B16 ląstelės – pagrindinis vadovas apie B16 melanomos ląsteles onkologiniuose tyrimuose

B16 yra pelių kilmės odos vėžio (melanomos) ląstelių linija. Ši ląstelių linija yra veiksmingas in vitro modelis žmogaus odos vėžio tyrimams. Ji dažnai naudojama tirti kietųjų navikų susidarymą ir vėžio ląstelių metastazes.

📋 B16 ląstelių linija – trumpi faktai

Auginimo terpė: B16 ląstelės auginamos EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) terpėje, kurioje yra 10 % veršelių serumo (FBS). Auginimo terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
Padvigubėjimo laikas: Vidutinis B16 ląstelių populiacijos dvigubėjimo laikas yra apie 24 valandas.
Augimo tipas: B16 ląstelės yra adhezyvios ir auga monosluoksniuose.
Biologinio saugumo lygis: BSL-1
Galima įsigyti iš: Cytion — Užsakykite B16

Šis straipsnis padės jums suprasti B16 melanomos ląstelių linijos pagrindus. Konkrečiai, jame bus aptariama:

📋 Turinys

B16 ląstelių linijos bendrosios charakteristikos ir kilmė
B16 ląstelių linijos auginimo informacija
B16 ląstelių linija: privalumai ir trūkumai
B16 ląstelių pritaikymas
5. Moksliniai straipsniai apie B16 ląsteles
Ištekliai, susiję su B16 ląstelių linija: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
Dažnai užduodami klausimai

B16 ląstelių linijos bendrosios charakteristikos ir kilmė

Šiame straipsnio skyriuje bus aptariamos B16 melanomos ląstelių linijos charakteristikos. Čia rasite atsakymus į šiuos dažnai užduodamus klausimus: Kas yra B16 vėžio ląstelių linija? Iš kur gaunamos B16 ląstelės? Koks yra B16 ląstelių dydis?

B16 ląstelių linija buvo sukurta 1954 m. Šios ląstelės buvo gautos iš C57BL/6J pelių, kurioms Jackson Laboratories laboratorijoje Meino valstijoje spontaniškai išsivystė odos navikas.
Tai yra melaniną gaminančios epitelio ląstelės, turinčios gebėjimą metastazuoti į blužnį, kepenis ir plaučius.
Melanomos B16 ląstelės auga kaip monosluoksniai ir pasižymi epitelio tipo bei verpstės formos ląstelių morfologija.
B16 ląstelių linijos dydis yra maždaug 15,4 μm.
Yra skirtingi B16 ląstelių subklonai, įskaitant B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 ir B16F10. Šios sublinijos skiriasi nuo pirminių B16 ląstelių ir išlaiko tam tikras specifines savybes. Pavyzdžiui, jos skiriasi morfologija, ląstelių dydžiu ir kitomis savybėmis. B16F10 pasižymi dideliu metastazavimo į plaučius gebėjimu, o B164A5 yra agresyviausia odos vėžio ląstelių linija, palyginti su B16F10, B16-GMCSF ir B16FLT3 [1].

3D animacija, vaizduojanti augančio odos vėžio, pavyzdžiui, piktybinės melanomos, artimą planą, kai jis sukelia aplinkinių audinių uždegimą.

B16 ląstelių linijos auginimo informacija

Prieš pradedant išlaikyti ar kultivuoti ląstelių liniją, gali prireikti pagrindinės informacijos apie ląstelių skaičiaus padvigubėjimo laiką, ląstelių tipą, auginimo terpę, kultivavimo sąlygas ir pan. Šiame skyriuje pateikiama visa būtina informacija apie B16 ląstelių kultivavimą.

Pagrindiniai B16 ląstelių auginimo aspektai

Populiacijos dvigubėjimo laikas:: Vidutinis B16 ląstelių populiacijos dvigubėjimo laikas yra apie 24 valandos.
Adhezinės ar suspensinės:: B16 ląstelės yra adhezyvinės ir auga monosluoksniuose.
Sėjimo tankis:: Rekomenduojama B16 ląsteles sėti 1–2 x 10⁴ ląstelių/cm² tankumu. Prisijungusios B16 ląstelės nuplaunamos 1 x PBS ir atskiriamos nuo paviršiaus naudojant Accutase tirpalą. Ląstelės centrifuguojamos, o ląstelių nuosėdos resuspenduojamos auginimo terpėje. Vėliau šios ląstelės perpilamos į naują kolbą augimui.
Auginimo terpė:: B16 ląstelės auginamos EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) terpėje, kurioje yra 10 % veršelių serumo (FBS). Auginimo terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
Auginimo sąlygos:: B16 ląstelių linijai auginti naudojamas drėkinamas inkubatorius su 5 % CO₂ tiekimu ir 37 °C temperatūra.
Laikymas:: Šios ląstelės laikomos žemesnėje nei -150 °C temperatūroje arba skysto azoto garų fazėje, siekiant apsaugoti ląstelių gyvybingumą.
Užšaldymo procesas ir terpė:: B16 ląstelės užšaldomos lėtu užšaldymo procesu, naudojant CM-1 arba CM-ACF užšaldymo terpę.
Atšildymo procesas:: Užšaldytos B16 ląstelės atšildomos 37 °C temperatūroje vandens vonioje, kurioje yra antimikrobinės medžiagos. Atšildytos ląstelės gali būti tiesiogiai kultivuojamos, jas supilant į kolbas su auginimo terpe. Be to, šios ląstelės gali būti centrifuguojamos, siekiant pašalinti užšaldymo terpės komponentus, ir tada kultivuojamos naujoje terpėje.
Biologinio saugumo lygis:: B16 ląstelių linija turi būti tvarkoma ir laikoma 1 biologinio saugumo lygio laboratorijoje.

