A375 ląstelių linija - melanomos tyrimų vadovas

A375 yra žmogaus melanomos ląstelių linija, plačiai naudojama toksikologiniuose ir imunoonkologiniuose tyrimuose. Mokslininkai naudoja šią ląstelių liniją vėžio biologijai ir signaliniams keliams tirti, galimiems priešvėžiniams preparatams išbandyti ar patikrinti ir naujiems veiksmingiems vaistams kurti.

A375 ląstelių kilmė ir bendrosios savybės

Žinodami apie ląstelių linijos kilmę ir bendrąsias savybes, galite lengviau planuoti jos panaudojimą moksliniuose tyrimuose. Šioje straipsnio dalyje bus aptarta A375 ląstelių linijos kilmė ir savybės. Pavyzdžiui, kas yra A375 ląstelių linija? Kokios yra A375 ląstelių linijos savybės? Iš kur gaunamos A375 ląstelės? Kokia yra A375 melanomos ląstelių morfologija? Koks yra A375 ląstelių dydis?

Odos vėžio ląstelių linija A375 atsirado iš 54 metų moters, sergančios piktybine melanoma, solidinio naviko eksplantų kultūros [1].
A375 ląstelių morfologija panaši į epitelio.
A375 ląstelių dydis yra santykinai mažesnis, palyginti su kitomis ląstelių linijomis. Jų skersmuo yra maždaug 12 µm.
A375 melanomos ląstelės yra hipotriploidinės. Šios ląstelių linijos modalinis chromosomų skaičius yra 62. Paprastai kiekviena ląstelė turi devynias žymėtąsias chromosomas ir po vieną normalių N2, N6 ir N22 chromosomų kopiją.

Gydytojas ištiria suaugusio žmogaus odos išaugas, ar tai nėra odos vėžys.

A375 ląstelės: Informacija apie ląstelių kultūrą

A375 ląstelių kultūras lengva prižiūrėti. Joms netaikomi jokie įmantrūs ląstelių auginimo reikalavimai. Šis skyrius padės jums sužinoti būtiną ląstelių kultūrų informaciją. Pavyzdžiui, koks yra A375 padvigubėjimo laikas. Kokia yra A375 ląstelių linijos terpė? Koks yra A375 sėjos tankis? Ar A375 melanomos ląstelės yra adherentiškos?

Pagrindiniai A375 ląstelių kultivavimo punktai

Populiacijos padvigubėjimo laikas:	A375 populiacijos padvigubėjimo laikas yra 20 valandų.
Prigludusios ar suspenduotos:	A375 yra adherentinė žmogaus melanomos ląstelių linija.
Sėjimo tankis:	^ląsteliųtankis: 1 x¹⁰⁴ ląstelės/cm2 - idealus A375 ląstelių kultūrų tankis. Adherentinės ląstelės nuplaunamos 1 x fosfatinio buferinio fiziologinio tirpalo (PBS) tirpalu ir inkubuojamos su perėjimo tirpalu (Accutase). Po to ląstelės buvo užpiltos kultūrine terpe ir centrifuguotos. Surinktos ląstelės buvo resuspenduotos mitybinėje terpėje ir išpilstytos į naujas auginimo kolbas.
Augimo terpė:	DMEM rekomenduojama naudoti kaip idealią A375 terpę, kai ji papildyta 10 % galvijų vaisiaus serumo (FBS), 4,5 g/l gliukozės, 1,5 g/l NaHCO3, 4 mM L-glutamino ir 1,0 mM natrio piruvato. A375 terpė turėtų būti atnaujinama 2-3 dienas per savaitę.
Augimo sąlygos:	A375 melanomos ląstelės auginamos drėkinamame inkubatoriuje (37 °C) su 5 % CO2.
Laikymas:	Užšaldytas A375 ląsteles reikia laikyti žemesnėje nei -150 °C temperatūroje skysto azoto garų fazėje arba elektriniame šaldiklyje.
Šaldymo procesas ir terpė:	A375 ląstelių linijai užšaldyti naudojama CM-1 arba CM-ACF terpė. Siekiant apsaugoti ląstelių gyvybingumą, pasirinktas lėtas šaldymo procesas, leidžiantis palaipsniui mažinti temperatūrą 1 °C.
Atšildymo procesas:	Užšaldytų A375 melanomos ląstelių buteliukas greitai maišomas vandens vonelėje 40-60 sekundžių, kol lieka tik nedidelis ledo gabalėlis. Ląstelės užpilamos šviežia terpe ir centrifuguojamos, kad būtų pašalinti užšaldymo terpės elementai. Gautos ląstelių granulės vėl resuspenduojamos ir supilamos į naujas kolbas.
Biologinės saugos lygis:	A375 kultūros tvarkomos ir laikomos 1 biologinės saugos lygio laboratorijose.

