Calu-3 ląstelių linija

Calu-3 ląstelės - tai žmogaus išvesta kvėpavimo takų epitelio ląstelių linija, atstovaujanti nesmulkialąstelinei plaučių karcinomai. Jos plačiai naudojamos biomedicininiuose tyrimuose, kuriuose tiriama plaučių vėžio biologija, kvėpavimo takų ligos, šeimininko ir patogenų sąveika bei vaistų pernešimas kvėpavimo takuose. Be to, jos naudojamos kuriant kelių kvėpavimo takų ligų gydymo būdus.

Šiame straipsnyje rasite išsamių žinių apie Calu-3 ląstelių liniją. Čia sužinosite:

Calu-3 ląstelių kilmę ir bendrąsias savybes
Calu-3 ląstelių linija: Informacija apie kultivavimą
Calu-3 ląstelių privalumus ir trūkumus
Calu-3 ląstelių linijos taikymą moksliniuose tyrimuose
Calu-3 ląstelės: Mokslinės publikacijos
Calu-3 ląstelių šaltiniai: Calu-3-3 šaltiniai: protokolai, vaizdo įrašai ir kt

1. Calu-3 ląstelių kilmė ir bendrosios savybės

Pagrindinė informacija, kurios jums reikia apie ląstelių liniją, yra jos kilmė ir bendrosios savybės. Tai padės jums apsispręsti dėl jos panaudojimo jūsų mokslinių tyrimų darbe. Šis skyrius padės jums sužinoti šią būtiną informaciją apie Calu-3 ląstelių liniją. Ją sudarys: Kas yra CALU-3 ląstelių linija? Kokia yra Calu-3 ląstelių morfologija? Kokia yra Calu-3 ląstelių kilmė?

Calu-3 ląstelės buvo gautos iš plaučių adenokarcinoma sergančio baltaodžio (25 metų amžiaus) vyro pleuros išskyrų (metastazių vieta). Šią ląstelių liniją 1975 m. sukūrė Jorgenas Foghas ir Germainas Trempe iš Memorial Sloan Kettering vėžio centro.
Calu-3 ląstelių morfologija panaši į epitelio.
Calu-3 ląstelių dydis svyruoja nuo 8-9 iki 20 mikronų skersmens.
Jos turi K-RAS (G13D), TP53 ir CDKN2A genų mutacijas ir išreiškia laukinio tipo EGFR.

A549 ir Calu-3

A549 ir Calu-3 ląstelės yra žmogaus plaučių adenokarcinomos ląstelių linijos, tačiau joms būdingos skirtingos savybės. Pagrindinis skirtumas tarp Calu-3 ir A549 ląstelių modelių yra gleivių sluoksnio storis. Calu-3 ląstelės suformuoja plonesnį gleivių sluoksnį, taip modeliuodamos proksimalinį kvėpavimo takų epitelį. Kita vertus, A549 ląstelės neturi šios savybės ir yra tinkamesnės distalinių kvėpavimo takų fiziologinei struktūrai atvaizduoti [1].

Bronchų vizualizacija sergant bronchų astma. Astma yra plaučių liga, kai kvėpavimo takai yra susiaurėję, patinę ir užkimšti gleivių pertekliumi, todėl atsiranda tipiškų simptomų, pavyzdžiui, dusulys.

2. Calu-3 ląstelių linija: Kultivavimo informacija

Šis skyrius padės sužinoti pagrindinius Calu-3 ląstelių linijos kultivavimo aspektus. Čia aptarsime: Koks yra Calu-3 ląstelių padvigubėjimo laikas? Kas yra Calu-3 ląstelių terpė? Koks yra Calu-3 ląstelių kultivavimo protokolas? Kaip auginti Calu-3 ląsteles?

