BEAS-2B ląstelės – BEAS-2B ląstelės kvėpavimo takų ligų tyrimuose: išsamus vadovas
BEAS-2B yra nemirtinga ir netumorogeninė žmogaus plaučių epitelio ląstelių linija. Tai plačiai naudojamas in vitro modelis, skirtas tirti plaučių ląstelių reakciją į įvairius kancerogenus ir toksines medžiagas. Be to, tai vertinga tyrimo priemonė, skirta tirti įvairias kvėpavimo takų infekcijas ir ligas, pvz., COVID-19 ir plaučių karcinomas.
- Auginimo terpė
- BEAS-2B plaučių ląstelių linijai auginti naudojama BEGM (bronchial epitelio ląstelių auginimo terpė), kurioje yra 10 % veršelių serumo. Terpę reikia keisti kas 2–3 dienas.
- Padvigubėjimo laikas
- BEAS-2B populiacijos dvigubėjimo laikas yra maždaug 26 valandos.
- Augimo tipas
- BEAS-2B yra epitelio tipo adhezyvinė ląstelių linija.
- Biologinio saugumo lygis
- BSL-1
- Galima įsigyti iš
- Cytion — Užsisakykite BEAS-2B
Šiame straipsnyje aptarsime beveik visus BEAS-2B plaučių ląstelių linijos aspektus, įskaitant jos kilmę, ląstelių kultūros informaciją, privalumus, trūkumus ir pritaikymą moksliniuose tyrimuose. Visų pirma aptarsime:
- BEAS-2B ląstelių kilmę ir bendras charakteristikas
- BEAS-2B ląstelių linija: informacija apie kultūravimą
- BEAS-2B ląstelių privalumus ir trūkumus
- BEAS-2B ląstelių linijos pritaikymas moksliniuose tyrimuose
- BEAS-2B ląstelės: moksliniai leidiniai
- Ląstelių kultivavimo protokolai
1. BEAS-2B ląstelių kilmė ir bendrosios charakteristikos
Pirmas dalykas, į kurį atkreipiate dėmesį ląstelių linijoje, yra jos kilmė ir bendrosios charakteristikos. Čia sužinosite apie svarbiausias BEAS-2B žmogaus bronchų epitelio ląstelių savybes ir kilmę. Sužinosite: Kas yra BEAS-2B plaučių ląstelių linija? Kokio tipo ląstelės yra BEAS-2B? Kokia yra BEAS-2B ląstelių kilmė?
- BEAS-2B, bronchų epitelio ląstelių linija, buvo sukurta 1988 m. iš nevėžinio žmogaus plaučių audinio Curtis C. Harris grupės [1].
- BEAS-2B ląstelės turi epitelio tipo morfologiją.
HBEpC ir BEAS-2B
HBEpC yra žmogaus bronchų epitelio pirminės ląstelės. Panašiai kaip BEAS-2B, jos yra normalios žmogaus bronchų epitelio ląstelės. Tačiau, palyginti su nemirtingomis BEAS-2B ląstelėmis, jų gyvenimo trukmė yra ribota. Abiejų ląstelių linijų galima naudoti plaučių biologijos, toksikologijos ir ligų modeliavimo tyrimams.
BEAS-2B ląstelių linija: auginimo informacija
Informacija apie ląstelių linijos kultivavimą gali palengvinti jūsų darbą su ja. Šio straipsnio skyriuje sužinosite visus BEAS-2B plaučių ląstelių linijos auginimo pagrindus. Visų pirma, sužinosime: koks yra BEAS-2B ląstelių padvigubėjimo laikas? Kas yra BEAS-2B terpė? Ar BEAS-2B ląstelių linija yra adhezyvi? Kaip auginti BEAS-2B ląsteles?
Svarbiausi BEAS-2B ląstelių auginimo aspektai
Padvigubėjimo laikas:
BEAS-2B populiacijos dvigubėjimo laikas yra maždaug 26 valandos.
Adhezyvinė ar suspensinė:
BEAS-2B yra epitelio tipo adhezyvinė ląstelių linija.
Ląstelių tankis:
Rekomenduojamas BEAS-2B ląstelių linijos tankis yra 1–2 × 104 ląstelių/cm2. Prisijungusios BEAS-2B ląstelės nuplaunamos fosfato buferiniu tirpalu ir inkubuojamos su Accutase kambario temperatūroje keletą minučių. Kai ląstelės atsiskiria, įpilama šviežios terpės, o ląstelės surenkamos centrifugavimo būdu. Surinktos ląstelės atsargiai resuspenduojamos ir supilamos į naują kolbą augimui.