Prigludusių A375 ląstelių sluoksnis 20 kartų padidintas.

A375 ląstelių linijos privalumai ir trūkumai

Kaip ir kitos ląstelių linijos, A375 melanomos ląstelių linija pasižymi unikaliu privalumų ir apribojimų deriniu, todėl ji yra vertinga priemonė melanomos vėžio tyrimams. Šiame skyriuje išvardyti tik keli svarbiausi A375 ląstelių linijos privalumai ir trūkumai.

Privalumai

Toliau išvardyti svarbūs A375 ląstelių linijos privalumai:

Melanomos naviko modelis: A375 ląstelių linija buvo išvesta iš piktybinės melanomos naviko, todėl yra neįkainojamas naviko modelis melanomos biologijai ir terapinėms intervencijoms tirti. Šioms ląstelėms būdingos melanomai būdingos savybės, pavyzdžiui, didelis proliferacijos greitis ir invazyvumas.
Tumorigeniškumas: A375 ląstelės yra labai tumorigeniškos, t. y. jos gali formuoti navikus. Pranešama, kad A375 ląstelės sukuria agresyvias amelanotines melanomas NIH Šveicarijos pelėms, kurios buvo gydomos antitimocitiniu serumu (imunitetą slopinančia priemone).
Gerai apibūdintos: A375 yra genetiškai gerai apibūdinta ląstelių linija. Jai būdingos specifinės genetinės mutacijos, kaip ir melanomai. A375 mutacijos apima A375 BRAF geno pakitimus, todėl ji jautri BRAF specifiniams inhibitoriams. Dėl tokio genetinio profilio A375 ląstelės yra puikus vėžio tyrimų įrankis, kuriuo galima tirti pagrindinius molekulinius kelius ir tikslines terapijas.

Apribojimai

Su A375 ląstelėmis susiję šie apribojimai:

In vitro apribojimai: A375 yra in vitro naviko modelis. Nors jis imituoja melanomos savybes, jis negali visiškai atspindėti melanomos navikų sudėtingumo. Todėl in vitro tyrimo rezultatus apibendrinant klinikiniams tyrimams, reikia elgtis atsargiai.

Įsigykite A375 ląstelių dabar

430,00 €*

Turinys: 1.5 milliliter

Kainos be mokesčių ir pristatymo išlaidų

cryovial

Produkto numeris: 300110

A375 ląstelių linijos pritaikymas moksliniams tyrimams

A375 ląstelių linija plačiai taikoma vėžio tyrimams. Štai kelios dažniausiai pasitaikančios sritys, kuriose naudojamos A375 ląstelės.

Vėžio tyrimai: A375 ląstelės plačiai naudojamos melanomos tyrimams. Mokslininkai šias ląsteles naudojo odos vėžio biologijai, procesams ir pagrindiniams ląstelių signalizavimo mechanizmams, įskaitant ląstelių proliferaciją, migraciją ir invaziją, tirti. Tai taip pat gali padėti mokslininkams nustatyti naujus molekulinius terapinius taikinius. 2019 m. Lino Zhu ir kolegų atliktame tyrime naudotos labai agresyvios melanomos A375 ląstelės ir nustatytas mikroRNA-3662 vaidmuo A375 melanomos ląstelių augimui ir invazijai. Tyrimo išvadose teigiama, kad mikroRNA-3662 taikosi į ZEB1 geną ir reguliuoja melanomos ląstelių augimą in vitro ir in vivo A375 naviko modelyje [2]. Panašiai 2018 m. atlikto tyrimo metu nustatyta, kad PI3K/AKT ir MAPK/ERK keliai dalyvauja A375 ląstelių linijos proliferacijoje ir metastazavime [3].
Vaistų atradimas ir bandymai: A375 ląstelių linija yra naudingas in vitro naviko modelis potencialiems priešvėžiniams vaistams išbandyti ir patikrinti. Mokslininkai, naudodami šias A375 melanomos ląsteles, vertina naujų chemoterapinių vaistų, junginių ir kitų gydymo būdų toksiškumą ir veiksmingumą. Pavyzdžiui, atliktas tyrimas, kurio metu buvo tiriamos iš greipfrutų gautų mikro- ir nanovezikulų priešvėžinės savybės A375 žmogaus melanomos vėžio ląstelėms. Rezultatai atskleidė, kad mikro- ir nanovezikulės sukelia ląstelių ciklo sustojimą ir apoptozę bei stabdo ląstelių proliferacijos, migracijos ir invazijos genų raišką [4].

