būtų lengviau ir efektyviau ją kultivuoti. Šiame skyriuje bus pateikta informacija apie DU145 terpę, padvigubėjimo laiką, ląstelių kultivavimo sąlygas ir protokolus.

Pagrindiniai DU-145 ląstelių kultivavimo aspektai

Populiacijos padvigubėjimo laikas:	DU-145 ląstelių padvigubėjimo laikas svyruoja nuo 30 iki 40 valandų.
Prigludusios arba suspenduotos:	DU-145 yra adherentinė ląstelių linija.
Sėjimo tankis:	DU-145 ląstelės sėjamos rekomenduojamu 2 x¹⁰⁴^{ląstelių/cm2} tankumu. Esant tokiam tankiui, ląstelės beveik per 4 dienas suformuoja susiliejantį monosluoksnį. Sėjimui ląstelės praplaunamos 1 x fosfatinio buferinio fiziologinio tirpalo tirpalu ir inkubuojamos su pasėlio tirpalu "Accutase". Po 8-10 minučių inkubacijos kambario temperatūroje ląstelės užpilamos šviežia mitybine terpe ir centrifuguojamos. Surinktos ląstelių granulės atsargiai resuspenduojamos ir ląstelės supilamos į naujas auginimo kolbas.
Augimo terpė:	EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) su terpės priedais, t. y. 10 % galvijų vaisiaus serumo (FBS), 2 mM L-glutamino, 2,2 g/l NaHCO3 ir EBSS. Medžiaga atnaujinama 2-3 kartus per savaitę.
Augimo sąlygos:	DU-145 kultūros laikomos 37 °C temperatūros drėkinamame inkubatoriuje su 5 % CO2 šaltiniu.
Laikymas:	DU-145 ląstelės laikomos skysto azoto garų fazėje arba žemesnėje nei -150 °C temperatūroje elektriniame šaldiklyje, kad ląstelės ilgiau išliktų gyvybingos.
Šaldymo procesas ir terpė:	DU-145 prostatos vėžio ląstelėms rekomenduojama CM-1 arba CM-ACF šaldymo terpė. Ląstelėms užšaldyti pasirenkamas lėtas šaldymo metodas, kai temperatūra palaipsniui nukrenta 1 °C. Tai apsaugo ląsteles nuo šoko ir padeda išlaikyti jų gyvybingumą.
Atšildymo procesas:	Sušaldytų DU-145 ląstelių buteliukai greitai atšildomi 37 °C temperatūros vandens vonelėje 40-60 sekundžių. Po to ląstelės užpilamos auginimo terpe ir centrifuguojamos, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai. Surinktos ląstelės resuspenduojamos augimo terpėje ir supilamos į kolbą augimui. Atkūrimas užšaldant trunka beveik 24 valandas.
Biologinės saugos lygis:	Norint auginti nuo androgenų receptorių nepriklausomą DU145 ląstelių liniją, reikia nustatyti 1 biologinės saugos lygį.

DU-145 prostatos vėžio ląstelės 10x ir 20x padidinimu.

3. dU-145 ląstelių linija: Privalumai ir apribojimai

Kaip ir kitos ląstelių linijos, prostatos vėžio ląstelių linija DU-145 turi tam tikrų privalumų ir trūkumų. Šios savybės gali padėti jums apsispręsti dėl jos naudojimo tyrimuose. Pagrindiniai DU-145 ląstelių linijos privalumai ir trūkumai paminėti toliau.

Privalumai

DU-145 ląstelių privalumai:

Tumorigeniškumas	DU-145 yra agresyvi navikinė prostatos vėžio ląstelių linija, turinti vidutinį metastazavimo potencialą. Naudojama kuriant DU145 ksenograftų modelį imunokompromituotose pelėse, siekiant ištirti prostatos vėžio biologiją, vystymąsi ir augimą in vitro ir in vivo.
Nepriklauso nuo androgenų receptorių	DU-145 prostatos vėžio ląstelės yra nepriklausomos nuo androgenų receptorių. Jų augimas nepriklauso nuo androgenų, o gydant androgenais, jos nereaguoja nei ląstelių, nei molekuliniu lygmeniu. Idealiai tinka nuo hormonų nepriklausomo prostatos vėžio mechanizmams tirti.

