DLD-1 ląstelės: DLD-1 ląstelių pritaikymas ir įžvalgos storosios žarnos vėžio tyrimuose
DLD-1 yra žmogaus storosios žarnos karcinomos ląstelių linija, dažnai naudojama vėžio tyrimuose. Tai vertinga priemonė tirti įvairius storosios žarnos vėžio aspektus, įskaitant naviko vystymąsi, progresavimą, pagrindinius molekulinius mechanizmus ir reakciją į terapinius preparatus. Taigi, DLD-1 yra nepakeičiama priemonė siekiant suprasti ligą ir kurti potencialias gydymo strategijas.
- Auginimo terpė
- DLD-1 ląstelėms auginti naudojama RPMI 1640 su terpės priedais, įskaitant 10 % veršelių serumo (FBS), 2,1 mM stabilaus glutamino ir 2,0 g/l NaHCO3. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
- Padvigubėjimo laikas
- DLD-1 ląstelių dvigubėjimo laikas yra maždaug 15 valandų.
- Augimo tipas
- DLD-1 yra adhezyvinė žmogaus storosios žarnos vėžio ląstelių linija. Ląstelės auga į monosluoksnius.
- Biologinio saugumo lygis
- BSL-1
- Galima įsigyti iš
- Cytion — Užsisakyti DLD-1
- DLD-1 ląstelių bendrosios charakteristikos ir kilmė
- DLD-1 ląstelių linijos auginimo informacija
- DLD-1 ląstelių linija: privalumai ir trūkumai
- DLD-1 ląstelių linijos taikymas moksliniuose tyrimuose
- 5. Moksliniai straipsniai apie DLD-1 ląsteles
- Ištekliai, susiję su DLD-1 ląstelių linija: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
- Dažnai užduodami klausimai
Bendrosios DLD-1 ląstelių charakteristikos ir kilmė
Prieš pradėdamas dirbti su ląstelių linija, tyrėjas pirmiausia turi atsižvelgti į jos kilmę ir bendrąsias savybes. Šiame straipsnio skyriuje pateikiama išsami DLD-1 ląstelių linijos apžvalga. Jame bus atsakyta į šiuos dažnai užduodamus klausimus: Kas yra DLD-1 ląstelės? Kas yra DLD-1 vėžio ląstelių linija? Kokios yra DLD-1 ląstelių linijos mutacijos? Koks yra DLD-1 ląstelės dydis? Kokia yra DLD-1 ląstelių morfologija?
- DLD-1, storosios žarnos vėžio ląstelių linija, kilusi iš 67 metų vyro, sergančio storosios žarnos adenokarcinoma, storosios žarnos. Ji buvo izoliuota D.L. Dexterio ir kolegų 1977–1979 m. Ši ląstelių linija turi tą pačią kilmę kaip ir HCT-8, HCT-15 bei HRT-18 ląstelių linijos.
- Kaip ir kolorektalinis vėžys, DLD-1 ląstelės pasižymi mikrosatelitų nestabilumo fenotipu [1].
- DLD-1 mutacijos apima KRAS, P53, BRAF, BRCA1 ir BRCA2. Dėl DLD-1 P53 būklės, DLD-1 BRCA, DLD-1 BRCA2 ir DLD-1 KRAS mutacijų šios ląstelės laikomos idealiomis vėžio tyrimams.
- Šios ląstelės turi epitelio tipo morfologiją.
- DLD-1 ląstelių linijos dydis yra maždaug 15 µm.
- Žmogaus storosios žarnos vėžio ląstelių linija DLD-1 turi pseudodiploidinį kariotipą. Apie 86 % ląstelių turi modalų chromosomų skaičių 46. Tačiau 17,1 % ląstelių populiacijos taip pat gali būti poliploidija.
DLD-1 ląstelių linijos auginimo informacija
Prieš pradedant bet kokios ląstelių linijos kultivavimą, būtina žinoti pagrindinius ląstelių kultivavimo reikalavimus. Šiame skyriuje bus pabrėžti svarbūs aspektai, kuriuos būtina išsiaiškinti prieš pradedant darbą su DLD-1 ląstelių linija. Tai apima: Koks yra DLD-1 ląstelių padvigubėjimo laikas? Kas yra DLD-1 kultūrinė terpė? Koks yra DLD-1 ląstelių sėjimo tankis? Kaip kultivuoti DLD-1 ląsteles?
Svarbiausi DLD-1 ląstelių auginimo aspektai
Padvigubėjimo laikas:
DLD-1 ląstelių padvigubėjimo laikas yra maždaug 15 valandų.