Auginimo terpė:
BEAS-2B plaučių ląstelių linijos kultūrai naudojama BEGM (bronchial epithelium cell growth medium) terpė, kurioje yra 10 % veršelių serumo. Terpę reikia keisti kas 2–3 dienas.
Auginimo sąlygos:
BEAS-2B kultūra laikoma 37 °C temperatūroje drėgname inkubatoriuje, kuriame nuolat tiekiamas 5 % CO2.
Laikymas:
Užšaldyti BEAS-2B ląstelių buteliukai gali būti laikomi skysto azoto garų fazėje arba elektrinėje šaldymo kameroje, kurioje temperatūra yra žemesnė nei -150 °C.
Užšaldymo procesas ir terpė:
BEAS-2B plaučių ląstelių linijai užšaldyti naudojamos CM-1 arba CM-ACF užšaldymo terpės. Ląstelės užšaldomos leidžiant temperatūrai sumažėti tik 1 °C per minutę, siekiant apsaugoti ląstelių gyvybingumą. Šis metodas vadinamas lėtu užšaldymu.
Atšildymo procesas:
Užšaldytos arba kriokonservuotos BEAS-2B kultūros atšildomos 37 °C vandens vonioje, kurioje yra antimikrobinės medžiagos, 40–60 sekundžių. Po to į ląsteles įpilama terpės ir jas galima tiesiogiai kultivuoti naujose kolbose arba centrifuguoti, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai. Tada surinktos ląstelės resuspenduojamos ir kultivuojamos. Pirmuoju atveju užšaldymo terpė pašalinama po 24 valandų.
Biologinio saugumo lygis:
BEAS-2B kultūroms tvarkyti reikalingos 1 biologinio saugumo lygio laboratorijos.
BEAS-2B ląstelių privalumai ir trūkumai
Kaip ir kitos ląstelių linijos, BEAS-2B ląstelės taip pat turi tam tikrų privalumų ir trūkumų. Kai kurie iš jų aptariami toliau.
Privalumai
BEAS-2B ląstelių linijos privalumai yra šie:
Nemirtinga ląstelių linija
Žmogaus bronchų epitelio ląstelių linija BEAS-2B yra nemirtinga. Todėl ji toliau auga, nepasiekdama senatvės. Dėl šios BEAS-2B ląstelių savybės nebereikia pakartotinai išskirti pirminių žmogaus plaučių epitelio ląstelių, kurių gyvenimo trukmė yra trumpesnė.
Lengva auginti
BEAS-2B kultūras lengva prižiūrėti. Ląstelės lengvai auga ir dauginasi standartinėmis kultivavimo sąlygomis. Nėra jokių sudėtingų ar komplikuotų ląstelių kultivavimo reikalavimų.
Žmogaus kilmė
BEAS-2B ląstelių linija yra žmogaus kilmės ir aktualios. Taigi, tai yra idealus in vitro modelis žmogaus kvėpavimo takų epitelio ląstelių reakcijų, elgesio ir procesų tyrimams.
Trūkumai
Su BEAS-2B plaučių ląstelių linija susiję trūkumai yra šie:
Transformuotos žmogaus plaučių epitelio ląstelės
BEAS-2B ląstelės yra transformuotos Ad12-SV40 2B virusu, kuris gali pakeisti jų elgseną ir reakcijas, palyginti su originaliomis žmogaus plaučių audinio bronchų epitelio ląstelėmis.
BEAS-2B ląstelių linijos pritaikymas moksliniuose tyrimuose
BEAS-2B ląstelių linija turi keletą pritaikymų biomedicininiuose tyrimuose. Kai kurie dažniausi BEAS-2B ląstelių pritaikymo atvejai yra:
- Toksikologija: BEAS-2B ląstelės dažnai naudojamos įvairių toksinų, aplinkos teršalų ir cheminių medžiagų genotoksiškumui ir citotoksiškumui tirti. Mokslininkai naudoja šią bronchų epitelio ląstelių liniją, siekdami įvertinti šių medžiagų žalingą poveikį plaučių sveikatai. Be to, jie taip pat tiria pagrindinius molekulinius mechanizmus. Pavyzdžiui, 2021 m. atliktame tyrime buvo vertinamas kadmio metalo toksiškumas BEAS-2B ląstelių linijoje. Tyrimo rezultatai parodė, kad kadmis sukėlė ląstelių mirtį ir mitochondrijų pažeidimus BEAS-2B plaučių ląstelių linijoje, moduliuodamas MAPK signalizacijos kelią [2]. Kitame tyrime BEAS-2B ląstelių linija buvo panaudota cinko oksido nanodalelių toksiškumui įvertinti oksidaciniame strese [3].
