BEAS-2B ląstelės - BEAS-2B ląstelės kvėpavimo takų ligų tyrimuose: Išsamus vadovas
BEAS-2B yra imortalizuota ir netumorigeninė žmogaus plaučių epitelio ląstelių linija. Tai plačiai naudojamas in vitro modelis plaučių ląstelių reakcijai į įvairius kancerogenus ir toksikantus tirti. Be to, tai vertinga mokslinių tyrimų priemonė įvairioms kvėpavimo takų infekcijoms ir ligoms, pavyzdžiui, COVID-19 ir plaučių karcinomai, tirti.
Šiame straipsnyje aptarsime beveik visus BEAS-2B plaučių ląstelių linijos aspektus, įskaitant jos kilmę, informaciją apie ląstelių kultūrą, privalumus, trūkumus ir taikymą moksliniuose tyrimuose. Ypač daug dėmesio skirsime:
- BEAS-2B ląstelių kilmę ir bendrąsias savybes
- BEAS-2B ląstelių liniją: Kultivavimo informacija
- BEAS-2B ląstelių privalumus ir trūkumus
- BEAS-2B ląstelių linijos taikymą moksliniams tyrimams
- BEAS-2B ląstelės: Mokslinės publikacijos
- Ląstelių auginimo protokolai
1. BEAS-2B ląstelių kilmė ir bendrosios savybės
Pirmas dalykas, kurio reikia ieškoti ląstelių linijoje, yra jos kilmė ir bendrosios savybės. Čia sužinosite svarbiausias žmogaus bronchų epitelio ląstelių BEAS-2B savybes ir kilmę. Išmoksite: Kas yra BEAS-2B plaučių ląstelių linija? Kokio tipo ląstelės yra Beas 2B? Kokia BEAS-2B ląstelių kilmė?
- BEAS-2B, bronchų epitelio ląstelių liniją, 1988 m. iš nevėžinio žmogaus plaučių audinio sukūrė Curtis C. Harris grupė [1].
- BEAS-2B ląstelės pasižymi į epitelį panašia morfologija.
HBEpC ir BEAS-2B
HBEpC yra pirminės žmogaus bronchų epitelio ląstelės. Panašiai kaip BEAS-2B, jos yra normalios žmogaus bronchų epitelio ląstelės. Tačiau jų gyvavimo trukmė yra ribota, palyginti su imortalizuotomis BEAS-2B. Abi ląstelių linijos gali būti naudojamos plaučių biologijai, toksikologijai ir ligų modeliavimui tirti.
2.bEAS-2B ląstelių linija: Auginimo informacija
Ląstelių linijos kultivavimo informacija gali palengvinti jūsų darbą su ja. Šiame straipsnio skyriuje sužinosite visus pagrindinius BEAS-2B plaučių ląstelių linijos kultivavimo pagrindus. Visų pirma sužinosime: Koks yra BEAS-2B padvigubėjimo laikas? Kas yra BEAS-2B terpė? Ar BEAS-2B ląstelių linija yra adherentiška? Kaip auginti BEAS-2B ląsteles?
Pagrindiniai BEAS-2B ląstelių kultivavimo aspektai
|
Padvigubėjimo laikas: |
BEAS-2B populiacijos padvigubėjimo laikas yra maždaug 26 valandos. |
|
Prigludusios arba suspensijoje: |
BEAS-2B yra epitelio tipo adherentinių ląstelių linija. |
|
Ląstelių tankis: |
Rekomenduojamas ląstelių tankis BEAS-2B ląstelių linijai yra 1-2 ×104 ląstelės/cm2. Adheravusios BEAS-2B ląstelės nuplaunamos fosfatiniu buferiniu fiziologiniu tirpalu ir kelias minutes inkubuojamos su "Accutase" aplinkos temperatūroje. Kai ląstelės disocijuoja, įpilama šviežios terpės ir ląstelės surenkamos centrifuguojant. Surinktos ląstelės atsargiai resuspenduojamos ir supilamos į naują kolbą auginimui. |
|
Augimo terpė: |
BEAS-2B plaučių ląstelių linijai kultivuoti naudojama BEGM (Bronchų epitelio ląstelių augimo terpė) terpė, kurioje yra 10 % galvijų fetalinio serumo. Medžiagą reikia keisti kas 2-3 dienas. |
|
Augimo sąlygos: |
BEAS-2B kultūra palaikoma 37 °C temperatūroje, drėkinamame inkubatoriuje, kuriame nuolat tiekiamas 5 % CO2. |
