HT55細胞
一般情報
| 説明 | HT55は、54歳の白人女性の直腸原発腫瘍から樹立されたヒト直腸腺癌細胞株である。この細胞株は、上皮様形態を呈する付着性単層として増殖し、CellosaurusにCVCL_1294として登録されている。 HT55は、APC(腺腫性ポリポーシス・コリ)腫瘍抑制遺伝子において、p.Gln1131Ter、p.Gln1303Ter、p.Arg1463Ser、 p.Asn581Tyr、p.Lys241Ter(いずれもヘテロ接合体)に加え、ホモ接合体のp.Arg213Leu置換変異も有している。 この変異プロファイルにより、HT55はAPCに起因する大腸がん発生の生物学的に関連性の高いモデルとなっており、ヒトの大腸がんの大部分を駆動する標準的なWNT経路の調節異常を反映しています。 HT55は、WNT/β-カテニンシグナル伝達、APCの腫瘍抑制機能、薬剤感受性および耐性、ならびにWNT経路の構成要素を標的とする薬剤の前臨床評価に関する研究において、大腸がん研究で広く利用されています。 この細胞株は、in vitro 薬理学的アッセイや免疫不全マウスモデルを用いた異種移植研究に適しており、大腸がんのメカニズム解明およびトランスレーショナル研究のための、接着性が高く扱いやすい in vitro プラットフォームを提供します。 複数の APC 切断変異が存在するため、HT55 は、APC の機能喪失によって一般的に引き起こされる、マイクロサテライト安定で染色体不安定な大腸がんのサブタイプを代表するものです。 HT55 は、EMEM(MEM Eagle、w: 2 mM L-グルタミン、w: 2.2 g/L NaHCO3、w: EBSS; Cytion品番 820100a)に10% FBSを添加した培地中で、37°C、5% CO₂を含む加湿雰囲気下で維持される。 細胞は、約80~90%のコンフルエントに達した時点でAccutaseを用いて継代し、推奨される分割比は1:3~1:5、播種密度は1~3 × 10⁴細胞/cm²とする。培地は2~3日ごとに交換する。倍加時間は約28時間である。 |
|---|---|
| 生物 | 人間 |
| 組織 | 直腸 |
| 病気 | 腺癌 |
| アプリケーション | 大腸がんの研究;WNT/APCシグナル伝達経路の研究;薬剤感受性および耐性検査;前臨床腫瘍学;異種移植モデル;標的療法の評価 |
| 同義語 | HT55 |
特徴
| 年齢 | 54年 |
|---|---|
| 性別 | 女性 |
| エスニシティ | 白人 |
| 形態学 | 上皮様 |
| セルタイプ | 上皮細胞 |
| 成長特性 | 信者 |
規制データ
| 引用 | HT55(Cytion カタログ番号 305018) |
|---|---|
| バイオセーフティレベル | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| セロサウルス・アクセション | CVCL_1294 |
生体分子データ
| 変異プロファイル | 変異:p.Gln1131Ter、ヘテロ接合体;変異:p.Gln1303Ter、ヘテロ接合体;変異:p.Arg1463Ser、ヘテロ接合体;変異:p.Asn581Tyr、ヘテロ接合体;変異:p.Lys241Ter、ヘテロ接合体; 変異:p.Arg213Leu、ホモ接合体 |
|---|
ハンドリング
| 培地 | EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a) |
|---|---|
| サプリメント | 培地に10% FBSを加える |
| 解離試薬 | アキュターゼ |
| 倍増時間 | 28時間 |
| サブカルチャー | 付着細胞から古い培地を取り除き、カルシウムおよびマグネシウムを含まないPBSで細胞を洗浄します。T25フラスコの場合は3~5 ml、T75フラスコの場合は5~10 mlのPBSを使用してください。 次に、T25フラスコには1~2 ml、T75フラスコには2.5 mlのAccutaseを用いて、細胞を完全に覆うように加えます。細胞を室温で8~10分間インキュベートし、細胞を剥離させます。 インキュベーション後、10 mlの培地を加えて細胞を穏やかに混合して再懸濁させ、300×gで3分間遠心分離します。上清を廃棄し、細胞を新しい培地に再懸濁させた後、あらかじめ新しい培地が入れられた新しいフラスコに移します。 |
| 分割比率 | 1~5 |
| 播種密度 | 1~3×10⁴細胞/cm² |
| フルード更新 | 2~3日ごと |
| フリーズ・ミディアム | 凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。 |
| 細胞の解凍と培養 |
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| インキュベーションの雰囲気 | 37℃、5%CO2、加湿雰囲気。 |
| 配送条件 | 凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。 |
| 保管条件 | 長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。 |
品質管理および分子分析
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