Larutan Pemisah Sel Accutase dengan EDTA dan Fenol Merah – 100 ml

Accutase adalah larutan pelepasan sel siap pakai yang telah disaring secara steril, dirancang sebagai alternatif yang lembut untuk trypsin/EDTA dalam memisahkan sel mamalia yang melekat dari peralatan kultur jaringan plastik standar dan permukaan yang dilapisi adhesi. Larutan ini menggabungkan aktivitas enzim proteolitik dan kolagenolitik dalam larutan garam seimbang untuk memberikan pemisahan yang efektif namun terkendali, menjaga protein permukaan sel, serta mendukung viabilitas tinggi setelah pemindahan dan re-adhesi yang cepat.

Formulasi Accutase didasarkan pada larutan garam fosfat Dulbecco (DPBS) dengan EDTA dan fenol merah sebagai indikator pH visual. Enzim-enzim ini berasal dari sumber non-mamalia dan non-bakteri, sehingga Accutase sangat cocok untuk penelitian sel punca, alur kerja vaksin, dan aplikasi apa pun di mana kontaminan yang berasal dari hewan atau mikroba harus diminimalkan. Larutan ini mengalami auto-inhibisi pada 37 °C, sehingga tidak diperlukan reagen penetralisir atau media yang mengandung serum setelah pelepasan – sel dapat dipindahkan langsung ke media segar.

Fitur Utama

Cairan 1x yang sudah disaring steril dan siap pakai – tidak perlu pengenceran atau rekonstitusi
Aktivitas enzim proteolitik dan kolagenolitik yang digabungkan untuk disosiasi yang lembut
Setiap batch distandarisasi ke aktivitas pemisahan yang ditentukan untuk konsistensi antar-lot
Asal enzim non-mamalia dan non-bakteri
Menghambat sendiri pada 37 °C – tidak memerlukan larutan penetralisir
Diformulasikan dalam PBS Dulbecco dengan EDTA
Phenol red disertakan sebagai indikator pH visual
pH 6,8 – 7,8


Aplikasi Umum
Accutase dengan lembut memisahkan berbagai jenis sel yang melekat dan sensitif, termasuk sel induk embrionik manusia (hESCs), sel induk pluripotent yang diinduksi manusia (iPSCs), sel induk saraf, neuron primer, dan garis sel yang melekat yang dibudidayakan secara rutin seperti HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21, dan A549. Contoh penggunaan meliputi:

Subkultur rutin dan pemindahan sel mamalia yang melekat
Disosiasi sel tunggal yang lembut pada hESCs, iPSCs, dan garis sel sensitif lainnya
Persiapan sampel untuk analisis sitometri aliran dan FACS
Analisis penanda permukaan sel di mana integritas epitop sangat penting
Uji migrasi sel, proliferasi, dan apoptosis
Uji ketenangan sel melalui studi kelaparan serum dan transfeksi onkogen
Uji migrasi sel tumor dan sel krest saraf
Peningkatan skala produksi dalam alur kerja bioreaktor

Untuk pekerjaan rutin, gunakan sekitar 10 ml Accutase per 75 cm2 permukaan kultur dan inkubasi selama 5–10 menit pada suhu kamar. Waktu inkubasi yang optimal harus ditentukan untuk setiap lini sel dan tidak boleh melebihi satu jam. Sebelum penambahan, bilas lapisan sel dengan larutan garam bebas Ca2+/Mg2+ seperti DPBS tanpa kalsium dan magnesium untuk menghilangkan sisa serum dan kation divalen.

Penanganan & Penyimpanan
Simpan botol yang belum dibuka dalam keadaan beku pada suhu -15 °C atau lebih rendah. Lelehkan pada suhu ruang atau semalaman pada suhu +2 °C hingga +8 °C. Jangan melelehkan Accutase dalam bak air bersuhu 37 °C, karena suhu tinggi dapat mengurangi aktivitas enzim. Setelah dilelehkan, larutan dapat disimpan hingga 2 bulan pada suhu +2 °C hingga +8 °C; jangan disimpan pada suhu ruang. Jangan memanaskan reagen terlebih dahulu hingga 37 °C sebelum digunakan – tambahkan langsung ke sel yang telah dicuci pada suhu kamar. Untuk masa simpan yang lama, disarankan untuk membagi reagen menjadi beberapa bagian sekali pakai untuk menghindari siklus pencairan berulang. Selalu lakukan pekerjaan dalam kondisi aseptik.