|
Laikymas: |
Užšaldytus BEAS-2B ląstelių buteliukus galima laikyti skysto azoto garų fazėje arba elektriniame šaldiklyje žemesnėje nei -150 °C temperatūroje. |
|
Šaldymo procesas ir terpė: |
BEAS-2B plaučių ląstelių linijai užšaldyti naudojama CM-1 arba CM-ACF šaldymo terpė. Ląstelės užšaldomos leidžiant temperatūrai sumažėti tik 1 °C per minutę, kad būtų apsaugotas ląstelių gyvybingumas. Toks metodas vadinamas lėtuoju šaldymu. |
|
Atšildymo procesas: |
Užšaldytos arba kriokonservuotos BEAS-2B kultūros 40-60 sekundžių atšildomos 37 °C temperatūros vandens vonelėje su antimikrobine medžiaga. Po to ląstelės sumaišomos su terpe ir gali būti tiesiogiai auginamos naujose kolbose arba gali būti centrifuguojamos, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai. Tada surinktos ląstelės resuspenduojamos ir kultivuojamos. Pirmuoju atveju užšaldymo terpė pašalinama po 24 valandų. |
|
Biologinės saugos lygis: |
BEAS-2B kultūroms tvarkyti reikalingos 1 biologinės saugos lygio laboratorijos. |
3.bEAS-2B ląstelių privalumai ir trūkumai
Kaip ir kitos ląstelių linijos, BEAS-2B ląstelės taip pat turi tam tikrų privalumų ir trūkumų. Kai kurie iš jų aptariami toliau.
Privalumai
BEAS-2B ląstelių linijos privalumai yra šie:
|
Nemortizuotų ląstelių linija |
BEAS-2B žmogaus bronchų epitelio ląstelių linija buvo imortalizuota. Todėl ji toliau auga ir nesensta. Dėl šios BEAS-2B ląstelių savybės nereikia pakartotinai išgauti pirminių žmogaus plaučių epitelio ląstelių, kurių gyvavimo trukmė trumpesnė. |
|
Lengva auginti |
BEAS-2B kultūras lengva palaikyti. Ląstelės lengvai auga ir dauginasi standartinėmis kultūros sąlygomis. Nėra jokių įmantrių ar sudėtingų ląstelių kultivavimo reikalavimų. |
|
Žmogaus kilmė |
BEAS-2B ląstelių linija yra žmogaus kilmės ir svarbi. Todėl ji yra idealus in vitro modelis žmogaus kvėpavimo takų epitelio ląstelių reakcijoms, elgsenai ir procesams tirti. |
Trūkumai
Su BEAS-2B plaučių ląstelių linija susiję šie trūkumai:
|
Transformuotos žmogaus plaučių epitelio ląstelės |
BEAS-2B ląstelės yra transformuotos Ad12-SV40 2B virusu, todėl jų elgsena ir atsakas gali pasikeisti, palyginti su originaliomis iš žmogaus plaučių audinio gautomis bronchų epitelio ląstelėmis. |
4.bEAS-2B ląstelių linijos taikymas moksliniams tyrimams
BEAS-2B ląstelių linija gali būti naudojama biomedicininiuose tyrimuose. Kai kurie dažniausi BEAS-2B ląstelių taikymo būdai yra šie:
- Toksikologija: BEAS-2B ląstelės dažnai naudojamos įvairių toksinų, aplinkos teršalų ir cheminių medžiagų genotoksiškumui ir citotoksiškumui tirti. Mokslininkai šią bronchų epitelio ląstelių liniją taiko vertindami šių medžiagų žalingą poveikį plaučių sveikatai. Be to, jie taip pat tiria pagrindinius molekulinius mechanizmus. Pavyzdžiui, 2021 m. atliktame tyrime buvo vertinamas metalinio kadmio toksiškumas BEAS-2B ląstelių linijoje. Tyrimo rezultatai atskleidė, kad kadmis sukėlė BEAS-2B plaučių ląstelių linijos ląstelių mirtį ir mitochondrijų pažeidimą moduliuojant MAPK signalinį kelią [2]. Kitame tyrime BEAS-2B ląstelių linija naudota vertinant cinko oksido nanodalelių toksiškumą esant oksidaciniam stresui [3].