Adhezyvinės ar suspensinės:
DLD-1 yra adhezyvinė žmogaus storosios žarnos vėžio ląstelių linija. Ląstelės auga į monosluoksnius.
Sėjimo tankis:
DLD-1 ląstelės sėjamos 1–2 x 104 ląstelių/cm2 tankumu. Prisijungusios ląstelės nuplaunamos 1x fosfato buferiniu tirpalu (PBS) ir inkubuojamos su perėjimo tirpalu (Accutase) kambario temperatūroje. Po 8–10 minučių inkubacijos atsiskyrusios ląstelės įdedamos į auginimo terpę ir centrifuguojamos. Tada ląstelių nuosėdos atsargiai resuspenduojamos, o ląstelės supilamos į naujus auginimo indus, kuriuose yra auginimo terpė.
Augimo terpė:
DLD-1 ląstelėms kultivuoti naudojamas RPMI 1640 su terpės priedais, įskaitant 10 % veršelių serumo (FBS), 2,1 mM stabilaus glutamino ir 2,0 g/l NaHCO3. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
Auginimo sąlygos:
DLD-1 kultūros laikomos 37 °C drėgname inkubatoriuje su 5 % CO2 tiekimu.
Laikymas:
DLD-1 ląstelės laikomos skysto azoto garų fazėje arba elektriniame ultražemos temperatūros šaldiklyje (esant temperatūrai žemiau -150 °C).
Užšaldymo procesas ir terpė:
DLD-1 ląstelėms užšaldyti galima naudoti CM-1 arba CM-ACF užšaldymo terpę. Visada rekomenduojamas lėtas užšaldymo procesas, leidžiantis temperatūrai palaipsniui mažėti 1 °C, taip apsaugant ląsteles nuo šoko ir išsaugant jų gyvybingumą.
Atšildymo procesas:
Užšaldytos ląstelės atšildomos vandens vonioje, iš anksto nustatytos 37 °C temperatūrai, 40–60 sekundžių, kol lieka nedidelis ledo gabalėlis. Po to ląstelės įdedamos į šviežią terpę ir centrifuguojamos. Šis žingsnis būtinas, kad iš ląstelių būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai. Surinktos ląstelės vėl suspenduojamos augimo terpėje ir supilamos į kolbą augimui.
Biologinio saugumo lygis:
DLD-1 ląstelių linija yra laikoma 1 biologinio saugumo lygio laboratorijose.
DLD-1 ląstelių linija: privalumai ir trūkumai
Šioje straipsnio dalyje apžvelgsime DLD-1 storosios žarnos vėžio ląstelių linijos privalumus ir trūkumus.
Privalumai
Pagrindiniai DLD-1 ląstelių linijos privalumai yra šie:
Kolorektalinio vėžio modelis
DLD-1 ląstelėse yra mutacijų, dažnai pasitaikančių storosios žarnos vėžio pacientams, pvz., DLD-1 KRAS mutacija, DLD-1 BRCA ir DLD-1 BRCA2. Dėl šio panašumo jos yra klinikinis ląstelių modelis, tinkamas šios ligos tyrimams.
Tumorigeninė ląstelių linija
DLD-1 ląstelės yra tumorigeninės. Jos gali sukelti navikus, kai yra įšvirkščiamos į nuogąsias peles. Todėl mokslininkai naudoja šias ląsteles, kad sukurtų ksenotransplantacijos navikų modelius, kurie padeda tirti navikų susidarymą, vystymąsi ir progresavimą in vivo.
Apribojimai
Su DLD-1 ląstelėmis susiję apribojimai yra šie:
Heterogeniškumas
DLD-1 storosios žarnos vėžio ląstelių populiacijos pasižymi genetine ir fenotipine heterogeniškumu. Tai gali turėti įtakos tyrimų rezultatų apibendrinamumui.
DLD-1 ląstelių linijos taikymas moksliniuose tyrimuose
DLD-1 ląstelių linija siūlo įvairias taikymo galimybes vėžio tyrimuose. Šiame skyriuje aptariamos kelios svarbiausios taikymo sritys.
- Vėžio tyrimai: DLD-1 ląstelės yra vertingas in vitro modelis, padedantis suprasti molekulinės mechanizmus, lemiančius storosios žarnos vėžio augimą, vystymąsi ir progresavimą. Be to, jos naudojamos genų ekspresijos, signalinių kelių ir konkrečių genų mutacijų įtakos vėžio ląstelių elgsenai tyrimams. 2022 m. atliktuose tyrimuose pastebėta, kad PI3K/Akt/YAP signalizacijos kaskada reguliuoja DLD-1 storosios žarnos vėžio ląstelių linijos migraciją ir invaziją [2].