A375 ląstelės: Publikacijos

Čia paminėtos kelios svarbios mokslinių tyrimų publikacijos apie A375 ląsteles.

Vitaminas D ir jo mažo kalcemiškumo analogai moduliuoja priešvėžines cisplatinos ir dakarbazino savybes žmogaus melanomos A375 ląstelių linijoje

Šis tyrimas buvo paskelbtas žurnale "Journal of Oncology" 2019 m. Tyrime siūloma, kad bendras gydymas vitaminu D ir jo analogais pagerina cisplatinos ir dakarbazino priešvėžinį aktyvumą A375 melanomos ląstelėse.

Pasirinktų alavijo rūšių gelio ir sveikų lapų ekstraktų poveikio prieš melanomą (A375 ląstelių linija) įvertinimas in vitro

Šis tyrimas buvo paskelbtas žurnale "Journal of Herbal Medicine" 2022 m. Šiame tyrime buvo tiriamas alavijo gelio antimelanominis poveikis A375 melanomos ląstelėms.

Fermitino šeimos narys 2 skatina melanomos progresavimą stiprindamas p-α-Pix prisijungimą prie Rac1, kad suaktyvintų MAPK kelią

Šiame žurnale Oncogene (2021) paskelbtame tyrime siūloma, kad 2 fermitino šeimos narys (FERMT2 arba kindlinas-2) skatina melanomos progresavimą aktyvindamas MAPK, jungdamasis su p-α-Pix ir Rac1.

FARP1 palengvina ląstelių proliferaciją moduliuodamas MAPK signalinį kelią odos melanomai

Šiame "The American Journal of Dermatopathology" (2019 m.) paskelbtame tyrime siūloma, kad FARP1 gali palengvinti odos melanomos vystymąsi ir progresavimą. Taigi jis gali būti naudingas terapinis taikinys.

Phyllodium elegans ekstraktų citotoksinis ir apoptozinis potencialas žmogaus vėžio ląstelių linijoms

Šis mokslinis straipsnis buvo paskelbtas žurnale Bioengineered (2019). Šiame tyrime nagrinėtas augalo Phyllodium elegans ekstrakto citotoksinis ir apoptozinis aktyvumas žmogaus karcinomos ląstelių linijoms, įskaitant A375.

A375 ląstelių linijos šaltiniai: Protokolai, vaizdo įrašai ir kt

Toliau pateikiami keli internetiniai ištekliai, kuriuose yra A375 ląstelių.

A375 ląstelių transfekcija: Šis vaizdo įrašas padės jums žingsnis po žingsnio išmokti A375 ląstelių transfekcijos.
Ląstelių kultivavimas: Šiame vaizdo įraše pateikiama labai naudingos informacijos apie ląstelių linijos kultivavimą.

Čia pateikiami A375 ląstelių kultivavimo protokolai.

A375 ląstelių linija: Šioje nuorodoje pateikiama naudinga informacija apie A375 ląstelių linijos kultivavimą ir palaikymą, įskaitant A375 terpę ir užšaldytų bei besidauginančių A375 kultūrų tvarkymą.

Dažniausiai užduodami klausimai (DUK) apie A375 ląsteles

Nuorodos

Avram, S. ir kt., A375 žmogaus melanomos modelių standartizavimas ant vištos embriono chorioalantoinės membranos ir Balb/c nude pelių. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 target ZEB1 and attenuates the invasion of the highly aggressive melanoma cell line A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C inhibits melanoma A375 cell proliferation and metastasis via suppressing PI3K/Akt and MAPK/ERK pathways. Life sciences, 2018. 206: p. 35-44.
Stanly, C., et al, Grapefruit-derived micro and nanovesicles show distinct metabolome profiles and anticancer activities in the A375 human melanoma cell line. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.