Kualitas
Diproduksi di bawah standar kualitas yang ketat. Setiap batch Accutase disaring secara steril dan diuji sterilitas, pH, penampilan, dan aktivitas disosiasi untuk memastikan kinerja yang konsisten dan dapat direproduksi dari lot ke lot.

Spesifikasi Produk



Spesifikasi
Detail



Jenis produkReagen pelepasan sel / disosiasi
FormatCairan yang telah disaring secara steril, siap pakai
Volume100 ml
Konsentrasi kerja1x (siap pakai)
Aktivitas enzimKombinasi proteolitik dan kolagenolitik
Asal enzimNon-mamalia dan non-bakteri
Sistem bufferPBS Dulbecco dengan EDTA
Indikator pHMerah fenol
Rentang pH6,8 – 7,8
PenampilanLarutan bening, berwarna merah pucat hingga oranye
Suhu penyimpanan-15 °C atau lebih rendah
Stabilitas setelah dicairkanHingga 2 bulan pada suhu +2 °C hingga +8 °C
Volume penggunaan yang disarankan~10 ml per 75 cm² permukaan kultur
Waktu inkubasi tipikal5 – 10 menit pada suhu kamar
Kondisi pengirimanDibekukan dengan es kering
Tujuan penggunaanHanya untuk penggunaan penelitian dan produksi lebih lanjut



Formulasi (Komposisi per Liter)



Komponen
Konsentrasi (mg/L)




Garam Anorganik

Natrium klorida (NaCl)8000,00
Disodium hidrogen fosfat (Na₂HPO₄)1150,00
Klorida kalium (KCl)200,0
Kalium dihidrogen fosfat (KH₂PO₄)200,00

Komponen Lain

EDTA · 4Na (EDTA tetrasodium)220,00
Fenol merah3,00
Campuran enzim eksklusif (aktivitas proteolitik dan kolagenolitik)1x



Accutase adalah merek dagang terdaftar milik Innovative Cell Technologies, Inc.

Larutan Garam Penyangga Fosfat (PBS)
Phosphate-buffered saline (PBS) adalah larutan penyangga yang banyak digunakan dalam penelitian biologi dan kimia. Larutan ini memainkan peran penting dalam menjaga keseimbangan pH dan osmolaritas selama berbagai prosedur eksperimental, termasuk pemrosesan jaringan dan kultur sel. Larutan PBS kami diformulasikan secara cermat dengan bahan-bahan dengan kemurnian tinggi untuk memastikan stabilitas dan keandalan dalam setiap percobaan. Osmolaritas dan konsentrasi ion PBS kami sangat mirip dengan tubuh manusia, membuatnya isotonik dan tidak beracun bagi sebagian besar sel.

Komposisi Larutan PBS Kami
Larutan PBS kami adalah campuran yang disesuaikan dengan pH dari buffer fosfat tingkat ultra murni dan larutan garam. Pada konsentrasi kerja 1X, larutan ini mengandung:

8000 mg/L Natrium klorida (NaCl)
200 mg/L Kalium klorida (KCl)
1150 mg/L Natrium fosfat dibasa anhidrat (Na2HPO4)
200 mg/L Kalium fosfat monobasa anhidrat (KH2PO4)

Komposisi ini memastikan pH dan keseimbangan ionik yang optimal, cocok untuk berbagai aplikasi biologis.

Aplikasi Solusi PBS Kami
Larutan PBS kami ideal untuk berbagai aplikasi dalam penelitian biologi. Sifatnya yang isotonik dan tidak beracun membuatnya cocok untuk pengenceran zat dan pembilasan wadah sel. Larutan PBS yang mengandung EDTA efektif untuk melepaskan sel yang melekat dan menggumpal. Namun, logam divalen seperti seng tidak boleh ditambahkan ke dalam PBS, karena dapat menyebabkan pengendapan. Dalam kasus seperti itu, buffer Good direkomendasikan. Selain itu, larutan PBS kami merupakan alternatif yang dapat diterima untuk media transpor virus untuk transpor dan penyimpanan virus RNA, termasuk SARS-CoV-2.