Pagrindiniai Calu-3 ląstelių kultivavimo aspektai

Padvigubėjimo laikas:	Calu-3 ląstelių padvigubėjimo laikas yra maždaug 35 valandos.
Prigludusios arba suspenduotos:	Calu-3 yra adherentinė plaučių adenokarcinomos ląstelių linija.
Padalijimo santykis:	Calu-3 ląstelių linijos dalijimo santykis yra nuo 1:2 iki 1:4. Ląstelės subkultūrizuojamos; ląstelės skalaujamos 1 x fosfatinio buferinio fiziologinio tirpalo (PBS) tirpalu ir beveik 10 min. inkubuojamos su Accutase (perėjimo tirpalu) aplinkos temperatūroje. Po to įpilama šviežios ląstelių terpės ir atsiskyrusios ląstelės centrifuguojamos. Ląstelių granulės atsargiai resuspenduojamos ir ląstelės paskirstomos į kolbą su šviežia auginimo terpe.
Augimo terpė:	Calu-3 ląstelėms auginti naudojama EMEM terpė, kurioje yra 10 % FBS, 2 mM L-glutamino, 1,5 g/l NaHCO3, EBSS, 1 mM natrio piruvato ir NEAA. Calu-3 ląstelių terpė turėtų būti keičiama 2-3 kartus per savaitę.
Augimo sąlygos:	Calu-3 ląstelės auginamos drėkinamame inkubatoriuje 37 °C temperatūroje, esant 5 % CO2.
Laikymas:	Užšaldytas ląsteles reikia laikyti skysto azoto garų fazėje arba žemesnėje nei -150 °C temperatūroje, kad būtų išsaugotas ląstelių gyvybingumas ilgesnį laiką.
Šaldymo procesas ir terpė:	CM-1 arba CM-ACF šaldymo terpė daugiausia naudojama Calu-3 plaučių ląstelių linijai užšaldyti. Kad būtų išsaugotas ląstelių gyvybingumas ir jos nepatirtų šoko, ląstelės užšaldomos lėtai, per minutę temperatūra sumažėja tik 1 °C.
Atšildymo procesas:	Ląstelės atšildomos įdėjus buteliuką į vandens vonelę, kurioje iš anksto nustatyta 37 °C temperatūra, maždaug 1 minutei arba tol, kol lieka nedidelis ledo gabalėlis. Įpilama šviežios terpės ir ląstelės centrifuguojamos, kad būtų pašalinti šaldymo terpės komponentai. Po to ląstelių granulės resuspenduojamos ir ląstelės supilamos į naują kolbą su augimo terpe.
Biologinės saugos lygis:	Calu-3 ląstelių linijai apdoroti būtinos 1 biologinės saugos lygio laboratorinės sąlygos.

Calu-3 ląstelės skirtingose stadijose, išryškinant tipiškus salelės pavidalo sulipusius telkinius.

3. Calu-3 ląstelių privalumai ir trūkumai

Kaip ir kitos žmogaus ląstelių linijos, Calu-3 ląstelės turi savų privalumų ir trūkumų. Čia aptarsime keletą svarbiausių.

Privalumai

In vitro kvėpavimo takų epitelio modelis:
Calu-3 ląstelės yra veiksmingas kvėpavimo takų epitelio in vitro modelis. Jos atspindi žmogaus kvėpavimo takų gleivinės savybes, todėl galima atlikti vaistų pernešimo, šeimininko ir patogeno sąveikos tyrimus ir mucino gamybos tyrimus.
Poliarizacija:
Calu-3 ląstelės sudaro poliarizuotus monosluoksnius, todėl jos plačiai naudojamos vaistų pernešimui ir šeimininko ir patogeno sąveikai tirti realesnėmis sąlygomis.

Trūkumai

Vėžio ląstelių linija:
Calu-3 ląstelės buvo gautos iš plaučių adenokarcinomos, todėl svarbu atkreipti dėmesį, kad jos gali nevisiškai atspindėti sveiką plaučių audinį. Tyrėjai turėtų į tai atsižvelgti, naudodami jas kaip modelį tyrimuose.

4. Calu-3 ląstelių linijos taikymas moksliniuose tyrimuose

Calu-3 galima taikyti biomedicininiuose tyrimuose. Šioje straipsnio dalyje bus nušviestos kelios perspektyviausios iš jų.

Kvėpavimo takų ligų tyrimai: Calu-3 plaučių ląstelės naudojamos tiriant įvairias kvėpavimo takų ligas ar sutrikimus, pavyzdžiui, cistinę fibrozę, astmą ir lėtinę obstrukcinę plaučių ligą (LOPL). Chiara Papi ir kolegų atliktame tyrime buvo tiriamas antimiR-101-3p peptido-nukleino rūgšties (PNA) poveikis nukreipiant miRNA-101-3p, naudojant Calu-3 cistinės fibrozės in vitro modelį. Tyrimo metu nustatyta, kad gydymas PNA turi tendenciją didinti cistinės fibrozės transmembraninio laidumo reguliatoriaus (CFTR) geno ekspresiją, o tai leidžia manyti, kad tai galėtų būti potenciali cistinės fibrozės ir su ja susijusių sutrikimų gydymo strategija [2].
Vaistų kūrimas: Calu-3 ląstelės naudojamos kaip modelis bandant ir kuriant vaistus nuo kelių kvėpavimo takų ligų. Be to, šios ląstelės taip pat naudojamos tiriant vaistų pernešimą per kvėpavimo takų epitelį. Pavyzdžiui, 2021 m. atlikto tyrimo metu buvo tiriamas Andrographis paniculata augalo ekstrakto ir jo biologiškai aktyvaus andrografolido antivirusinis aktyvumas Calu-3 ląstelių sars-cov-2 infekcijai [3].
Šeimininko ir patogeno sąveika: Calu-3 ląstelės idealiai tinka patogenų sąveikai su kvėpavimo takų epiteliu tirti ir padeda suprasti kvėpavimo takų infekcijas, tokias kaip SARS-CoV-2. Pavyzdžiui, Byoung Kwon Park su kolegomis tyrė Calu-3 ir Vero ląstelių reakcijas ir viruso gamybą reaguojant į SARS-CoV-2 infekciją [4].

