Sel Hep2 dan Perannya dalam Penelitian Kanker Laring
Sel Hep 2 merupakan model in vitro yang sangat penting dan digunakan secara luas di berbagai bidang penelitian biomedis, seperti reumatologi, penelitian kanker, dan imunologi. Berasal dari karsinoma laring, sel-sel manusia ini telah berperan penting dalam mengungkap jaringan asal dan ciri-ciri spesifik neoplasma laring. Pentingnya sel ini telah diakui dalam penelitian kanker translasi, di mana sel ini telah memberikan kontribusi besar terhadap pemahaman kita tentang sifat dan asal mula kanker laring, serta menandai kehadiran yang substansial dalam publikasi penelitian kanker laring [1].
- Media Pertumbuhan
- EMEM atau Eagle's minimal essential medium digunakan untuk membiakkan sel Hep 2. Media ini ditambah dengan 10% FBS, 1,0 g/L glukosa, 2,2 g/L NaHCO3, 2,0 mM L-glutamin, 1% NEAA, dan 1 mM natrium piruvat untuk pertumbuhan sel yang ideal. Media harus diganti 2 hingga 3 kali seminggu.
- Waktu Perlipatan
- Waktu penggandaan yang dilaporkan untuk sel Hep 2 adalah sekitar 40 jam.
- Jenis Pertumbuhan
- Sel Hep 2 bersifat melekat dan tumbuh menjadi lapisan tunggal.
- Tingkat Keamanan Biologis
- BSL-1
- Tersedia dari
- Cytion — Pesan Hep2
Asal dan karakteristik umum sel Hep 2
Asal dan karakteristik umum suatu garis sel menentukan kegunaannya dalam penelitian. Bagian ini akan membantu Anda memahami asal dan beberapa ciri khas sel Hep 2. Misalnya, Anda akan mengetahui: Apa itu garis sel Hep-2? Dari mana asal sel Hep 2? Dan bagaimana morfologi sel Hep 2?
- Hep 2, sebuah garis sel epitel manusia yang abadi, pertama kali dijelaskan oleh H.W. Toolan sebagai sel karsinoma laring pada tahun 1954. Namun, belakangan ini dilaporkan bahwa garis sel Hep 2 terdiri dari sel adenokarsinoma serviks dan berasal dari kontaminasi garis sel Hela [2].
- Sel Hep 2 mengandung kromosom penanda Hela dan terbukti positif untuk keratin dan urutan DNA human papillomavirus sebagaimana dikonfirmasi melalui pewarnaan imunoperoxidase dan PCR.
- Turunan garis sel Hela, Hep 2, memiliki morfologi mirip epitel.
- Garis sel Hep 2 menunjukkan kelainan kromosom baik secara struktural maupun numerik dengan kariotipe yang mendekati triploid [3].
Garis sel HEp-2: Informasi tentang kultur sel
Sebelum bekerja dengan suatu garis sel, kita harus mengetahui poin-poin kunci berikut untuk pembiakannya. Informasi ini dapat berguna untuk membiakkan dan memelihara garis sel secara efektif. Anda harus mengetahui: Berapa waktu penggandaan sel Hep-2? Apakah sel Hep-2 bersifat melekat? Berapa kepadatan penaburan sel Hep-2?
Waktu Penggandaan Populasi:
Waktu penggandaan yang dilaporkan untuk sel Hep 2 adalah sekitar 40 jam.
Melekat atau dalam Suspensi:
Sel Hep 2 bersifat melekat dan tumbuh menjadi lapisan tunggal.
Kepadatan Penaburan:
Kepadatan penyemaian 1 x 104 sel/cm2 ideal untuk kultur sel Hep 2. Untuk penyemaian, sel Hep 2 yang melekat dibilas dengan larutan PBS 1x, diikuti dengan inkubasi dengan larutan disosiasi Accutase. Setelah inkubasi selama 8–10 menit pada suhu kamar, sel-sel tersebut disuspensi kembali dalam media dan disentrifugasi. Sel-sel yang terkumpul kemudian dimasukkan ke dalam media baru dan dituangkan ke dalam labu baru untuk kultur.
