CHO-EGFR細胞
一般情報
| 説明 | 免責事項:細胞株の表示価格は、学術機関および非営利団体のお客様のみを対象としています。営利団体のお客様の場合、価格は約6,250ユーロとなります。 CHO-EGFR細胞は、ErbBファミリーに属する受容体チロシンキナーゼであるヒト上皮成長因子受容体(EGFR/ERBB1/HER1)を安定発現するように改変された、組換えチャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞です。 EGFRは、MAPK/ERK、PI3K/AKT、JAK/STATなどの下流シグナル伝達経路を活性化することで、増殖、生存、遊走、分化といった主要な細胞プロセスを調節します。EGFRの異常発現、増幅、または変異は、非小細胞肺がん、大腸がん、膠芽腫、頭頸部扁平上皮がんなど、多くの固形腫瘍と頻繁に関連しています。 安定したCHO-EGFRモデルは、受容体の生物学および治療的標的化を調査するための制御されたプラットフォームを提供します。 CHO-EGFR細胞は、抗EGFRモノクローナル抗体、チロシンキナーゼ阻害剤、二重特異性抗体、抗体薬物複合体、および遺伝子改変免疫細胞療法の特性評価において、腫瘍学研究や生物製剤開発で広く使用されています。これらの細胞は、リガンド結合、受容体活性化、内取り込み、リン酸化状態、下流シグナル伝達、および治療的遮断の定量的評価を可能にします。 また、フローサイトメトリーアッセイ、受容体占有率の研究、ハイスループットスクリーニング、および効力試験のワークフローにおいても一般的に用いられています。CHO細胞は堅牢な増殖特性を有し、ヒト受容体系の内因性発現が比較的低いため、組換えEGFRの発現および標準化されたアッセイ開発のための再現性の高いバックグラウンドを提供します。 |
|---|---|
| 生物 | チャイロハムスター |
| 組織 | 卵巣 |
| 病気 | チャイニーズハムスター卵巣細胞(非腫瘍性);EGFRの表面発現を目的とした遺伝子改変 |
| アプリケーション | 抗体スクリーニング;EGFR標的療法の開発;ADCC/CDCアッセイ;肺がん・大腸がんの研究;フローサイトメトリー |
特徴
| 年齢 | アダルト |
|---|---|
| 性別 | 女性 |
| 形態学 | 上皮様 |
| セルタイプ | 卵巣の上皮細胞 |
| 成長特性 | 付着・懸濁 |
規制データ
| 引用 | CHO-EGFR(Cytion カタログ番号 305977) |
|---|---|
| バイオセーフティレベル | 1 |
| NCBI_TaxID | 10029 |
| セロサウルス・アクセション | CVCL_A8W3 |
| GMOステータス | GMO-S1:このCHO細胞株には、受容体機能解析を可能にするEGFR発現カセットが含まれています。この分類はドイツ国内にのみ適用され、その他の地域では異なる場合があります。 |
生体分子データ
| 表面抗原 | EGFR(HER1/ErbB1/CD340) |
|---|
ハンドリング
| 培地 | 接着培養用DMEM:Ham's F12 (1:1)、3.1 g/L グルコース、2.5 mM L-グルタミン、15 mM HEPES、0.5 mM ピルビン酸ナトリウム、1.2 g/L NaHCO3 (Cytion article number 820400a) 懸濁培養用CHO増殖培地A(InSCREENeX社製、InSCREENeXカタログ番号INS-ME-1039) |
|---|---|
| サプリメント | 接着性培養の場合培地に5%FBSを添加する。最終濃度が0.5 mg/mLになるようにGeneticin(G418-Sulfat)を添加する。 |
| 解離試薬 | 接着培養用トリプシン-EDTA |
| 倍増時間 | 約14~16時間 |
| サブカルチャー | 通常の接着細胞培養の場合:付着細胞から古い培地を吸引し、PBSで洗浄して残存培地を除去する。PBSを吸引した後、培養容器のサイズに応じて適切な量のTrypsin/EDTA溶液を加え(例えば、T25フラスコなら1ml、T75フラスコなら3ml)、室温または37℃で5~10分間、あるいは細胞が剥離するまでインキュベートする。顕微鏡で剥離を観察し、必要なら容器を軽くたたいて細胞を離す。いったん剥離したら、完全培地を加えてTrypsin/EDTAを失活させ、細胞を静かに再懸濁し、細胞懸濁液のアリコートを新しい培地の入った新しい培養容器に移す。容器を37℃、5%CO2に設定したインキュベーターに入れ、2~3日ごとに培地を交換する。 |
| 分割比率 | 1~5 |
| 播種密度 | 2~5 × 10⁴ 細胞/cm² |
| フルード更新 | 週2~3回 |
| 解凍後の回復 | 解凍後、T25フラスコに1:2~1:3の割合で細胞を分割し、少なくとも24時間、細胞を凍結から回復させ、接着させる(接着培養の場合)。 |
| フリーズ・ミディアム | 凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。 |
| 細胞の解凍と培養 |
|
| インキュベーションの雰囲気 | 37℃、5%CO2、加湿雰囲気。 |
| 配送条件 | 凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。 |
| 保管条件 | 長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。 |
品質管理および分子分析
| 不妊症 | マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。 細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査を受けている。 |
|---|