B16 ląstelės - pagrindinis B16 melanomos ląstelių vadovas onkologiniuose tyrimuose

B16 yra pelių kilmės odos vėžio (melanomos) ląstelių linija. Ši ląstelių linija yra veiksmingas in vitro modelis žmogaus odos vėžiui tirti. Ji dažnai naudojama tiriant kietųjų navikų formavimąsi ir vėžinių ląstelių metastazavimą.

Šis straipsnis padės jums suprasti melanomos ląstelių linijos B16 pagrindus. Konkrečiai jame bus aptarti šie dalykai:

1.bendrosios B16 ląstelių linijos savybės ir kilmė

Šioje straipsnio dalyje bus aptariamos B16 melanomos ląstelių linijos būdingos savybės. Sužinosite atsakymus į šiuos dažniausiai užduodamus klausimus. Pavyzdžiui, kas yra B16 vėžio ląstelių linija? Iš kur gaunamos B16 ląstelės? Koks yra B16 ląstelių dydis?

B16 ląstelių linija buvo sukurta 1954 m. Šios ląstelės buvo gautos iš C57BL/6J pelių, kurioms Džeksono laboratorijose Meino valstijoje spontaniškai atsirado odos navikas.
Tai melaniną gaminančios epitelinės ląstelės, galinčios metastazuoti blužnyje, kepenyse ir plaučiuose.
Melanomos B16 ląstelės auga kaip monosluoksniai ir pasižymi epitelio ir verpstės formos ląstelių morfologija.
B16 ląstelių linijos dydis yra maždaug 15,4 μm.
Egzistuoja skirtingi B16 ląstelių subklonai, įskaitant B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 ir B16F10. Šios sublinijos skiriasi nuo motininių B16 ląstelių ir išlaiko kai kuriuos specifinius bruožus. Pavyzdžiui, skiriasi jų morfologija, ląstelių dydis ir kitos savybės. B16F10 pasižymi dideliu gebėjimu metastazuoti plaučiuose, o B164A5 yra agresyviausia odos vėžio ląstelių linija, palyginti su B16F10, B16-GMCSF ir B16FLT3 [1].

3D animacija, kurioje stambiu planu matomas augantis odos vėžys, pavyzdžiui, piktybinė melanoma, sukelianti aplinkinių audinių uždegimą.

2.informacija apie B16 ląstelių linijos kultivavimą

Prieš palaikydami ar kultivuodami ląstelių liniją, galite ieškoti pagrindinės informacijos apie padvigubėjimo laiką, ląstelių tipą, auginimo terpę, kultivavimo sąlygas ir kt. Šiame skyriuje pateikiama visa reikalinga informacija apie B16 ląstelių kultivavimą.

Pagrindiniai B16 ląstelių kultivavimo punktai

Populiacijos padvigubėjimo laikas:	Apskaičiuota, kad vidutinė B16 ląstelių populiacijos padvigubėjimo trukmė yra 24 valandos.
Prisitvirtinusios arba suspensijoje:	B16 ląstelės yra prigludusios ir auga monosluoksniais.
Sėjimo tankis:	B16 ląsteles rekomenduojama sėti 1-2 x¹⁰⁴ ^{ląstelių/cm2} ląstelių tankio. Prisitvirtinusios B16 ląstelės nuplaunamos 1 x PBS ir disocijuojamos nuo paviršiaus naudojant Accutase tirpalą. Ląstelės centrifuguojamos, o ląstelių granulės resuspenduojamos į augimo terpę. Vėliau šios ląstelės išpilstomos į naują kolbą auginimui.
Augimo terpė:	B16 ląstelės auginamos EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) terpėje, kurioje yra 10 % galvijų vaisiaus serumo (FBS). Auginimo terpė turėtų būti atnaujinama 2-3 kartus per savaitę.
Augimo sąlygos:	B16 ląstelių linijai auginti naudojamas drėkinamasis inkubatorius su 5 %_CO2 ir 37 °C temperatūra.
Laikymas:	Šios ląstelės laikomos žemesnėje nei -150 °C temperatūroje arba skysto azoto garų fazėje, kad būtų apsaugotas ląstelių gyvybingumas.
Šaldymo procesas ir terpė:	B16 ląstelėms užšaldyti naudojama CM-1 arba CM-ACF užšaldymo terpė, naudojant lėtą užšaldymo procesą.
Atšildymo procesas:	Užšaldytos B16 ląstelės atšildomos 37 °C temperatūroje vandens vonelėje, kurioje yra antimikrobinės medžiagos. Atšildytos ląstelės gali būti tiesiogiai kultivuojamos išpilstant jas į kolbas su augimo terpe. Be to, šios ląstelės gali būti centrifuguojamos, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai, ir tada kultivuojamos naujoje terpėje.
Biologinės saugos lygis:	B16 ląstelių linija turėtų būti tvarkoma arba laikoma pirmojo biologinės saugos lygio laboratorijoje.