Media Pertumbuhan:
EMEM atau Eagle's minimal essential medium digunakan untuk membiakkan sel Hep 2. Media ini ditambahkan dengan 10% FBS, 1,0 g/L glukosa, 2,2 g/L NaHCO3, 2,0 mM L-glutamin, 1% NEAA, dan 1 mM natrium piruvat untuk pertumbuhan sel yang ideal. Media harus diganti 2 hingga 3 kali seminggu.
Kondisi Pertumbuhan:
Seperti garis sel mamalia lainnya, Hep 2 juga dikultur dalam inkubator yang dilembabkan pada suhu 37°C dan dengan pasokan CO2 5% secara terus-menerus.
Penyimpanan:
Sel Hep 2 dapat disimpan dalam freezer listrik bersuhu sangat rendah (di bawah -150 °C) atau dalam fase uap nitrogen cair untuk penyimpanan jangka panjang.
Proses Pembekuan dan Media:
Media pembekuan yang direkomendasikan untuk sel Hep 2 adalah CM-1 atau CM-ACF. Sel harus dibekukan menggunakan proses pembekuan lambat yang memungkinkan penurunan suhu secara bertahap sebesar 1 °C dan melindungi viabilitas sel.
Proses Pencairan:
Vial sel beku segera dicairkan dengan cara dikocok dalam penangas air pada suhu 37°C hingga hanya tersisa gumpalan es kecil. Sel kemudian ditambahkan ke media segar dan disentrifugasi untuk menghilangkan komponen media pembekuan. Selanjutnya, endapan sel disuspensi kembali dalam media, dan sel-sel tersebut ditempatkan ke dalam botol kultur. Sel perlu didiamkan selama hampir 24 jam agar melekat.
Tingkat Keamanan Biologis
Laboratorium tingkat keamanan biologis 1 direkomendasikan untuk penanganan dan pemeliharaan kultur sel Hep 2.
Keunggulan & Keterbatasan Sel Hep 2
Hampir semua garis sel memiliki kombinasi unik antara kelebihan dan keterbatasan yang memengaruhi penggunaannya di bidang penelitian. Bagian ini akan menjelaskan beberapa kelebihan dan kekurangan utama yang terkait dengan garis sel Hep 2.
Keunggulan
Keuntungan utama dari garis sel Hep 2 adalah:
- Berasal dari Manusia: Hep 2 berasal dari sel epitel manusia, menjadikannya model in vitro yang berharga untuk mempelajari penyakit manusia dan infeksi virus.
- Deteksi ANA: Lini sel Hep 2 memiliki susunan protein asli yang menghadirkan banyak antigen, menjadikannya substrat yang sangat baik untuk mendeteksi antibodi antinuklear (ANA). Fitur ini memungkinkan skrining ANA yang spesifik dan sangat sensitif dalam serum, menjadikannya alat diagnostik yang sangat penting untuk mengidentifikasi penyakit jaringan ikat.
Keterbatasan
- Kelainan Kromosom: Sel Hep 2 menunjukkan berbagai kelainan kromosom numerik dan struktural. Kelainan ini dapat memengaruhi perilaku sel dan mungkin membatasi penggunaannya dalam eksperimen laboratorium tertentu.
- Tumorigenisitas: Hep 2, garis sel epitel manusia yang berasal dari tumor, mungkin memiliki kelainan genetik yang biasanya tidak ditemukan pada sel epitel. Akibatnya, penggunaan sel Hep 2 mungkin dibatasi dalam penelitian tertentu yang berfokus pada fisiologi sel normal.
Perluasan Aplikasi Garis Sel Hep 2 dalam Penelitian Biomedis
Garis sel Hep 2 menonjol sebagai model teladan untuk berbagai aplikasi dalam penelitian biomedis. Terkenal karena keserbagunaannya, sel-sel ini memainkan peran penting dalam eksperimen in vitro, mulai dari analisis reseptor hingga studi penyakit kompleks.