- Kvėpavimo takų ligų modeliavimas: BEAS-2B ląstelių linija yra puiki mokslinių tyrimų priemonė ir in vitro modelis kvėpavimo takų ligų, tokių kaip lėtinė obstrukcinė plaučių liga (LOPL), astma, plaučių vėžys ir virusinės infekcijos, pvz., SARS-CoV-2, tyrimams. Mokslininkai paprastai sukelia su liga susijusias sąlygas BEAS-2B ląstelių linijoje ir tiria pagrindinius ląstelių bei molekulių mechanizmus. Tai padeda nustatyti potencialius vaistų taikymo taškus ir kurti individualizuotas terapijas. 2022 m. atliktame tyrime buvo naudojama BEAS-2B ląstelių linija ir tiriamas estrogeno bei jo receptorių vaidmuo SARS-CoV-2 infekcijoje. Rezultatai parodė, kad didesnė GPER1 estrogeno receptoriaus ekspresija sumažina BEAS-2B SARS-CoV-2 virusinę apkrovą. Todėl jis gali būti susijęs su SARS-CoV-2 virusine infekcija ar replikacija [4].
5. BEAS-2B ląstelės: moksliniai straipsniai
Toliau pateikiami keli įdomūs ir dažniausiai cituojami moksliniai tyrimai, kuriuose nagrinėjamos BEAS-2B ląstelės.
Grafeno toksiškumas normaliose žmogaus plaučių ląstelėse (BEAS-2B)
Šis tyrimas buvo paskelbtas 2011 m. žurnale „Journal of Biomedical Nanotechnology“. Tyrime teigiama, kad grafito oksidas sukelia apoptozę ir citotoksiškumą normaliose bronchų epitelio ląstelių linijose (BEAS-2B).
Šis mokslinis straipsnis buvo paskelbtas žurnale „Journal of Microbiology and Biotechnology“ (2014 m.). Šiame tyrime buvo tiriamas flavonoido naringenino terapinis potencialas BEAS-2B ląstelių linijoje. Rezultatai rodo, kad naringeninas apsaugo BEAS-2B plaučių ląsteles nuo paraquato sukelto toksiškumo ar oksidacinės žalos.
Šis tyrimas buvo paskelbtas žurnale „Inhalation Toxicology“ (2011 m.). Jame mokslininkai įvertino magnetinių nanodalelių su amorfinio silicio dioksido danga toksiškumą in vitro BEAS-2B ląstelių linijoje.
Šiame straipsnyje, paskelbtame žurnale „Biomedicine & Pharmacotherapy“ (2022 m.), teigiama, kad ursodeoksicholinė rūgštis gali stabdyti nenormalų kvėpavimo takų epitelio ląstelių migraciją ir užkirsti kelią žalai, kurią sukelia SARS-CoV-2 spike baltymo ir ACE-2 sąveika. Taigi, ji gali padėti atkurti epitelio bazinį sluoksnį.
Radono poveikis miR-34a sukeltam apoptozei žmogaus bronchų epitelio BEAS-2B ląstelėse
Šis tyrimas buvo paskelbtas 2019 m. žurnale „Journal of Toxicology and Environmental Health“. Tyrimo rezultatai rodo, kad ilgalaikis radono poveikis gali skatinti kancerogenezę žmogaus bronchų epitelio ląstelėse (BEAS-2B), aktyvuodamas mikroRNR-34a.
Ląstelių kultūros protokolai
Čia pateikiamas BEAS-2B ląstelių ląstelių kultūros protokolas.
- BEAS-2B subkultūravimas: Šis dokumentas padės jums susipažinti su BEAS-2B terpėmis ir subkultūravimo procedūromis.
- BEAS-2B ląstelių linija: šioje svetainėje pateikiama visa pagrindinė informacija, reikalinga norint pradėti dirbti su BEAS-2B ląstelių linija, įskaitant terpius ir protokolus, skirtus dauginimosi ir kriokonservuotų kultūrų tvarkymui.
Nuorodos
- Han, X., et al., Žmogaus plaučių epitelio BEAS-2B ląstelės pasižymi mezenchiminių kamieninių ląstelių savybėmis. PLoS One, 2020. 15(1): p. e0227174.
- Cao, X., et al., Kadmis sukėlė BEAS-2B ląstelių apoptozę ir mitochondrijų pažeidimus per MAPK signalizacijos kelią. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., Cinko oksido (ZnO) nanodalelių toksiškumas žmogaus bronchų epitelio ląstelėms (BEAS-2B) sustiprėja dėl oksidacinio streso. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, A.J. ir kt., Estrogeno receptoriaus GPER1 perprodukcija ir gydymas G1 mažina SARS-CoV-2 infekciją BEAS-2B bronchų ląstelėse. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: p. 111775.