650,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 305032

5. Calu-3 ląstelės: Mokslinės publikacijos

Toliau pateikiama keletas įdomių ir dažnai cituojamų mokslinių tyrimų, kuriuose naudojamos Calu-3 ląstelės:

Anglies monoksidą atpalaiduojanti molekulė-2 slopina proliferaciją, migraciją, invaziją ir skatina apoptozę nesmulkialąstelinio plaučių vėžio Calu-3 ląstelėse

Šis tyrimas 2018 m. paskelbtas Europos medicinos ir farmakologijos mokslų apžvalgoje. Tyrimo metu pasiūlyta, kad anglies monoksidą atpalaiduojančios molekulės-2 (CORM-2) skatina nesmulkialąstelinio plaučių vėžio (Calu-3) ląstelių apoptozę ir slopina jų dauginimąsi, migraciją ir invaziją.

Calu-3 epitelio ląstelės pasižymi skirtingomis imuninėmis ir epitelio barjero reakcijomis nei šviežiai izoliuotos pirminės nosies epitelio ląstelės in vitro

Šiame "Clinical and Translational Allergy" (2018 m.) paskelbtame tyrime lyginami Calu-3 ląstelių linijos ir šviežiai išaugintų pirminių nosies epitelio ląstelių imuniniai ir epitelio barjeriniai atsakai.

Chininas slopina žmogaus ląstelių linijų užsikrėtimą SARS-CoV-2 virusu

Šiame straipsnyje žurnale "Viruses" (2021 m.) siūloma chininą naudoti kaip galimą SARS-CoV-2 infekcijos gydymo būdą, įvertinant jo poveikį skirtingoms virusu infekuotoms ląstelių linijoms, pavyzdžiui, Calu-3.

Didelis D-gliukozės kiekis skatina ACE2 raišką per GLUT1 žmogaus kvėpavimo takų epitelio ląstelių linijoje Calu-3

Šiame BMC Molecular and Cell Biology (2022) paskelbtame tyrime siūloma, kad didelis D-gliukozės kiekis skatina Calu-3 ląstelių ACE2 raišką reguliuojant GLUT1 geną.

Dolosigranulum pigrum moduliuoja kvėpavimo takų epitelio ląstelių imunitetą prieš SARS-CoV-2

Šiame straipsnyje žurnale Pathogens (2021) buvo nagrinėjamas Dolosigranulum pigrum 040417 imunomoduliacinis poveikis plaučių epitelio ląstelėms. Be to, jame buvo tiriamas šios imunobiotinės bakterijos potencialas apsaugant nuo SARS-CoV-2 infekcijos.

6. Calu-3 ląstelių ištekliai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt

Yra daug internetinių šaltinių apie Calu-3 ląsteles, kuriuose pateikiama informacija, susijusi su ląstelių kultivavimu ir transfekcija.

Calu-3 ląstelių transfekcijos protokolas: Šis šaltinis suteiks svarbių žinių apie Calu-3 ląstelių transfekciją.
Calu-3 ląstelių transfekcija: Šiame vaizdo vadove žingsnis po žingsnio pateikiama informacija apie in vitro Calu-3 transfekcijos protokolą.

Čia minimas Calu-3 ląstelių auginimo protokolas.

Calu-3 ląstelės: Šiame dokumente pateikiama informacija apie Calu-3 ląstelių terpę ir subkultūravimo arba pasaugojimo protokolą.

Nuorodos

Wiese-Rischke, C., R. S. Murkar ir H. Walles, Biologiniai žmogaus apatinių kvėpavimo takų modeliai - iššūkiai ir specialūs reikalavimai žmogaus 3D barjeriniams modeliams, skirtiems biomedicininiams tyrimams. Farmacija, 2021 m. 13(12).
Fabbri, E., et al. žmogaus kvėpavimo takų epitelio Calu-3 ląstelių gydymas peptidine nukleino rūgštimi (PNA), nukreipta į mikroRNA miR-101-3p, yra susijęs su padidėjusia cistinės fibrozės transmembraninio laidumo reguliatoriaus () geno ekspresija. European Journal of Medicinal Chemistry, 2021. 209: p. 112876.
Sa-Ngiamsuntorn, K., et al. anti-SARS-CoV-2 Andrographis paniculata ekstrakto ir jo pagrindinio komponento andrografolido aktyvumas žmogaus plaučių epitelio ląstelėse ir citotoksiškumo vertinimas pagrindinių organų ląstelių atstovams. Journal of natural products, 2021. 84(4): p. 1261-1270.
Park, B.K., et al., Differential Signaling and Virus Production in Calu-3 Cells and Vero Cells upon SARS-CoV-2 Infection (Skirtingas signalų perdavimas ir viruso gamyba Calu-3 ląstelėse ir Vero ląstelėse po SARS-CoV-2 infekcijos ). Biomol Ther (Seulas), 2021. 29(3): p. 273-281.