Apribojimai

DU-145 ląstelių linijos apribojimai yra šie:

In vitro modelis

DU-145 yra metastazavusios prostatos karcinomos in vitro ląstelių modelis, todėl jis gali nevisiškai atspindėti pirminių prostatos navikų sudėtingumą. Be to, jis gali reikšti ne visus prostatos vėžio tipus ir potipius dėl specifinių savybių, pavyzdžiui, nepriklausomybės nuo androgenų receptorių.

4. dU-145 ląstelių pritaikymas moksliniams tyrimams

DU-145 prostatos vėžio ląstelių linija gali būti plačiai naudojama moksliniams tyrimams. Čia išvardyti keli perspektyvūs taikymo būdai.

Prostatos vėžio biologija: DU-145 yra tinkamas modelis prostatos vėžio biologijai tirti. Mokslininkai naudoja šias ląsteles vėžio vystymąsi, progresavimą ir metastazavimą lemiantiems molekuliniams mechanizmams tirti. Be to, tiriami genetiniai pokyčiai, dažniausiai susiję su prostatos vėžiu. 2021 m. atliktų tyrimų metu buvo tiriamos DU-145 ląstelės, siekiant nustatyti galimus biomarkerius, turinčius veiksmingą diagnostinę ir terapinę reikšmę. Tyrimo metu buvo pasiūlyta, kad aktino gama 1 (ACTG1) yra potencialus prostatos vėžio biomarkeris, nes jis skatina vėžio ląstelių proliferaciją ir reguliuoja metastazavimą per MAPK/ERK kelio aktyvaciją [2].
Vaistų atranka ir kūrimas: DU-145 prostatos vėžio ląstelės plačiai naudojamos potencialių vaistų nuo vėžio citotoksiškumui ir veiksmingumui tirti. Tai padeda mokslininkams nustatyti naujus vaistus, suprasti atsparumą vaistams ir pagrindinius molekulinius mechanizmus. 2022 m. atliktame tyrime buvo tiriamas dervų mišinio, propolio arba bičių klijų, citotoksinis poveikis prostatos vėžio ląstelių linijoms PC-3 ir DU-145. Tyrimas parodė šios natūralios medžiagos augimą slopinantį poveikį abiejose ląstelių linijose ir pasiūlė jos priešvėžinį potencialą [3]. 2019 m. buvo atliktas dar vienas tyrimas, kurio metu buvo tiriamas natūralaus junginio betaino antiproliferacinis poveikis DU-145 prostatos vėžio ląstelėms. Tyrimas parodė, kad betainas pasižymi antiproliferaciniu poveikiu didindamas oksidacinio streso sukeltą ląstelių žūtį ir uždegimą DU-145 ląstelėse [4].

430,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 300168

5.mokslinių tyrimų publikacijos su DU-145 ląstelėmis

Toliau pateikiama keletas mokslinių publikacijų apie DU-145 ląstelių liniją.

Nuo koncentracijos priklausomas cinko sulfato poveikis DU-145 žmogaus prostatos vėžio ląstelių linijai: oksidacinė, apoptozinė, uždegiminė ir morfologinė analizė

Šiame tyrime, paskelbtame leidinyje Biological Trace Element Research, 2020 m., siūloma, kad cinko sulfatas (_ZnSo4) pasižymi antiproliferaciniu poveikiu DU-145 ląstelėms, sukeldamas apoptozę, morfologinius pokyčius, oksidacinę pažaidą ir uždegimą.