- Vaistų kūrimas: Mokslininkai naudoja DLD-1 ląstelių liniją, kad išbandytų priešvėžinių vaistų veiksmingumą ir įvertintų jų potencialą storosios žarnos vėžio gydymui. Tai padeda kurti vaistus ir veiksmingai kovoti su liga. 2022 m. atliktame tyrime buvo naudojama DLD-1 vėžio ląstelių linija ir tiriamas cheminiu būdu sintezuotų junginių – silicio ftalocianinų – priešvėžinis aktyvumas. Tyrimo rezultatai leidžia manyti, kad šie junginiai yra stiprūs priešvėžiniai agentai [3]. Įdomu tai, kad kitas tyrimas, kuriame buvo naudojamos DLD-1 ląstelės, nustatė iš probiotikų gauto P8 baltymo priešvėžinį potencialą [4].
5. Moksliniai straipsniai apie DLD-1 ląsteles
Šiame skyriuje bus pateikti keli įdomūs ir dažnai cituojami leidiniai, kuriuose aptariama DLD-1 storosios žarnos karcinomos ląstelių linija.
Šis leidinys paskelbtas žurnale „Journal of Biologically Active Products from Nature“ (2022 m.). Tyrimas parodė, kad flavonoidas diosminas sukėlė DLD-1 ląstelių mirtį ir ląstelių ciklo sustabdymą; taigi, jis gali būti potencialus priešvėžinis agentas.
Šiame tyrime, paskelbtame žurnale „Animal Cells and Systems“ (2018 m.), teigiama, kad fermentas bromelainas slopina DLD-1 KRAS mutaciją ir turi stiprų citotoksinį poveikį.
Šis mokslinis straipsnis buvo paskelbtas 2019 m. žurnale „Environmental Toxicology“. Tyrime buvo tiriamas natūralaus junginio bergaptino priešvėžinis poveikis, naudojant DLD-1 storosios žarnos ląstelių liniją.
Šiame tyrime, paskelbtame žurnale „Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials“ (2023 m.), nustatyta, kad kurkumino ir geležies oksido nanokompozitai yra labai veiksmingi prieš DLD-1 storosios žarnos vėžio ląsteles.
Šis mokslinis straipsnis buvo paskelbtas 2020 m. žurnale „Turkish Journal of Biology“. Tyrime buvo iškelta hipotezė, kad natūralus produktas, epibrassinolidas, aktyvuodamas AKT DLD-1 ląstelėse, stimuliuoja autofagiją, susijusią su poliaminais.
Ištekliai apie DLD-1 ląstelių liniją: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
Toliau pateikiami keli ištekliai apie DLD-1 ląsteles:
- DLD-1 transfekcija: Šis vaizdo įrašas yra išsamus vadovas apie DLD-1 in vitro transfekcijos protokolą.
- DLD-1 ląstelės: šiame moksliniame straipsnyje trumpai aprašomi DLD-1 ląstelių kultivavimo reikalavimai, įskaitant terpes ir kultivavimo sąlygas. Be to, jis gali padėti susipažinti su DLD-1 ląstelėms taikomu transfekcijos protokolu.
Šiose nuorodose pateikiamas DLD-1, žmogaus kilmės storosios žarnos vėžio ląstelių, kultivavimo protokolas.
- DLD-1 ląstelių linija: Šioje svetainėje pateikiama pagrindinė informacija apie DLD-1 ląstelių liniją. Ji padės jums susipažinti su įvairiais DLD-1 ląstelių kultivavimo protokolais, įskaitant subkultivavimą ir kriokonservuotų bei besidauginančių kultūrų tvarkymą.
Nuorodos
- Gavrilas, L.I., et al., Proapoptoziniai genai kaip nauji taikiniai vienam ir kombinuotam gydymui resveratrolu ir kurkuminu storosios žarnos vėžio atveju. Food & function, 2019. 10(6): p. 3717-3726.
- Takeda, T., et al., PI3K/Akt/YAP signalizacija skatina DLD-1 storosios žarnos vėžio ląstelių migraciją ir invaziją. Oncology Letters, 2022. 23(4): p. 1-9.
- Farajzadeh, N., et al., Naujų silicio ftalocianinų priešvėžinis poveikis storosios žarnos adenokarcinomos ląstelių linijai (DLD-1). New Journal of Chemistry, 2022. 46(41): p. 19863-19873.
- An, B.C. ir kt., Probiotikų kilmės P8 baltymo priešvėžinis poveikis storosios žarnos vėžio ląstelių linijai DLD-1. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(12): p. 9857.