B16-F10 ląstelės – B16-F10 melanomos ląstelių linijos tyrimai metastazių srityje
B16-F10 ląstelės sudaro melanomos ląstelių liniją, išvestą iš C57BL/6J pelių. Jos plačiai naudojamos odos vėžio tyrimuose. Mokslininkai naudoja šias ląsteles naviko vystymosi ir progresavimo bei terapinių intervencijų tyrimams. Šiame straipsnyje bus aptarti pagrindiniai B16-F10 melanomos ląstelių aspektai. Visų pirma, jame bus aptarta:
- Auginimo terpė
- B16-F10 ląstelės auginamos DMEM terpėje. Terpė papildoma 10 % FBS, 4 mM L-glutaminu, 1,5 g/l NaHCO3, 4,5 g/l gliukozės ir 1,0 mM natrio piruvatu, siekiant užtikrinti idealias ląstelių augimo sąlygas. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
- Padvigubėjimo laikas
- B16-F10 ląstelių dvigubėjimo laikas yra maždaug 20,1 valandos. Jis gali svyruoti nuo 17 iki 21 valandos, priklausomai nuo auginimo sąlygų.
- Augimo tipas
- B16-F10 yra adhezyvinė ląstelių linija. Ląstelės auga greitai ir sudaro monosluoksnius.
- Biologinio saugumo lygis
- BSL-1
- Galima įsigyti iš
- Cytion — Užsakykite B16-F10
- B16-F10 ląstelių linijos kilmė ir bendrosios charakteristikos
- B16-F10 ląstelių auginimo informacija
- B16-F10 ląstelės: privalumai ir trūkumai
- B16-F10 ląstelių taikymas moksliniuose tyrimuose
- Publikacijos apie B16-F10 ląstelių liniją
- Ištekliai, susiję su B16-F10 ląstelių linija: protokolai, vaizdo įrašai ir kt.
- B16-F10 ląstelių linijos kilmė ir bendrosios charakteristikos
- B16-F10 ląstelių auginimo informacija
- B16-F10 ląstelės: privalumai ir trūkumai
- B16-F10 ląstelių taikymas moksliniuose tyrimuose
- 5. Publikacijos apie B16-F10 ląstelių liniją
- Ištekliai, susiję su B16-F10 ląstelių linija: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
- Dažnai užduodami klausimai
B16-F10 ląstelių linijos kilmė ir bendrosios charakteristikos
Šiame skyriuje pateikiama informacija apie B16-F10 melanomos naviko ląstelių kilmę ir išskirtines savybes. Tai padės jums efektyviai naudoti šią ląstelių liniją savo moksliniuose tyrimuose. Pagrindinė informacija: Kas yra B16-F10 ląstelės? Iš ko yra kilusi B16F10? Kokia yra B16F12 ląstelių linijos morfologija? Koks yra B16F10 ląstelių dydis?
- B16-F10 yra B16 naviko ląstelių linijos subklonas, gautas iš C57BL/6J pelių odos audinio. Šiuo atveju B16F10 melanomos ląstelės buvo išaugintos po B16 linijos įvedimo į veną imuninės sistemos sutrikimų turinčioms arba singeninėms pelėms. Šios ląstelės buvo atrinktos dėl jų potencialo in vivo formuoti metastazavusias plaučių kolonijas, o vėliau įtvirtintos po dešimties in vitro plaučių kolonijų formavimo ciklų [1]. Jas 1976 m. sukūrė Fidleris ir kolegos.
- B16-F10 ląstelių linijos turi epitelio tipo ir verpstės formos išvaizdą.
- Apytikslis B16-F10 ląstelių dydis yra 15,4 ± 1,4 μm [2].
B16-F1 ir B16-F10 ląstelės
B16-F1 ir B16-F10 ląstelės buvo išskirtos iš B16 motininės ląstelių linijos. Abi kilusios iš tos pačios linijos ir turi beveik panašias savybes. Tačiau pagrindinis skirtumas yra jų metastazavimo gebėjimas. B16-F10 ląstelės turi didelį, o B16-F1 – mažą metastazavimo potencialą [3].
B16-F10 ląstelių auginimo informacija
Prieš pradedant dirbti su ląstelių linija ir ją kultivuoti, būtina žinoti jos dvigubėjimo laiką, auginimo terpę, sąlygas ir ląstelių kultivavimo protokolus. Šiame skyriuje bus aptariama: koks yra B16-F10 ląstelių dvigubėjimo laikas? Kaip kultivuojamos B16-F10 ląstelės? Kas yra B16-F10 ląstelių terpė? Kokios auginimo sąlygos rekomenduojamos B16-F10 ląstelėms?
Svarbiausi B16-F10 ląstelių auginimo aspektai
Padvigubėjimo laikas:
B16-F10 ląstelių dvigubėjimo laikas yra maždaug 20,1 valandos. Jis gali svyruoti nuo 17 iki 21 valandos, priklausomai nuo auginimo sąlygų.