Menjelajahi Mekanisme Tumorigenik dan Target Terapi dengan Sel Hep 2
Sel Hep 2, yang bersifat tumorigenik, sangat penting untuk menyelidiki seluk-beluk biologi kanker. Sel-sel ini memberikan wawasan tentang jalur sinyal kanker, studi mekanistik, dan menjadi andalan dalam penyaringan dan evaluasi obat antikanker. Sebagai contoh, sebuah studi mendalam menggunakan Hep 2 untuk mengidentifikasi pengaruh miRNA-33a terhadap proliferasi sel kanker. Temuan tersebut mengungkap efek antiproliferatif miRNA-33a melalui interaksinya dengan PIM1, sebuah onkogen yang diketahui, yang menyarankan target terapeutik baru [4]. Dalam contoh lain, Hep 2 digunakan dalam menilai potensi terapeutik nanopartikel oksida seng Marsdenia tenacissima, yang menyoroti kemanjuran antiproliferatif dan apoptosisnya [5].
Memperkaya Penelitian Virologi dengan Wawasan Sel Hep 2
Kerentanan sel Hep 2 terhadap berbagai virus manusia menjadikannya sumber daya yang sangat berharga dalam penelitian virologi. Sel-sel ini telah digunakan secara efektif dalam ekspresi gen virus SARS-CoV-2 untuk mengungkap interaksi kompleks antara virus dan mekanisme seluler inang [6]. Aplikasi ini sangat penting di era saat ini, di mana memahami dan memerangi infeksi virus seperti COVID-19 menjadi prioritas global.
Menguraikan Fungsi Seluler: Manipulasi Gen dalam Sel Hep 2
Kemampuan garis sel Hep 2 untuk beradaptasi terhadap manipulasi genetik menegaskan kegunaannya dalam studi mekanistik. Para peneliti memanfaatkan fitur ini untuk memodulasi ekspresi gen dan menguraikan peran gen tertentu dalam fungsi seluler. Sebuah studi penting melibatkan ekspresi berlebih protein pengikat RNA RBM6 dalam sel Hep 2, yang memfasilitasi penyelidikan potensi penekan tumornya, memberikan wawasan berharga mengenai dasar molekuler kanker [7].
Meningkatkan Diagnosis Penyakit melalui Aplikasi Sel Hep 2
Di luar bidang penelitian ini, sel Hep 2 dikenal karena kemampuan diagnostiknya, terutama dalam mendeteksi ANA, yang sangat penting dalam diagnosis penyakit autoimun seperti lupus eritematosus sistemik. Ketepatan sel Hep 2 dalam menampilkan ANA mendukung diagnosis dan pengembangan pengobatan yang ditargetkan, meningkatkan pemahaman kita tentang patologi autoimun, serta meningkatkan perawatan pasien.
Melalui berbagai aplikasi ini, sel Hep 2 telah memberikan kontribusi signifikan terhadap kemajuan dalam penelitian kanker translasional, studi infeksi virus, dan eksplorasi mekanisme seluler. Kontribusi mereka dalam menghasilkan data yang relevan secara klinis sangat berharga, menegaskan peran mereka yang tak tergantikan baik di laboratorium maupun di klinik. Seiring dengan terus berkembangnya penelitian, garis sel Hep 2 pasti akan tetap berada di garis depan, membantu penemuan pengobatan baru dan memperluas pengetahuan kita tentang kesehatan dan penyakit manusia.
Dapatkan Garis Sel HEp-2 Anda Sekarang Juga
Sel Hep 2: Publikasi Penelitian
Berikut ini adalah beberapa publikasi penelitian yang menarik dan paling sering dikutip mengenai sel Hep 2.