- Kvėpavimo takų ligų modeliavimas: BEAS-2B ląstelių linija yra puikus mokslinių tyrimų įrankis ir in vitro modelis tiriant kvėpavimo takų ligas, tokias kaip lėtinė obstrukcinė plaučių liga (LOPL), astma, plaučių vėžys ir virusinės infekcijos, tokios kaip SARS-CoV-2. Mokslininkai yra linkę sukelti su liga susijusias sąlygas BEAS-2B ląstelių linijoje ir tirti pagrindinius ląstelinius ir molekulinius mechanizmus. Tai padeda nustatyti galimus vaistų taikinius ir kurti individualizuotus gydymo būdus. 2022 m. atliktuose tyrimuose buvo naudojama BEAS-2B ląstelių linija ir tiriamas estrogeno ir jo receptorių vaidmuo SARS-CoV-2 infekcijai. Rezultatai atskleidė, kad didesnė estrogeno receptoriaus GPER1 raiška mažina BEAS-2B SARS-CoV-2 viruso krūvį. Todėl jis gali būti susijęs su SARS-CoV-2 viruso infekcija arba replikacija [4].
5.bEAS-2B ląstelės: Mokslinės publikacijos
Toliau pateikiama keletas įdomių ir dažniausiai cituojamų mokslinių tyrimų, kuriuose naudojamos BEAS-2B ląstelės.
Grafeno toksiškumas normalioms žmogaus plaučių ląstelėms (BEAS-2B)
Šis tyrimas buvo paskelbtas 2011 m. žurnale "Journal of Biomedical Nanotechnology". Tyrime teigiama, kad grafito oksidas sukelia apoptozę ir citotoksiškumą normalioje bronchų epitelio ląstelių linijoje (BEAS-2B).
Šis mokslinis straipsnis paskelbtas žurnale "Journal of Microbiology and Biotechnology" (2014 m.). Šiame tyrime nagrinėtas flavonoido naringenino terapinis potencialas BEAS-2B ląstelių linijoje. Gauti rezultatai rodo, kad naringeninas apsaugo BEAS-2B plaučių ląsteles nuo parakvato sukelto toksiškumo ar oksidacinės pažaidos.
Šis tyrimas buvo paskelbtas žurnale "Inhalation Toxicology" (2011 m.). Jame mokslininkai įvertino magnetinių nanodalelių su amorfinėmis silicio dioksido dangomis toksinį poveikį BEAS-2B ląstelių linijai in vitro.
Šiame žurnale Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) paskelbtame straipsnyje siūloma, kad ursodeoksicholio rūgštis gali stabdyti kvėpavimo takų epitelio ląstelių nenormalią migraciją ir užkirsti kelią žalai, kurią sukelia SARS-CoV-2 smailiojo baltymo ir ACE-2 sąveika. Taigi ji gali padėti atkurti epitelio bazinį sluoksnį.
Radono poveikis miR-34a sukeltai žmogaus bronchų epitelio BEAS-2B ląstelių apoptozei
Šis tyrimas buvo paskelbtas 2019 m. žurnale "Journal of Toxicology and Environmental Health". Tyrimo išvadose teigiama, kad lėtinis radono poveikis gali skatinti žmogaus bronchų epitelio ląstelių (BEAS-2B) kancerogenezę aktyvuojant mikroRNA-34a.
6.ląstelių kultūrų protokolai
BEAS-2B ląstelių auginimo protokolas nurodytas čia.
- BEAS-2B subkultūrinimas: Šis dokumentas padės jums sužinoti apie BEAS-2B terpę ir subkultūravimo procedūras.
- BEAS-2B ląstelių linija: Šioje svetainėje pateikiama visa pagrindinė informacija, kurios reikia norint pradėti dirbti su BEAS-2B ląstelių linija, įskaitant jos terpę ir proliferuojančių bei kriokonservuojamų kultūrų tvarkymo protokolus.
Nuorodos
- Han, X. ir kt., Žmogaus plaučių epitelio BEAS-2B ląstelės pasižymi mezenchiminių kamieninių ląstelių savybėmis. PLoS One, 2020. 15(1): p. e0227174.
- Cao, X., et al., Cadmium induced BEAS-2B cells apoptosis and mitochondria damage via MAPK signal way. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., Toxicity of cinc oxide (ZnO) nanoparticles on human bronchial epithelial cells (BEAS-2B) is accentuated by oxidative stress. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, A. J. ir kt. estrogenų receptoriaus GPER1 perteklinė ekspresija ir gydymas G1 sumažina SARS-CoV-2 infekciją BEAS-2B bronchų ląstelėse. Molekulinė ir ląstelinė endokrinologija, 2022. 558: p. 111775.