B16 cells

Pusiau susiliejęs B16 melanomos ląstelių sluoksnis, stebimas 10 kartų ir 20 kartų didinimu.

B16 ląstelių linija: privalumai ir trūkumai

Kaip ir kitos ląstelių linijos, B16 turi savitą privalumų ir trūkumų derinį. Šiame skyriuje išvardyti kai kurie svarbūs šios melanomos ląstelių linijos privalumai ir trūkumai.

Privalumai

B16 yra pirmasis veiksmingas pelių modelis, plačiai naudojamas metastazių tyrimuose dėl jo privalumų. Kai kurie šios odos vėžio ląstelių linijos privalumai yra:

Lengva auginti: B16 ląstelių liniją lengva auginti mokslinių tyrimų laboratorijose. Ji plačiai naudojama vėžio ląstelių biologijos, signalizacijos kelių ir kt. tyrimams.
Greitas augimas: B16 melanomos ląstelių linija pasižymi dideliu proliferacijos greičiu, todėl ji tinka ląstelių dalijimosi ir augimo procesų tyrimams.
Tumorigeniškumas: B16 yra tumorigeninė ląstelių linija, turinti navikams būdingų savybių, tokių kaip invazija, migracija ir proliferacija. Ji yra vertinga tirti navikų susidarymą, progresavimą ir metastazes.

Trūkumai

Su B16 ląstelių linija susiję trūkumai yra šie:

Nesusijusi su žmogumi: Kadangi B16 yra pelių melanomos ląstelių linija, ji gali netiksliai atspindėti žmogaus odos vėžio biologiją, o tai riboja tyrimų rezultatų pritaikomumą.
Heterogeniškumas: B16 ląstelės yra heterogeniškos, pasižymi įvairiomis genetinėmis ir fenotipinėmis savybėmis toje pačioje kultūroje. Tai gali turėti įtakos rezultatų patikimumui ir atkuriamumui.

B16 ląstelių pritaikymas

B16 ląstelių linija plačiai naudojama moksliniuose tyrimuose. Keletas perspektyvių šios ląstelių linijos pritaikymų:

Navikų biologija: ši pelių odos vėžio ląstelių linija yra navikogeninė ir plačiai naudojama navikų biologijai tirti. Buvo atlikti keli tyrimai, siekiant ištirti ląstelių mechanizmus, lemiančius naviko ląstelių augimą, proliferaciją ir metastazavimą, naudojant B16 ląsteles. 2020 m. atliktame tyrime B16 ląstelės buvo panaudotos siekiant ištirti ilgos nekoduojančios RNR, LncRNA MEG3, vaidmenį melanomos susidaryme, augime ir metastazavime. Šis tyrimas parodė, kad nekoduojanti RNR moduliuoja miRNA-21/E-kadherino ašį, skatindama šiuos ląstelių procesus [2]. Taip pat buvo atliktas tyrimas, siekiant ištirti galimą Notch1 signalizacijos vaidmenį naviko sukeltame imuninės sistemos slopinime, naudojant B16 ląsteles [3].
Vaistų atradimas: B16 ląstelės naudojamos vaistų kandidatų potencialių terapinių poveikių patvirtinimui ir bandymams. Viename tyrime buvo vertinamas natūralaus junginio neogamboginės rūgšties priešnavikinis poveikis naudojant B16 ląstelių liniją. Tyrimo rezultatai parodė, kad šis junginys moduliuoja PI3K/Akt/mTOR signalizacijos kelią, sukeldamas vėžinių ląstelių mirtį [4]. Kituose tyrimuose, naudojant B16 ląstelių liniją, buvo tiriamas ginsenozido Rg3, saponino, priešmelanominis poveikis. Tyrimuose buvo iškelta hipotezė, kad šis natūralus junginys sukelia priešvėžinį poveikį, slopindamas ERK ir Akt signalizacijos kelius [5].

430,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 305154

5. Moksliniai straipsniai, kuriuose nagrinėjamos B16 ląstelės

Čia pateikiami keli svarbūs moksliniai straipsniai, kuriuose aptariama B16 melanomos ląstelių linija.