Pusiau susiliejantis B16 melanomos ląstelių sluoksnis 10x ir 20x padidinimuose.

3. b16 ląstelių linija: Privalumai ir trūkumai

Kaip ir kitos ląstelių linijos, B16 turi unikalų privalumų ir trūkumų derinį. Kai kurie svarbiausi šios melanomos ląstelių linijos privalumai ir trūkumai išvardyti šiame skyriuje.

Privalumai

B16 yra pirmoji veiksminga pelių priemonė, plačiai naudojama metastazių tyrimams dėl savo privalumų. Kai kurie šios odos vėžio ląstelių linijos privalumai yra šie:

Lengva auginti	B16 ląstelių liniją lengva auginti mokslinių tyrimų laboratorijose. Ji plačiai naudojama vėžinių ląstelių biologijai, signaliniams keliams tirti ir kt.
Greitas augimas	B16 melanomos ląstelių linija pasižymi dideliu dauginimosi greičiu, todėl ji tinka ląstelių dalijimosi ir augimo procesams tirti.
Tumorigeniškumas	B16 yra tumorigeninė ląstelių linija, pasižyminti į naviką panašiomis savybėmis, tokiomis kaip invazija, migracija ir proliferacija. Ji vertinga tiriant navikų formavimąsi, progresavimą ir metastazes.

Trūkumai

Su B16 ląstelių linija susiję šie trūkumai:

Nėra tinkamos žmogui	Kadangi B16 yra pelės melanomos ląstelių linija, ji gali netiksliai atspindėti žmogaus odos vėžio biologiją, o tai riboja mokslinių tyrimų rezultatų pritaikomumą.
Heterogeniškumas	B16 ląstelės yra heterogeniškos, joms būdingos įvairios genetinės ir fenotipinės savybės toje pačioje kultūroje. Tai gali turėti įtakos rezultatų patikimumui ir atkuriamumui.

4. b16 ląstelių panaudojimas

B16 ląstelių linija plačiai naudojama moksliniuose tyrimuose. Keletas perspektyvių šios ląstelių linijos pritaikymo būdų yra šie:

Navikų biologija: Ši pelių odos vėžio ląstelių linija yra navikinė ir plačiai naudojama siekiant suprasti navikų biologiją. Buvo atlikta keletas tyrimų, kurių metu, naudojant B16 ląsteles, buvo tiriami ląsteliniai mechanizmai, lemiantys navikinių ląstelių augimą, dauginimąsi ir metastazavimą. 2020 m. atliktame moksliniame tyrime B16 ląstelės buvo naudojamos siekiant ištirti ilgųjų nekoduojančių RNR, LncRNA MEG3, vaidmenį melanomos formavimuisi, augimui ir metastazėms. Šio tyrimo metu nustatyta, kad nekoduojanti RNR moduliuoja miRNA-21 / E-Cadherin ašį, skatindama šiuos ląstelių įvykius [2]. Panašiai buvo atliktas tyrimas, kuriuo siekta ištirti galimą Notch1 signalizacijos vaidmenį naviko sukeltoje imunosupresijoje, naudojant B16 ląsteles [3].
Vaistų atradimas: B16 ląstelės naudojamos potencialiam terapiniam kandidatų į vaistus poveikiui patvirtinti ir išbandyti. Atliktas tyrimas, kurio metu, naudojant B16 ląstelių liniją, įvertintas priešvėžinis neogamboginės rūgšties, natūralaus junginio, poveikis. Tyrimo rezultatai atskleidė, kad šis junginys moduliuoja PI3K/Akt/mTOR signalinį kelią ir sukelia vėžinių ląstelių mirtį [4]. Kitame tyrime buvo tiriamas saponino ginsenozido Rg3 antimelanominis poveikis naudojant B16 ląstelių liniją. Tyrimo metu pasiūlyta, kad šis natūralus junginys sukelia priešvėžinį aktyvumą mažindamas ERK ir Akt kelius [5].

430,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 305154

5.mokslinių tyrimų publikacijos su B16 ląstelėmis

Pateikiame keletą svarbių mokslinių tyrimų publikacijų, kuriose naudojama B16 melanomos ląstelių linija.

LncRNA MEG3 skatina melanomos augimą, metastazavimą ir formavimąsi moduliuodama miR-21/E-kadherino ašį

Šioje publikacijoje žurnale "Cancer Cell International" (2020 m.) siūloma, kad ilgoji nekoduojanti RNR MEG3 skatina B16 melanomos ląstelių formavimąsi, augimą ir metastazavimą, moduliuodama miRNA-21/E-kadherino ašį.