Kontrol Kualitas

Disaring dengan steril


Penyimpanan dan Umur Simpan

Simpan pada suhu +2°C hingga +25°C, terlindung dari cahaya.
Setelah dibuka, simpan pada suhu 2°C hingga 25°C dan gunakan dalam waktu 24 bulan.


Ketentuan Pengiriman

Suhu lingkungan


Pemeliharaan

Simpan dalam lemari es pada suhu +2°C hingga +8°C di tempat gelap. Hindari pembekuan dan pemanasan yang sering hingga +37°C, karena dapat mengurangi kualitas produk.
Jangan memanaskan media melebihi 37°C atau menggunakan sumber panas yang tidak terkendali seperti peralatan microwave.
Jika hanya sebagian dari media yang akan digunakan, keluarkan jumlah yang diperlukan dan hangatkan ke suhu kamar sebelum digunakan.

Komposisi



Kategori
Komponen
Konsentrasi (mg/L)


Garam
Kalium klorida
200



Kalium fosfat monobasa anhidrat
200



Natrium klorida
8000



Natrium fosfat dibasa anhidrat anhidrat
1150

Mikoplasma adalah organisme prokariotik kecil yang terlalu kecil untuk terlihat dalam mikroskop dan tidak dapat dihilangkan dengan reagen antibiotik umum. Mikoplasma dapat memengaruhi pertumbuhan sel, proliferasi, dan morfologi garis sel yang dapat menyebabkan hasil eksperimental yang tidak dapat diandalkan. sekitar 15 hingga 35% kultur sel laboratorium terkontaminasi mikoplasma. Oleh karena itu, kontrol yang sering dianjurkan untuk menjamin lingkungan yang bebas dari mikoplasma.
Metode analisis
CLS menawarkan pengujian jangka pendek dan jangka panjang untuk deteksi mikoplasma. Dalam pengujian jangka pendek, sampel diuji segera setelah tiba, sedangkan dalam pengujian jangka panjang, kultur sel dimulai dan sel diuji setelah 14 hari kultivasi bebas antibiotik. Pengujian mikoplasma dilakukan dengan menggunakan sistem deteksi dua titik dengan PlasmoTest ™
- Mycoplasma Detection Kit (Invivogen) dan Certus QC
- mycoADVANCED detection kit (Certus).
Sampel

Untuk tes cepat, harap sediakan minimal 50 μl suspensi sel yang mengandung 50.000 sel. Suspensi sel dapat dikirim pada suhu kamar.
Untuk tes premium, harap sediakan minimal 1 juta sel dalam media pembekuan yang sesuai untuk memastikan kultur yang kuat dan sehat untuk kultivasi dan pengujian sel selanjutnya. Harap kirimkan sampel di atas es kering.

Silakan isi Formulir Sampel Pengujian Mycoplasma dan sertakan dengan pengiriman sampel Anda.

Uji Reporter Kolorimetri
Tes ini adalah tes kolorimetri berbasis sel. Dengan adanya mikoplasma, garis sel reporter menginduksi kaskade pensinyalan yang memicu perubahan warna pada medium dari merah menjadi biru. Pengujian dilakukan dalam pelat multi-sumur 96 sumur. Sinyal terdeteksi dalam spektrofotometer lempeng mikro pada 620-655 nm. Semua spesies mikoplasma dan acholeplasma, tetapi juga kontaminan lain dalam kultur sel seperti bakteri, terdeteksi.
Amplifikasi isotermal
Amplifikasi isotermal adalah tes yang cepat dan andal berdasarkan amplifikasi isotermal DNA spesifik mikoplasma yang dikombinasikan dengan deteksi waktu nyata menggunakan pewarna penghubung DNA. Pengujian ini mampu mendeteksi enam spesies paling umum yang menyumbang> 95% kontaminasi: M.orale, M.hyorhinis, M.arginini, M.fermentans, M.hominis dan A.laidlawii. Karena homologi sekuens, spesies mikoplasma lainnya juga akan terdeteksi (M.pneumoniae, M.gallisepticum dan M.synoviae). Untuk mengidentifikasi apakah sampel tersebut positif atau negatif Mycoplasma, suhu leleh (Tm) dipelajari.