LncRNA MEG3 skatina melanomos augimą, metastazavimą ir formavimąsi moduliuodamas miR-21/E-kadherino ašį

Šiame leidinyje, paskelbtame žurnale „Cancer Cell International“ (2020 m.), teigiama, kad ilgas nekoduojantis RNR MEG3 skatina B16 melanomos ląstelių susidarymą, augimą ir metastazavimą, moduliuodamas miRNA-21/E-kadherino ašį.

Naujas psoraleno darinys MPFC skatina melanogenezę, aktyvuodamas p38 MAPK ir PKA signalinius kelius B16 ląstelėse

Šis straipsnis buvo paskelbtas žurnale „International Journal of Molecular Medicine“ 2018 m. Šiame tyrime buvo tiriamas psoraleno darinio – 4-metil-6-fenil-2H-furo[3,2-g]chromen-2-ono (MPFC) – melanogeninis poveikis ir mechanizmai B16 ląstelėse. Tyrime buvo iškelta hipotezė, kad šis darinys skatina melanogenezę, stimuliuodamas PKA ir p38 MAPK ląstelių signalizaciją.

Notch1 signalizacija melanomos ląstelėse skatino naviko sukeltą imunosupresiją per TGF-β1 reguliaciją

Šis tyrimas buvo paskelbtas 2018 m. žurnale „Journal of Experimental & Clinical Cancer Research“. Tyrimo rezultatai rodo, kad Notch1 signalizacijos aktyvacija B16 ląstelėse gali slopinti priešnavikinį imunitetą, padidindama TGF-β1 geno ekspresiją.

Neogamboginė rūgštis indukuoja melanomos B16 ląstelių apoptozę per PI3K/Akt/mTOR signalizacijos kelią

Šį tyrimą 2020 m. atliko Chunlan Wu ir jo kolegos, o jo rezultatai buvo paskelbti žurnale „Acta Biochimica Polonica“. Šiame tyrime teigiama, kad natūralus junginys neogamboginė rūgštis gali sukelti B16 melanomos ląstelių mirtį, moduliuodama PI3K/Akt/mTOR signalizacijos kaskadą.

Iridžio (III) kompleksas, kaip stiprus priešvėžinis agentas, indukuoja B16 ląstelių apoptozę ir autofagiją slopindamas AKT/mTOR kelią

Šis mokslinis straipsnis buvo paskelbtas žurnale „European Journal of Medicinal Chemistry“ 2018 m. Šiame tyrime mokslininkai tyrė junginio, iridžio (III) komplekso, priešvėžinį aktyvumą, naudodami B16 melanomos ląsteles.

Ailantonas sukelia ląstelių ciklo sustabdymą ir apoptozę melanomos B16 ir A375 ląstelėse

Šiame tyrime buvo iškelta hipotezė, kad augalinis bioaktyvus junginys ailantonas turi priešvėžinį potencialą, nes gali sukelti apoptozę ir ląstelių ciklo sustabdymą B16 ir A375 melanomos ląstelėse. Šis straipsnis buvo paskelbtas žurnale „Biomolecules“ 2019 m.

Ištekliai, susiję su B16 ląstelių linija: protokolai, vaizdo įrašai ir kita

Ištekliai apie B16 ląstelių liniją, paaiškinantys jos kultivavimo ir transfekcijos protokolus, yra riboti.

Melanomos ląstelių kultivavimas: šiame vaizdo įraše pateikiama vertingų patarimų dėl melanomos ląstelių linijų kultivavimo.
Ląstelių linijos subkultūravimas: šiame vaizdo įraše paaiškinamas bendras ląstelių linijos subkultūravimo protokolas.
B16F10 ląstelių linijos transfekcija: šiame vaizdo įraše paaiškinamas B16 melanomos ląstelių sublinijos transfekcijos protokolas. Jis gali padėti optimizuoti B16 ląstelių transfekcijos protokolą.

Toliau pateikiami keli B16 ląstelių kultivavimo protokolai.

B16 ląstelių kultivavimas: Šioje svetainėje pateikiama visa reikalinga informacija apie B16 ląstelių kultivavimą, įskaitant auginimo terpę, subkultivavimą, atšildymą ir ląstelių užšaldymą.

Nuorodos

Danciu, C., et al., Keturių skirtingų B 16 pelių melanomos ląstelių sublinijų elgsena: C57 BL/6J oda. Tarptautinis eksperimentinės patologijos žurnalas, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 skatina melanomos augimą, metastazavimą ir formavimąsi moduliuodamas miR-21/E-kadherino ašį. Cancer cell international, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al., Notch1 signalizacija melanomos ląstelėse skatino naviko sukeltą imunosupresiją per TGF-β1 reguliaciją. Eksperimentinių ir klinikinių vėžio tyrimų žurnalas, 2018. 37(1): p. 1–13.
Wu, C., et al., Neogamboginė rūgštis indukuoja melanomos B16 ląstelių apoptozę per PI3K/Akt/mTOR signalizacijos kelią. „Acta Biochimica Polonica“, 2020. 67(2): p. 197–202.
Meng, L., et al., Ginsenosido Rg3 priešvėžinis poveikis melanomai slopindamas ERK ir Akt signalinius kelius. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.