Naujas psoraleno darinys-MPFC stiprina melanogenezę per p38 MAPK ir PKA signalinių kelių aktyvinimą B16 ląstelėse

Šis straipsnis 2018 m. paskelbtas žurnale "International Journal of Molecular Medicine". Šiame tyrime buvo tiriamas psoraleno darinio - 4-metil-6-fenil-2H-furo[3,2-g] chromen-2-ono (MPFC) melanogeninis poveikis ir mechanizmai B16 ląstelėse. Tyrime pasiūlyta, kad šis darinys skatina melanogenezę stimuliuodamas PKA ir p38 MAPK ląstelių signalizaciją.

Notch1 signalas melanomos ląstelėse skatino naviko sukeltą imunosupresiją per TGF-β1 reguliavimą

Šis tyrimas buvo paskelbtas 2018 m. žurnale "Journal of Experimental & Clinical Cancer Research". Tyrimo rezultatai rodo, kad Notch1 signalizacijos aktyvavimas B16 ląstelėse gali užkirsti kelią priešvėžiniam imunitetui, didindamas TGF-β1 geno raišką.

Neogamboginė rūgštis sukelia melanomos B16 ląstelių apoptozę per PI3K/Akt/mTOR signalinį kelią

Šį tyrimą 2020 m. atliko Chunlanas Wu su kolegomis ir paskelbė žurnale "Acta Biochimica Polonica". Šiame tyrime teigiama, kad natūralus junginys - neogamboginė rūgštis - gali sukelti B16 melanomos ląstelių žūtį moduliuodamas PI3K/Akt/mTOR signalinę kaskadą.

Iridžio (III) kompleksas, kaip stiprus priešvėžinis agentas, sukelia B16 ląstelių apoptozę ir autofagiją, slopindamas AKT/mTOR kelią

Šis mokslinis straipsnis 2018 m. paskelbtas žurnale "European Journal of Medicinal Chemistry". Šiame tyrime mokslininkai, naudodami B16 melanomos ląsteles, tyrė junginio - iridžio (III) komplekso - priešvėžinį aktyvumą.

Ailantonas melanomos B16 ir A375 ląstelėse sukelia ląstelių ciklo sustojimą ir apoptozę

Šiame tyrime pasiūlyta, kad augalinė biologiškai aktyvi medžiaga - ailantonas - turi priešvėžinį potencialą, nes gali sukelti apoptozę ir ląstelių ciklo sustojimą B16 ir A375 melanomos ląstelėse. Šis straipsnis buvo paskelbtas 2019 m. žurnale "Biomolecules".

6. šaltiniai, skirti B16 ląstelių linijai: B16 ląstelių šaltiniai: protokolai, vaizdo įrašai ir kt

Su B16 ląstelių linija susijusių išteklių, kuriuose paaiškinami jos kultivavimo ir transfekcijos protokolai, yra nedaug.

Melanomos ląstelių kultivavimas: Šiame vaizdo įraše pateikiama vertingų patarimų, kaip kultivuoti melanomos ląstelių linijas.
Ląstelių linijos subkultūrinimas: Šiame vaizdo įraše paaiškinamas bendras ląstelių linijos subkultūrinimo protokolas.
B16F10 ląstelių linijos transfekcija: Šiame vaizdo įraše paaiškinamas B16 melanomos ląstelių sublinijos transfekcijos protokolas. Jis gali padėti optimizuoti B16 ląstelių transfekcijos protokolą.

Toliau pateikiami kai kurie B16 ląstelių kultūrų protokolai.

B16 ląstelių kultivavimas: Šioje svetainėje pateikiama visa reikalinga informacija apie B16 ląstelių kultivavimą, įskaitant auginimo terpę, subkultūravimą, ląstelių atšildymą ir užšaldymą.

Nuorodos

Danciu, C., et al., Keturių skirtingų B 16 pelių melanomos ląstelių sublinijų elgesys: C57 BL/6J oda. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 skatina melanomos augimą, metastazavimą ir formavimąsi, moduliuodama miR-21 / E-kadherino ašį. Cancer cell international, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al., Notch1 signalas melanomos ląstelėse skatina naviko sukeltą imunosupresiją per TGF-β1 reguliavimą. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C., et al., Neogamboginė rūgštis indukuoja melanomos B16 ląstelių apoptozę per PI3K/Akt/mTOR signalinį kelią. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al. ginsenozido Rg3 priešvėžinis aktyvumas melanomai per ERK ir Akt kelių mažinimą. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.