一般情報
| 説明 | KC(Kc167)は、背側閉鎖期の雌胚に由来するショウジョウバエ(Drosophila melanogaster)の胚細胞株であり、CellosaurusにCVCL_Z833として登録されている。 この細胞株は当初確立され、以来、ショウジョウバエの細胞生物学、遺伝子スクリーニング、機能ゲノミクスにおいて広く利用されてきた。Kc167細胞はSV40を用いて不死化されており、半付着性で増殖し、付着細胞と緩やかに浮遊する細胞が混在する集団を形成する。 Kc167細胞は、最も詳細に特徴が解明されているショウジョウバエ細胞株の一つであり、RNAiを介した遺伝子サイレンシングに完全に適しているため、無脊椎動物生物学におけるゲノムワイドなRNAiスクリーニングの基盤となるモデルとなっています。 KC細胞は、ショウジョウバエの細胞生物学、ゲノムワイドなRNAiおよびCRISPRスクリーニング、シグナル伝達経路の研究(Wnt/Wingless、Hedgehog、Notch、JAK/STAT、Toll/NF-κB)、自然免疫の研究、および進化的に保存された経路の比較研究に応用可能です。 完全に解読・アノテーションされたショウジョウバエゲノムと、RNAi試薬に関する広範な公開データベース(例:DRSC/TRiP)を組み合わせることで、KC細胞は偏りのない機能ゲノム解析において特に強力なツールとなる。SV40による不死化のため、BSL-2に分類される。 KC細胞は、2 mMグルタミンおよび10% FBSを添加したシュナイダーのショウジョウバエ培地で培養される。重要な点として、ショウジョウバエ細胞株は、CO₂を含まない常温大気中(25°C)で培養される(哺乳類細胞のように37°C/5% CO₂ではない)。 細胞の継代は、穏やかに再懸濁・希釈を行うことで行われる(半付着性培養)。2~3日ごとに培地を交換するか、細胞を希釈する。 |
|---|---|
| 生物 | ショウジョウバエ(Drosophila melanogaster) |
| 組織 | 胚 |
| 病気 | ノーマル |
| 転移部位 | 胚(背側閉鎖期) |
| アプリケーション | ショウジョウバエの細胞生物学;ゲノムワイドRNAiスクリーニング;CRISPRスクリーニング;シグナル伝達(Wnt/Wingless、Hedgehog、Notch、JAK/STAT、Toll/NF-κB);自然免疫;無脊椎動物の機能ゲノミクス |
| 同義語 | KC、K C |
特徴
| 年齢 | 背側閉鎖期 |
|---|---|
| 性別 | 女性 |
| 形態学 | 半付着性上皮様 |
| セルタイプ | 胚細胞 |
| 成長特性 | 半密着型 |
規制データ
| 引用 | KC(Cytion カタログ番号 300604) |
|---|---|
| バイオセーフティレベル | 2 |
| NCBI_TaxID | 7227 |
| セロサウルス・アクセション | CVCL_Z833 |
| GMOステータス | GMO-S2:このショウジョウバエ細胞株には、SV40不死化カセットが安定的に組み込まれています。BSL-2レベルの封じ込め措置が必要です。この分類はドイツ国内にのみ適用され、その他の地域では異なる場合があります。 |
生体分子データ
| ウイルス感受性 | SV40による細胞不死化 |
|---|
ハンドリング
| 培地 | シュナイダーのショウジョウバエ培地 + 2mM グルタミン + 10% 胎児牛血清(FBS)。 |
|---|---|
| サプリメント | 培地に2 mMのグルタミンと10%のFBSを添加する |
| 解離試薬 | 不要(半固形;穏やかに再懸濁すること) |
| 倍増時間 | 約24~48時間 |
| サブカルチャー | ピペットを用いて培養液を穏やかに撹拌し、半付着細胞を再懸濁させる。 適切な量の培養液を新しいフラスコに移し、あらかじめ温めておいた新しいシュナイダー培地を加えます。細胞密度が 5 × 10⁵ ~ 1 × 10⁶ 細胞/ml になるように希釈します。CO₂ を含まない大気中で 25°C に保ちながら培養します。 |
| 分割比率 | 1~3 |
| 播種密度 | 5 × 10⁵ ~ 1 × 10⁶ 細胞/ml |
| フルード更新 | 2~3日ごと |
| フリーズ・ミディアム | 凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。 |
| 細胞の解凍と培養 |
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| インキュベーションの雰囲気 | 25°C、周囲空気(CO₂は不要)。 |
| 配送条件 | 凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。 |
| 保管条件 | 長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。 |
品質管理および分子分析
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