- Sintesis nanopartikel oksida seng dari Marsdenia tenacissima menghambat proliferasi sel dan menginduksi apoptosis pada sel kanker laring (Hep-2)
Artikel ini yang diterbitkan dalam Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2019) mengeksplorasi potensi antikanker dari nanopartikel oksida seng Marsdenia tenacissima yang disintesis secara biologis pada garis sel Hep 2. - Nanopartikel PLGA yang dimuat dengan hesperidin dan diformulasikan secara biologis menentang jalur apoptosis intrinsik yang dimediasi mitokondria pada sel
kanker Makalah ini diterbitkan dalam Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials pada tahun 2021. Studi ini meneliti sifat antikanker nanopartikel Poly (lactic-co-glycolic acid) (PLGA) yang diformulasikan secara biologis dan dimuat dengan hesperidin pada sel Hep 2. - Aktivitas antivirus ekstrak etanol Lophatherum gracile terhadap infeksi
virus pernapasan sinkron Publikasi dalam Journal of Ethnopharmacology pada tahun 2019 ini menggunakan sel Hep 2 untuk mempelajari infeksi virus pernapasan sinkron dan menyaring obat antivirus untuk mengatasinya. Studi ini melaporkan potensi antivirus yang menjanjikan dari ekstrak etanol tanaman obat, yaitu Lophatherum gracile, terhadap infeksi virus respiratorik sincytial. - Evaluasi ekstrak air dari empat tanaman aromatik untuk aktivitasnya melawan adhesi Candida albicans pada sel
epitel HEp-2 manusia Penelitian ini diterbitkan dalam Gene Reports (2020). Studi ini mengeksplorasi potensi penghambatan ekstrak air dari empat tanaman aromatik terhadap adhesi Candida albicans pada sel epitel Hep 2 manusia. - Protein sinyal yang diinduksi Wnt1 (WISP1) mengatur glikolisis dan resistensi kemoterapi pada karsinoma sel skuamosa laring melalui jalur
YAP1/TEAD1/GLUT1. Penelitian ini diterbitkan dalam Journal of Cellular Physiology pada tahun 2019. Studi ini melaporkan bahwa protein sinyal yang diinduksi Wnt1 (WISP1) berinteraksi dengan jalur YAP1/TEAD1/GLUT1 dan mengatur metabolisme glukosa serta resistensi kemoterapi pada garis sel Hep 2.
Sumber Daya untuk Garis Sel Hep2: Protokol, Video, dan Lainnya
Hep 2 adalah garis sel yang terkenal. Terdapat beberapa sumber daya yang tersedia mengenai garis sel Hep 2.
- Subkultur garis sel Hep 2: Video ini adalah panduan langkah demi langkah untuk subkultur sel Hep 2.
- Skrining ANA sel Hep 2: Video ini menjelaskan skrining antibodi antinuklear (ANA) menggunakan garis sel Hep 2.
- Kultur Hep 2: Tautan ini berisi informasi dasar kultur sel tentang sel Hep 2. Informasi tersebut mencakup pemisahan sel, pembekuan sel, dan pencairan.
Pertanyaan yang Sering Diajukan tentang Sel HEp-2 dalam Penelitian Biomedis
Daftar Pustaka
- Fusi, M. dan S. Dotti, Adaptasi garis sel HEp-2 ke sistem kultur yang sepenuhnya bebas bahan hewani dan analisis pertumbuhan sel secara real-time. Biotechniques, 2021. 70(6): hlm. 319-326.
- Gorphe, P., Tinjauan komprehensif tentang garis sel Hep-2 dalam penelitian translasi untuk kanker laring. Am J Cancer Res, 2019. 9(4): hlm. 644-649.
- Wang, M., dkk., Fibroblas terkait kanker dalam tumor xenograft laring yang dibentuk dari sel HEp-2 manusia tidak berasal dari sel kanker melalui transisi epitel-mesenkim, secara fenotipik aktif tetapi secara kariotipik normal. PLoS One, 2015. 10(2): hlm. e0117405.
- Karatas, O.F., Potensi antiproliferatif miR-33a pada sel kanker laring Hep-2 melalui penargetan PIM1. Head Neck, 2018. 40(11): hlm. 2455-2461.
- Wang, Y., dkk., Sintesis nanopartikel oksida seng dari Marsdenia tenacissima menghambat proliferasi sel dan menginduksi apoptosis pada sel kanker laring (Hep-2). Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology, 2019. 201: hlm. 111624.
- Zhang, J., dkk., Studi sistemik dan molekuler tentang lokalisasi subseluler protein SARS-CoV-2. Signal Transduct Target Ther, 2020. 5(1): hlm. 269.
- Wang, Q., dkk., Protein pengikat RNA RBM6 sebagai gen penekan tumor menekan pertumbuhan dan perkembangan karsinoma laring. Gene, 2019. 697: hlm. 26-34.
