AGS ląstelės - skrandžio adenokarcinomos AGS ląstelių tyrimai vėžio tyrimuose

AGS ląstelės yra žmogaus skrandžio adenokarcinomos ląstelių linija, plačiai naudojama biomedicininiuose tyrimuose. Ypač ji naudojama skrandžio vėžio biologijai, įskaitant naviko augimą, vystymąsi, progresavimą ir terapines intervencijas, tirti. Be to, ji naudojama šeimininko ir patogeno sąveikai tirti.

Šiame straipsnyje bus aptarti skrandžio epitelio AGS ląstelių pagrindai. Visų pirma bus aptarti šie klausimai:

Bendrosios AGS ląstelių savybės ir kilmė
Informacija apie AGS ląstelių linijos kultivavimą
AGS ląstelių linija: AGS AGS AGS ląstelių analizė: privalumai ir apribojimai
AGS ląstelių panaudojimas
AGS ląstelių linijos mokslinių tyrimų publikacijos
AGS ląstelių linijos šaltiniai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt

1.bendrosios AGS ląstelių savybės ir kilmė

Prieš pradedant dirbti su ląstelių linija, būtina žinoti apie jos kilmę ir bendrąsias savybes. Šiame skyriuje bus aptarti šie dalykai: Kas yra AGS ląstelės? Kokia yra AGS ląstelių kilmė? Kokia yra AGS vėžio ląstelių linijos morfologija?

AGS ląstelių linija buvo gauta iš 54 metų baltaodės moters, sergančios skrandžio adenokarcinoma, skrandžio audinio. Ji buvo išskirta 1979 m. [1].
AGS ląstelių morfologija panaši į epitelio.
Skrandžio epitelio AGS ląstelės yra hiperdiploidinės. AGS ląstelių modalinis chromosomų skaičius yra 49, kuris pasitaiko beveik 60 % ląstelių. Poliploidija taip pat pasitaiko maždaug 3,6 % ląstelių.

Skrandžio karcinoma skersiniame pjūvyje po mikroskopu.

2.informacija apie AGS ląstelių linijos kultivavimą

Kad galėtumėte tinkamai tvarkyti ir valdyti ląstelių liniją, turite žinoti pagrindines jos kultivavimo sąvokas. Ypač turėtumėte žinoti: Kas yra AGS ląstelių padvigubėjimo laikas? Kas yra AGS ląstelių terpė? Kaip subkultūruoti AGS ląsteles? Kokios šaldymo terpės naudojamos skrandžio epitelio AGS ląstelėms?

Pagrindiniai AGS ląstelių kultivavimo aspektai

Padvigubėjimo laikas:	AGS ląstelių padvigubėjimo trukmė - nuo 24 iki 48 valandų.
Prisitvirtinusios arba suspensijoje:	AGS ląstelės yra prigludusios. Jos auga į monosluoksnius.
Sėjimo tankis:	AGS ląstelės sėjamos 1 x¹⁰⁴ ^{ląstelių/cm2} tankumu. Esant tokiam tankumui, per 3-5 dienas ląstelės sudaro susiliejantį monosluoksnį. Pašalinus seną terpę, ląstelės nuplaunamos 1 x PBS ir inkubuojamos su "Accutase" disociacijos tirpalu. Atskirtos ląstelės resuspenduojamos auginimo terpėje ir centrifuguojamos. Ląstelių granulės vėl resuspenduotos ir, suskaičiavus AGS ląsteles, jos paskirstytos į naują kolbą auginimui.
Augimo terpė:	AGS ląstelėms auginti naudojama DMEM terpė, kurioje yra 10 % FBS, 4 mM L-glutamino, 4,5 g/l gliukozės, 1,5 g/l NaHCO3 ir 1,0 mM natrio piruvato. Medžiaga turėtų būti keičiama 2-3 kartus per savaitę.
Augimo sąlygos:	AGS ląstelės laikomos drėkinamajame inkubatoriuje (37 °C temperatūroje) su 5 % CO2.
Laikymas:	Sušaldytos AGS ląstelės ilgesnį laiką laikomos elektriniuose šaldikliuose žemesnėje nei -150 °C temperatūroje arba skysto azoto garų fazėje.
Šaldymo procesas ir terpė:	AGS ląstelėms užšaldyti naudojama CM-1 arba CM-ACF terpė. Ląstelės užšaldomos lėtai, todėl per minutę temperatūra sumažėja tik 1 °C ir apsaugomas ląstelių gyvybingumas.
Atšildymo procesas:	Užšaldytos skrandžio epitelio ląstelės greitai maišomos 37 °C vandens vonelėje 40-60 sekundžių. Atšildytos ląstelės resuspenduojamos šviežioje mitybinėje terpėje ir supilamos į naujas auginimo kolbas. Po 24 valandų inkubacijos terpė atnaujinama, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės komponentai. Priešingai, atšildytos ląstelės centrifuguojamos ir pašalinami užšaldymo terpės elementai. Tada surinktos ląstelės vėl resuspenduojamos ir išpilstomos į kolbą su auginimo terpe.
Biologinės saugos lygis:	Auginant AGS ląsteles būtina užtikrinti 2 biologinės saugos lygio laboratorines sąlygas.