Adhezinės ar suspensijos:
B16-F10 yra adhezyvinė ląstelių linija. Ląstelės auga greitai ir sudaro monosluoksnius.
Padalijimo santykis:
B16-F10 ląstelės subkultivuojamos dalijimo santykiu nuo 1:2 iki 1:4. Ląstelės nuplaunamos fosfato buferiniu tirpalu (1x) ir tada inkubuojamos su „Accutase“ perkelimo tirpalu 8–10 minučių kambario temperatūroje. Į ląsteles įpilama šviežio terpės ir jos centrifuguojamos. Surinktas ląstelių nuosėdas vėl resuspenduojamas, o ląstelės paskirstomos į naują kolbą, kurioje yra šviežios kultūrinės terpės, pagal dalijimo santykį.
Auginimo terpė:
B16-F10 ląstelės auginamos DMEM terpėje. Terpė papildoma 10 % FBS, 4 mM L-glutaminu, 1,5 g/l NaHCO3, 4,5 g/l gliukozės ir 1,0 mM natrio piruvatu, siekiant užtikrinti idealias ląstelių augimo sąlygas. Terpę reikia keisti 2–3 kartus per savaitę.
Auginimo sąlygos:
B16-F10 ląstelės auginamos drėgname inkubatoriuje 37 °C temperatūroje su 5 % CO2 tiekimu.
Laikymas:
Užšaldytos ląstelės laikomos žemesnėje nei -150 °C temperatūroje elektrinėje ultražemos temperatūros šaldiklyje arba skysto azoto garų fazėje, siekiant išlaikyti ląstelių gyvybingumą.
Užšaldymo procesas ir terpė:
B16-F10 ląstelės laikymui užšaldomos CM-1 arba CM-ACF terpėse. Tam rekomenduojamas lėtas užšaldymo procesas, kurio metu temperatūra mažėja tik 1 °C per minutę, siekiant išvengti ląstelių šoko.
Atšildymo procesas:
Užšaldytos B16-F10 ląstelės atšildomos iš anksto nustatytos 37 °C temperatūros vandens vonioje 40–60 sekundžių. Po to ląstelės įdedamos į šviežią terpę ir centrifuguojamos, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai. Surinktos ląstelės resuspenduojamos augimo terpėje ir supilamos į kolbas kultivavimui.
Biologinio saugumo lygis:
B16-F10 ląstelių linijai tvarkyti ir prižiūrėti reikalinga 1 biologinio saugumo lygio laboratorija.
B16-F10 ląstelės: privalumai ir trūkumai
Kaip ir kitos ląstelių linijos, B16-F10 taip pat turi tam tikrų privalumų ir trūkumų. Šiame skyriuje aptariami kai kurie svarbūs šios odos melanomos ląstelių linijos privalumai ir trūkumai.
Privalumai
B16-F10 ląstelių linija plačiai naudojama vėžio tyrimuose. B16-F10 ląstelių privalumai yra šie:
Metastazavimo potencialas
Odos melanomos B16F10 ląstelės pasižymi dideliu metastazavimo potencialu, todėl jos yra vertingos vėžio metastazių ir jų mechanizmų tyrimams.
In vitro naviko modelis
B16-F10 ląstelės naudojamos kaip in vitro modelis vėžio progresavimo ir augimo tyrimams, padėdamos mokslininkams suprasti ląstelinį ir molekulinį vėžio vystymosi mechanizmą.
Trūkumai
Su B16-F10 ląstelių linija susiję trūkumai yra šie:
Iš pelių gauta ląstelių linija
B16-F10 yra pelėms būdinga ląstelių linija, todėl jos pritaikymas žmogaus tyrimams yra ribotas. Šių ląstelių tyrimų rezultatai ne visada gali būti tiesiogiai pritaikyti žmogaus biologijai.
B16-F10 ląstelių taikymas moksliniuose tyrimuose
B16-F10 ląstelių linija plačiai naudojama vėžio tyrimuose. Čia aptariami keli perspektyvūs šios ląstelių linijos pritaikymo atvejai.
- Vėžio tyrimai: B16-F10 ląstelių linija yra vertingas modelis vėžio ląstelių procesams, įskaitant proliferaciją, invaziją, migraciją ir ląstelių mirtį arba apoptozę, tirti. Be to, ji padeda tyrėjams gilinti žinias apie molekulinius mechanizmus ir kelius, skatinančius šiuos ląstelių procesus. 2018 m. atliktame tyrime buvo tiriamas CCR5 (C-C chemokinų receptoriaus penktojo tipo) vaidmuo melanomos ląstelių epitelio į mezenchiminio audinio ląstelių perėjime ir metastazavime. Rezultatai parodė, kad CCR5 trūkumas riboja naviko augimą ir metastazavimą, o didelė ekspresija lemia sustiprintą B16-F10 ląstelių augimą ir metastazavimą. Tolesni tyrimai parodė, kad CCR5 reguliuoja TGFβ1 ekspresiją, kuri reguliuoja PI3K/AKT/GSK3β signalizavimą, skatinantį epitelio į mezenchiminį perėjimą ir ląstelių migraciją [4].
