B16-F10 ląstelės - B16-F10 melanomos ląstelių linijos tyrimas metastazių tyrimuose

B16-F10 ląstelės yra melanomos ląstelių linija, gauta iš C57BL/6J pelės. Jos plačiai naudojamos odos vėžio tyrimams. Mokslininkai šias ląsteles naudoja naviko vystymuisi ir progresavimui bei terapinėms intervencijoms tirti. Šiame straipsnyje aptariami pagrindiniai B16-F10 melanomos ląstelių aspektai. Visų pirma bus aptarti šie klausimai:

B16-F10 ląstelių linijos kilmė ir bendrosios savybės
Informacija apie B16-F10 ląstelių kultivavimą
B16-F10 ląstelės: Privalumai ir trūkumai
B16-F10 ląstelių pritaikymas moksliniams tyrimams
Publikacijos su B16-F10 ląstelių linija
Šaltiniai, skirti B16-F10 ląstelių linijai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt

1. B16-F10 ląstelių linijos kilmė ir bendrosios savybės

Šiame skyriuje sužinosite apie B16F10 melanomos naviko ląstelių kilmę ir išskirtines savybes. Tai padės jums efektyviai naudoti ląstelių liniją atliekant mokslinius tyrimus. Daugiausia sužinosite: Kas yra B16-F10 ląstelės? Iš ko gaunamos B16F10 ląstelės? Kokia yra B16F12 ląstelių linijos morfologija? Koks yra B16F10 ląstelių dydis?

B16-F10 yra B16 naviko ląstelių linijos, gautos iš C57BL/6J pelių odos audinio, subklonas. Čia B16F10 melanomos ląstelės buvo sukurtos intraveniniu būdu sušvirkštus B16 linijos ląstelių į veną imunokompromituotoms arba sinogeninėms pelėms. Šios ląstelės buvo atrinktos pagal jų potencialą formuoti metastazių plaučių kolonijas in vivo ir po to nustatytos po dešimties plaučių kolonijų formavimosi ciklų in vitro [1]. Ją 1976 m. sukūrė Fidleris su kolegomis.
B16-F10 ląstelių linijos yra epitelinės ir verpstės formos.
Apytikslis B16-F10 ląstelių dydis yra 15,4 ± 1,4 μm [2].

B16-F1 ir B16-F10 ląstelės

B16-F1 ir B16-F10 ląstelės buvo gautos iš B16 pirminės ląstelių linijos. Abi kilusios iš tos pačios ir pasižymi beveik panašiomis savybėmis. Tačiau pagrindinis skirtumas yra jų metastazinis gebėjimas. B16-F10 ląstelės pasižymi dideliu, o B16-F1 - mažu metastazavimo potencialu [3].

Labai padidintas piktybinės melanomos naviko pjūvis mikroskopu.

2.informacija apie B16-F10 ląstelių kultivavimą

Prieš tvarkydami ir augindami ląstelių liniją, turite žinoti apie jos padvigubėjimo laiką, augimo terpę, sąlygas ir ląstelių auginimo protokolus. Šiame skyriuje bus aptarta: B16-f10 ląstelių padvigubėjimo laikas? Kaip auginti B16F10 ląsteles? Kokia yra B16-F10 ląstelių terpė? Kokiomis sąlygomis rekomenduojama auginti B16-F10 ląsteles?

Pagrindiniai B16-F10 ląstelių kultivavimo aspektai

Padvigubėjimo laikas:	B16-F10 ląstelių padvigubėjimo laikas yra maždaug 20,1 valandos. Priklausomai nuo auginimo sąlygų, jis gali svyruoti nuo 17 iki 21 valandos.
Prisitvirtinusios arba suspensijoje:	B16-F10 yra adherentinė ląstelių linija. Ląstelės greitai auga ir sudaro vienaląsčius sluoksnius.
Padalijimo santykis:	B16-F10 ląstelės kultivuojamos dalimis santykiu nuo 1:2 iki 1:4. Ląstelės plaunamos fosfatinio buferinio druskos tirpalu (1x) ir 8-10 min. kambario temperatūroje inkubuojamos su "Accutase" perėjimo tirpalu. Ląstelės užpilamos šviežia terpe ir centrifuguojamos. Surinktos ląstelių granulės dar kartą resuspenduojamos ir ląstelės paskirstomos į naują kolbą su šviežia terpe pagal padalijimo santykį.
Auginimo terpė:	B16-F10 ląstelės auginamos DMEM terpėje. Kad ląstelės augtų idealiai, terpė papildyta 10 % FBS, 4 mM L-glutaminu, 1,5 g/l NaHCO3, 4,5 g/l gliukozės ir 1,0 mM natrio piruvato. Medžiaga turėtų būti keičiama 2-3 kartus per savaitę.
Augimo sąlygos:	B16-F10 ląstelės auginamos drėkinamajame inkubatoriuje 37 °C temperatūroje, tiekiamas 5 % CO2.
Laikymas:	Ląstelių gyvybingumui palaikyti užšaldytos ląstelės laikomos žemesnėje nei -150 °C temperatūroje elektriniame itin žemos temperatūros šaldiklyje arba skysto azoto garų fazėje.
Šaldymo procesas ir terpė:	B16-F10 ląstelės užšaldomos CM-1 arba CM-ACF laikymo terpėje. Kad ląstelės nepatirtų šoko, rekomenduojama lėtai užšaldyti, kad temperatūra per minutę sumažėtų tik 1 °C.
Atšildymo procesas:	Užšaldytos B16-F10 ląstelės 40-60 sekundžių atšildomos iš anksto nustatytoje 37 °C temperatūros vandens vonelėje. Po to ląstelės sudedamos į šviežią terpę ir centrifuguojamos, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai. Surinktos ląstelės resuspenduojamos augimo terpėje ir supilamos į kolbas kultivavimui.
Biologinės saugos lygis:	B16-F10 ląstelių linijai apdoroti ir prižiūrėti reikalinga 1 biologinės saugos lygio laboratorija.