AGS ląstelės, padidintos 20 kartų.

3.aGS ląstelių linija: Privalumai ir apribojimai

Šiame straipsnio skyriuje paaiškinami kai kurie pagrindiniai AGS ląstelių linijos privalumai ir apribojimai.

Privalumai

Pagrindiniai skrandžio epitelio AGS ląstelių privalumai:

Lengva auginti	AGS skrandžio karcinomos ląstelių liniją lengva palaikyti ląstelių kultūrų laboratorijose. Jai nekeliami sudėtingi ir įmantrūs ląstelių auginimo reikalavimai. Be to, ji pasižymi geromis augimo savybėmis, todėl puikiai tinka skrandžio vėžio biologijai tirti.
Reikšmė skrandžio vėžiui	AGS ląstelės buvo gautos iš žmogaus skrandžio adenokarcinomos, todėl jos plačiai naudojamos skrandžio karcinomos biologijai ir terapinėms intervencijoms tirti.

Apribojimai

Su AGS ląstelių linija susijęs apribojimas:

In vitro ląstelių modelis

AGS ląstelės kultivuojamos biomedicininių tyrimų laboratorijose dirbtinėmis sąlygomis. Todėl jos gali nevisiškai atkartoti in vivo skrandžio vėžio mikroaplinką ir kitas ląstelių bei molekulines sąveikas.

4.aGS ląstelių taikymas

AGS ląstelės specialiai naudojamos skrandžio vėžio biologijai tirti. Jos turi daug kitų perspektyvių pritaikymų biomedicinos srityje. Keletas įdomių AGS ląstelių mokslinių tyrimų taikymų yra šie:

Skrandžio vėžio tyrimai: AGS ląstelės yra puikus mokslinių tyrimų įrankis, leidžiantis tirti ląstelių ir molekulinius mechanizmus, kuriais grindžiamas skrandžio vėžio augimas, metastazės ir invazija. Mokslininkai taip pat naudoja skrandžio epitelio AGS ląsteles įvairiems ląstelių procesams, genetinėms mutacijoms ir signaliniams keliams, susijusiems su skrandžio vėžio vystymusi, tirti. Tyrime "Oncology Reports" (2019) nustatyta, kad mikroRNA-183-5p.1 skatina naviko ląstelių proliferaciją, migraciją ir invaziją, slopindama Bcl 2/P53 signalinę kaskadą. Be to, ji taip pat mažina TPM1 geno reguliavimą, kad sukeltų šį poveikį. Taigi tiek mikro RNR, tiek TPM1 siūloma laikyti veiksmingais molekuliniais taikiniais kuriant tikslingą prieš skrandžio vėžį nukreiptą terapiją [2].
Vaistų atranka: AGS ląstelės paprastai naudojamos naujų ir veiksmingų vaistų nuo skrandžio vėžio atrankai. Mokslininkai, naudodami AGS ląstelių liniją, įvertina potencialių vaistų citotoksiškumą ir veiksmingumą. Taip pat atliekami tyrimai, kuriais siekiama nustatyti naujus molekulinius taikinius ir kurti naujus tikslinės terapijos būdus kovai su skrandžio karcinomomis. 2021 m. atliktuose tyrimuose buvo naudojamos AGS skrandžio vėžio ląstelės ir tiriamas paklitakselio vaisto terapinis poveikis. Rezultatai atskleidė, kad paklitakselis sukelia mitozės katastrofą - neatsiejamą apoptozės arba ląstelių žūties mechanizmą AGS ląstelėse. Be to, jis taip pat skatino skrandžio vėžio ląstelių autofagiją [3].
Šeimininko ir patogeno sąveika: AGS vėžio ląstelių linija taip pat tiriama šeimininko ir patogeno sąveika. Tai padeda mokslininkams suprasti ląstelių mechanizmus ir reakcijas, susijusias su infekcija. Pavyzdžiui, 2020 m. atliktame tyrime pastebėta, kad Helicobacter pylori išorinės membranos pūslelėse esančios mažos nekoduojančios RNR mažina interleukino 8 sekreciją žmogaus AGS ląstelėse [4].