Annona muricata L. žievės ekstrakto ir fitocheminės medžiagos annonacino sukeltas selektyvus citotoksinis ir antimetastazinis aktyvumas DU-145 prostatos vėžio ląstelėse

Šis mokslinis straipsnis paskelbtas žurnale BMC Complementary Medicine and Therapies 2020 m. Šiame tyrime nagrinėtas augalo Annona muricata L. žievės ekstrakto ir jo bioaktyviosios medžiagos annonacino citotoksinis ir antimetastazinis potencialas DU-145 ląstelių linijoje.

LncRNA LOXL1-AS1/miR-let-7a-5p/EGFRsusijęs kelias reguliuoja prostatos vėžio DU-145 ląstelių atsparumą doksorubicinui

Šioje publikacijoje žurnale "IUBMB Life" (2019) siūloma, kad ilgųjų nekoduojančių RNR LOXL1-AS1 sąveika su miR-let-7a-5p ir EGFR keliu reguliuoja prostatos vėžio DU-145 ląstelių atsparumą doksorubicinui.

DDR1 mažinimas sukelia apoptozę ir slopina EMT per Pyk2/MKK7 fosforilinimą DU-145 ir Lncap-FGC prostatos vėžio ląstelių linijose

Šiame žurnale "Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry" (2020 m.) paskelbtame straipsnyje teigiama, kad diskoidino domeno receptoriaus1 (DDR1) geno mažinimas sukelia DU-145 ląstelių mirtį ir slopina epitelio perėjimą iš epitelio į mezenchiminį sluoksnį (EMT) aktyvuojant Pyk2/MKK7 kelią.

Kasticinas slopina žmogaus prostatos vėžio DU 145 ląstelių migraciją ir invaziją per Ras/Akt/NF-κB signalinius kelius

Šiame žurnale "Journal of Food Biochemistry" (2019 m.) paskelbtame tyrime siūloma, kad polimetoksiflavonas kasticinas slopina DU-145 ląstelių migraciją ir invaziją reguliuodamas Ras/Akt/NF-κB signalizaciją.

6. dU-145 ląstelių linijos ištekliai: Du-145-1 šaltiniai: protokolai, vaizdo įrašai ir kt

Apie DU-145 prostatos vėžio ląstelių liniją galima rasti daug internetinių išteklių. Šiame skyriuje paminėti keli šaltiniai, kuriuose paaiškinamas šių ląstelių tvarkymas, priežiūra ir transfekcijos protokolas:

DU-145 transfekcija: Šiame vaizdo vadovėlyje pateikiama išsami informacija apie DU-145 ląstelių transfekcijos protokolą.

Čia minimas DU-145 ląstelių auginimo protokolas.

DU-145 subkultūrinimas: Ši nuoroda padės jums sužinoti DU-145 ląstelių subkultūrinimo arba subkultūrinimo protokolą.
DU-145 ląstelės: Šioje svetainėje pateikiama daug naudingos informacijos apie DU-145 ląstelių liniją, įskaitant DU145 terpę, subkultūrinimo protokolą, proliferacinių ir kriokonservuotų kultūrų tvarkymą.

Nuorodos

Lima, A.R., ir kt., Žmogaus prostatos normalios ir vėžinės ląstelės egzometabolomo atskyrimas naudojant GC-MS. Mokslinės ataskaitos, 2018. 8(1): p. 5539.
Xiao, L., et al., Silencing ACTG1 expression induces prostate cancer epithelial mesenchymal transition through MAPK/ERK signal way. DNR ir ląstelių biologija, 2021. 40(11): p. 1445-1455.
Gogacz, M., et al., Anticancer effects of propolis extracts obtained with the cold separation method on PC-3 and DU-145 prostate cancer cell lines (Šaltojo atskyrimo metodu gautų propolio ekstraktų priešvėžinis poveikis PC-3 ir DU-145 prostatos vėžio ląstelių linijoms ). Molekulės, 2022. 27(23): p. 8245.
Kar, F., et al., Betainas slopina ląstelių proliferaciją didindamas oksidacinio streso sukeltą apoptozę ir uždegimą DU-145 žmogaus prostatos vėžio ląstelių linijoje. Ląstelių stresas ir šaperonai, 2019. 24: p. 871-881.