Pusiau susilpnėjusios B16-F10 ląstelės 20x ir 10x padidinimu.

3.b16-F10 ląstelės: Privalumai ir trūkumai

Kaip ir kitos ląstelių linijos, B16-F10 taip pat turi tam tikrų privalumų ir trūkumų. Šiame skyriuje aptariami kai kurie svarbiausi šios odos melanomos ląstelių linijos privalumai ir trūkumai.

Privalumai

B16-F10 ląstelių linija plačiai naudojama vėžio tyrimams. B16-F10 ląstelių privalumai yra šie:

Metastazinis potencialas	Odos melanomos B16F10 ląstelės pasižymi dideliu metastazavimo potencialu, todėl yra vertingos tiriant vėžio metastazavimą ir jį lemiančius mechanizmus.
In vitro naviko modelis	B16-F10 ląstelės yra in vitro modelis vėžio progresavimui ir augimui tirti, padedantis mokslininkams suprasti vėžį lemiančius ląstelinius ir molekulinius mechanizmus.

Trūkumai

Su B16-F10 ląstelių linija susiję šie trūkumai:

Iš pelės gauta ląstelių linija

B16-F10 yra pelių kilmės ląstelių linija, todėl ją galima taikyti tik su žmonėmis susijusiems tyrimams. Tyrimų rezultatai, gauti naudojant šias ląsteles, ne visada gali būti iš tikrųjų pritaikyti žmogaus biologijai.

4.b16-F10 ląstelių pritaikymas moksliniams tyrimams

B16-F10 ląstelių linija plačiai naudojama vėžio tyrimams. Čia aptariami keli perspektyvūs šios ląstelių linijos taikymo būdai.

Vėžio tyrimai: B16-F10 ląstelių linija yra vertingas modelis vėžinių ląstelių procesams, įskaitant proliferaciją, invaziją, migraciją ir ląstelių mirtį arba apoptozę, tirti. Be to, ji padeda mokslininkams įžvelgti šiuos ląstelinius procesus lemiančius molekulinius mechanizmus ir kelius. 2018 m. atliktame tyrime buvo nagrinėjamas CCR5 (penktojo tipo C-C chemokinų receptoriaus) vaidmuo melanomos ląstelių epitelio perėjime į mezenchimines ląsteles ir metastazėse. Tyrimo rezultatai atskleidė, kad CCR5 trūkumas riboja naviko augimą ir metastazavimą, o didelė raiška lemia didesnį B16-F10 ląstelių augimą ir metastazavimą. Tolesnių tyrimų duomenimis, CCR5 reguliuoja TGFβ1 raišką, kuri reguliuoja PI3K/AKT/GSK3β signalizaciją, skatinančią epitelio perėjimą į mezenchiminį ir ląstelių migraciją [4].
Vaistų tyrimas ir kūrimas: B16F10 melanomos naviko ląstelės yra labai agresyvios, todėl tinkamos galimiems priešvėžiniams vaistams ir gydymo būdams išbandyti. Mokslininkai naudoja šias ląsteles ir vertina įvairių junginių poveikį ląstelių augimui, dauginimuisi ir metastazėms, taip padėdami kurti vaistus. 2018 m. Valentina Nanni su kolegomis atliko tyrimą, kuriame buvo tiriamas Spartium junceum žiedų hidroalkoholinio ekstrakto gydomasis poveikis. Tyrime pasiūlyta, kad žiedų ekstraktas veiksmingai indukuoja B16-F10 ląstelių senatvinį senėjimą, kuris lemia ląstelių augimą ir melanogenezės slopinimą, todėl jis gali turėti potencialų priešvėžinį poveikį [5].