430,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 300408

5.moksliniai leidiniai apie AGS ląstelių liniją

Šioje straipsnio dalyje bus aprašytos kelios įdomios ir dažniausiai cituojamos mokslinių tyrimų publikacijos, kuriose aptariamos AGS ląstelės.

Salidrozidas sukelia žmogaus skrandžio vėžio AGS ląstelių apoptozę ir apsauginę autofagiją per PI3K/Akt/mTOR kelią

Šiame "Biomedicine & Pharmacotherapy" (2020 m.) paskelbtame tyrime siūloma, kad natūralus junginys salidrozidas sukelia apsauginę autofagiją ir ląstelių žūtį skrandžio epitelio AGS ląstelėse per PI3K/AKT/mTOR signalinio kelio moduliaciją.

Astragalo polisacharidas sustiprino priešvėžinį apatinibo poveikį skrandžio vėžio AGS ląstelėms, slopindamas AKT signalinį kelią

Šis tyrimas paskelbtas žurnale Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). Jame buvo tiriamas astragalo polisacharido ir vaisto apatinibo sinergetinis priešvėžinis poveikis AGS ląstelėms. Tyrimo rezultatai atskleidė, kad astragalas stiprina priešvėžinį apatinibo poveikį slopindamas AKT signalizaciją.

Curcuzedoalidas prisideda prie Curcuma zedoaria šakniastiebių citotoksiškumo žmogaus skrandžio vėžio AGS ląstelėms indukuojant apoptozę

Šiame žurnale "Journal of Ethnopharmacology" (2018 m.) atliktame tyrime siūloma, kad Curcuzedoalide, natūralus Curcuma zedoaria Roscoe augalo junginys, prisideda prie jo citotoksiškumo potencialo prieš AGS ląsteles.

FOXA1 hiperekspresija slopina žmogaus skrandžio vėžio AGS ląstelių proliferaciją ir EMT

Šioje publikacijoje žurnale "Gene" (2018) siūloma, kad FOXA1 reguliacijos padidėjimas slopina AGS skrandžio adenokarcinomos ląstelių proliferaciją ir epitelio perėjimą į mezenchiminį (EMT) bei invaziją.

helicobacter pylori išorinės membranos pūslelėse supakuotos sncRNA silpnina IL-8 sekreciją žmogaus ląstelėse

Šis mokslinis straipsnis paskelbtas 2020 m. žurnale "International Journal of Medical Microbiology". Šiame tyrime šeimininko ir patogeno sąveikai tirti buvo naudojamos AGS ląstelės. Tyrimo rezultatai atskleidė, kad Helicobacter pylori išorinės membranos vezikulėse yra tam tikros nekoduojančios RNR, kuri veikia IL-8 kiekį AGS ląstelėse.

6.aGS ląstelių linijos šaltiniai: AGS AGS šaltiniai: protokolai, vaizdo įrašai ir kt

Toliau pateikiami keli šaltiniai, kuriuose aprašomos AGS ląstelės.

AGS ląstelių transfekcijos protokolas: Šiame vaizdo įraše pateikiama išsami informacija apie skrandžio epitelio AGS ląstelių transfekcijos protokolą.

Šioje nuorodoje pateikiamas AGS ląstelių auginimo protokolas.

AGS ląstelių auginimo protokolas: Šioje svetainėje pateikiama naudinga informacija apie AGS ląstelių terpę ir ląstelių auginimo protokolus. Trumpai tariant, joje pateikiamas skrandžio epitelio AGS ląstelių subkultūrinimo protokolas ir proliferuojančių bei kriokonservuotų AGS kultūrų tvarkymo protokolas.
AGS ląstelių subkultūrinimas: Šioje svetainėje išsamiai paaiškinama AGS ląstelių subkultūrinimo procedūra.

Nuorodos

Phuc, B.H. ir kt. dviejų Vietnamo Helicobacter pylori padermių, CHC155, gautos iš nekarščiuojančio skrandžio vėžiu sergančio paciento, ir VN1291, gautos iš dvylikapirštės žarnos opalige sergančio paciento, lyginamoji genomika. Scientific Reports, 2023. 13(1): p. 8869.
Lin, J. ir kt., miRNA-183-5p. 1 skatina skrandžio vėžio AGS ląstelių migraciją ir invaziją, veikdama TPM1 Corrigendum in/10.3892/or. 2020.7902. Oncology reports, 2019 m. 42(6): p. 2371-2381.
Khing, T. M. ir kt. paklitakselio poveikis AGS ląstelių apoptozei, autofagijai ir mitotinei katastrofai. Scientific Reports, 2021 m. 11(1): p. 23490.
Zhang, H., et al., sncRNAs packaged by Helicobacter pylori outer membrane vesicles attenuate IL-8 secretion in human cells. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): p. 151356.