- Vaistų bandymai ir kūrimas: B16F10 melanomos naviko ląstelės yra labai agresyvios, todėl tinka potencialių priešnavikinių vaistų ir gydymo būdų bandymams. Tyrėjai naudoja šias ląsteles ir vertina įvairių junginių poveikį ląstelių augimui, proliferacijai ir metastazavimui, taip padėdami kurti vaistus. 2018 m. Valentina Nanni ir kolegos atliktame tyrime buvo tiriamas Spartium junceumgėlių hidroalkoholinio ekstrakto terapinis poveikis. Tyrime buvo padaryta prielaida, kad gėlių ekstraktas veiksmingai skatina B16-F10 ląstelių senėjimą, o tai slopina ląstelių augimą ir melanogenezę, todėl jis gali turėti potencialių priešvėžinių savybių [5].
5. Moksliniai straipsniai, kuriuose nagrinėjama B16-F10 ląstelių linija
Čia pateikiami keli svarbūs moksliniai leidiniai, kuriuose aptariama B16-F10 melanomos ląstelių linija:
Šis tyrimas buvo paskelbtas žurnale „Nutrients“ (2020 m.). Jame teigiama, kad Sorghum bicolor etanolinis ekstraktas turi anti-melanogeninį poveikį odos melanomos B16F10 ląstelėse.
Kalcitriolis slopina proliferaciją ir potencialiai indukuoja apoptozę B16–F10 ląstelėse
Tyrime, paskelbtame žurnale „Medical Science Monitor Basic Research“ (2022 m.), teigiama, kad kalcitriolio preparatas turi priešvėžinį poveikį B16-F10 melanomos ląstelėse, slopindamas proliferaciją ir indukuodamas apoptozę.
Šis straipsnis paskelbtas žurnale „Biochemical and Biophysical Research Communications“ (2022 m.). Tyrimo rezultatai parodė, kad kardolai, resorcinolio lipidai, daro intensyvų citotoksinį poveikį B16-F10 ląstelių linijai.
Tyrime, paskelbtame žurnale „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine“ (2018 m.), buvo tiriamas Ginkgo biloba išorinio apvalkalo ekstrakto antimetastazinis potencialas naudojant B16-F10 ląsteles.
Šiame „World Neurosurgery“ (2018) žurnale paskelbtame tyrime teigiama, kad timokinonas gali būti veiksmingas gydymo būdas prieš intraserebrines metastazines pažeidimus, nes jis slopina B16-F10 ląstelių augimą ir sukelia apoptozę.
Ištekliai apie B16-F10 ląstelių liniją: protokolai, vaizdo įrašai ir kita
B16F10 endotelio ląstelės plačiai naudojamos odos vėžio tyrimuose. Čia pateikiami keli internetiniai ištekliai, kuriuose paaiškinami jų kultivavimo ir transfekcijos protokolai:
- B16F10 melanomos ląstelių transfekcija: Šis vaizdo įrašas padės jums susipažinti su B16-F10 ląstelių transfekcijos protokolu.
- B16-F10 transfekcija: šiame dokumente paaiškinamas odos melanomos B16F10 ląstelių in vitro DNR transfekcijos protokolas.
Šioje nuorodoje pateikiamas B16-F10 ląstelių kultivavimo protokolas:
- B16-F10 subkultūravimas: Šioje svetainėje pateikiama naudinga informacija apie B16F10 melanomos naviko ląsteles. Joje aprašomi auginimo terpės, dvigubėjimo laikas, kultūravimo sąlygos ir ląstelių subkultūravimo protokolas, taip pat krioprezervuotų ir proliferacinių kultūrų tvarkymas.
Nuorodos
- Poste, G., et al., Iš kultivuotų ląstelių linijų, poodinių navikų ir atskirų plaučių metastazių izoliuotų B16 melanomos klonų metastazavimo savybių palyginimas. Cancer Research, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono ir S. Sugita, B16 melanomos ląstelių variantų mechanofenotipavimas (-)-epigalokatechino galato gydymo veiksmingumui įvertinti naudojant smailėjantį mikroskysčių prietaisą. Micromachines, 2019. 10(3): p. 207.
- Danciu, C. ir kt., Keturių skirtingų B16 pelių melanomos ląstelių sublinijų elgsena: C57BL/6J oda. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73–80.
- Liu, J., et al., Didelis CCR5 ekspresijos lygis melanomoje sustiprina epitelio-mezenchiminį perėjimą ir metastazavimą per TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): p. 481-493.
- Nanni, V., et al., Spartium junceum L. žiedų hidroalkoholinis ekstraktas slopina B16-F10 ląstelių augimą ir melanogenezę, indukuodamas senėjimą. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.