430,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 305157

5.publikacijos su B16-F10 ląstelių linija

Čia pateikiamos kelios svarbios mokslinių tyrimų publikacijos, kuriose naudojama B16-F10 melanomos ląstelių linija:

Sorghum bicolor etanolinio ekstrakto antimelanogeninis poveikis IBMX sukeltai melanogenezei B16/F10 melanomos ląstelėse

Šis tyrimas buvo paskelbtas žurnale Nutrients (2020). Jame pasiūlyta, kad Sorghum bicolor etanolinis ekstraktas turi antimelanogeninį poveikį odos melanomos B16F10 ląstelėms.

Kalcitriolis slopina B16-F10 melanomos ląstelių proliferaciją ir potencialiai sukelia apoptozę

Žurnale "Medical Science Monitor Basic Research" (2022 m.) paskelbtame tyrime siūloma, kad kalcitriolio vaistas pasižymi priešvėžiniu poveikiu B16-F10 melanomos ląstelėms, slopindamas proliferaciją ir sukeldamas apoptozę.

Prooksidacinis kardolų poveikis susijęs su jų citotoksiniu poveikiu prieš pelių B16-F10 melanomos ląsteles

Šis straipsnis publikuotas žurnale "Biochemical and Biophysical Research Communications" (2022). Tyrimo rezultatai atskleidė, kad kardoliai, rezorcinolio lipidai, pasižymi intensyviu citotoksiniu poveikiu B16-F10 ląstelių linijai.

Dviskiaučių ginkmedžių egzokarpų ekstraktas slopina B16-F10 melanomos metastazes, įtraukdamas PI3K/akt/NF-κB/MMP-9 signalinį kelią

Žurnale "Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine" (2018 m.) paskelbtame tyrime, naudojant B16-F10 melanomos ląsteles, ištirtas ginkmedžio dviskiaučių egokarpų ekstrakto antimetastazinis potencialas.

Timokvinonas sukelia B16-F10 melanomos ląstelių apoptozę slopindamas p-STAT3 ir slopina naviko augimą pelių intracerebrinės melanomos ..

Šiame žurnale "World Neurosurgery" (2018) paskelbtame tyrime siūloma, kad timokvinonas gali būti veiksminga intracerebrinių metastazių gydymo priemonė, nes slopina B16-F10 ląstelių augimą ir sukelia apoptozę.

6.b16-F10 ląstelių linijos ištekliai: B1616 šaltiniai: protokolai, vaizdo įrašai ir kita

B16F10 endotelio ląstelės plačiai naudojamos odos vėžio tyrimams. Čia pateikiami keli internetiniai šaltiniai, kuriuose paaiškinami jos kultivavimo ir transfekcijos protokolai:

B16F10 melanomos ląstelių transfekcija: Šis vaizdo įrašas padės jums sužinoti B16-F10 ląstelių transfekcijos protokolą.
B16-F10 transfekcija: Šiame dokumente paaiškinamas odos melanomos B16F10 ląstelių DNR transfekcijos in vitro protokolas.

Toliau pateiktoje nuorodoje pateikiamas B16-F10 ląstelių auginimo protokolas:

B16-F10 subkultūrinimas: Šioje svetainėje pateikiama naudingos informacijos apie melanomos B16F10 naviko ląsteles. Joje pateikiama informacija apie augimo terpę, padvigubėjimo laiką, ląstelių subkultūrinimo sąlygas ir protokolą, kriokonservuotų ir proliferacinių kultūrų tvarkymą.

Nuorodos

Poste, G. ir kt., B16 melanomos klonų, išskirtų iš kultivuotų ląstelių linijų, poodinių navikų ir atskirų plaučių metastazių, metastazinių savybių palyginimas. Cancer Research, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
Nakamura, M., D. Ono ir S. Sugita, Mechanophenotyping of B16 Melanoma Cell Variants for the Assessment of the Efficacy of (-)-Epigallocatechin Gallate Treatment Using a Tapered Microfluidic Device. Mikromašinos, 2019 m. 10(3): p. 207.
Danciu, C., et al, Keturių skirtingų B16 pelių melanomos ląstelių sublinijų elgesys: C57BL/6J oda. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73-80.
Liu, J., et al., High expression of CCR5 in melanoma enhances epithelial-mesenchymal transition and metastasis via TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): p. 481-493.
Nanni, V., et al, Hydroalcoholic extract of Spartium junceum L. flowers inhibits growth and melanogenesis in B16-F10 cells by inducing senescence. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.