Larutan Pemisah Sel Accutase - 100 ml
Larutan Pemisah Sel Accutase dengan EDTA dan Fenol Merah – 100 ml
Accutase adalah larutan pelepasan sel siap pakai yang telah disaring secara steril, dirancang sebagai alternatif yang lembut untuk trypsin/EDTA dalam memisahkan sel mamalia yang melekat dari peralatan kultur jaringan plastik standar dan permukaan yang dilapisi adhesi. Larutan ini menggabungkan aktivitas enzim proteolitik dan kolagenolitik dalam larutan garam seimbang untuk memberikan pemisahan yang efektif namun terkendali, menjaga protein permukaan sel, serta mendukung viabilitas tinggi setelah pemindahan dan re-adhesi yang cepat.
Formulasi Accutase didasarkan pada larutan garam fosfat Dulbecco (DPBS) dengan EDTA dan fenol merah sebagai indikator pH visual. Enzim-enzim ini berasal dari sumber non-mamalia dan non-bakteri, sehingga Accutase sangat cocok untuk penelitian sel punca, alur kerja vaksin, dan aplikasi apa pun di mana kontaminan yang berasal dari hewan atau mikroba harus diminimalkan. Larutan ini mengalami auto-inhibisi pada 37 °C, sehingga tidak diperlukan reagen penetralisir atau media yang mengandung serum setelah pelepasan – sel dapat dipindahkan langsung ke media segar.
Fitur Utama
- Cairan 1x yang sudah disaring steril dan siap pakai – tidak perlu pengenceran atau rekonstitusi
- Aktivitas enzim proteolitik dan kolagenolitik yang digabungkan untuk disosiasi yang lembut
- Setiap batch distandarisasi ke aktivitas pemisahan yang ditentukan untuk konsistensi antar-lot
- Asal enzim non-mamalia dan non-bakteri
- Menghambat sendiri pada 37 °C – tidak memerlukan larutan penetralisir
- Diformulasikan dalam PBS Dulbecco dengan EDTA
- Phenol red disertakan sebagai indikator pH visual
- pH 6,8 – 7,8
Aplikasi Umum
Accutase dengan lembut memisahkan berbagai jenis sel yang melekat dan sensitif, termasuk sel induk embrionik manusia (hESCs), sel induk pluripotent yang diinduksi manusia (iPSCs), sel induk saraf, neuron primer, dan garis sel yang melekat yang dibudidayakan secara rutin seperti HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21, dan A549. Contoh penggunaan meliputi:
- Subkultur rutin dan pemindahan sel mamalia yang melekat
- Disosiasi sel tunggal yang lembut pada hESCs, iPSCs, dan garis sel sensitif lainnya
- Persiapan sampel untuk analisis sitometri aliran dan FACS
- Analisis penanda permukaan sel di mana integritas epitop sangat penting
- Uji migrasi sel, proliferasi, dan apoptosis
- Uji ketenangan sel melalui studi kelaparan serum dan transfeksi onkogen
- Uji migrasi sel tumor dan sel krest saraf
- Peningkatan skala produksi dalam alur kerja bioreaktor
Untuk pekerjaan rutin, gunakan sekitar 10 ml Accutase per 75 cm2 permukaan kultur dan inkubasi selama 5–10 menit pada suhu kamar. Waktu inkubasi yang optimal harus ditentukan untuk setiap lini sel dan tidak boleh melebihi satu jam. Sebelum penambahan, bilas lapisan sel dengan larutan garam bebas Ca2+/Mg2+ seperti DPBS tanpa kalsium dan magnesium untuk menghilangkan sisa serum dan kation divalen.
Penanganan & Penyimpanan
Simpan botol yang belum dibuka dalam keadaan beku pada suhu -15 °C atau lebih rendah. Lelehkan pada suhu ruang atau semalaman pada suhu +2 °C hingga +8 °C. Jangan melelehkan Accutase dalam bak air bersuhu 37 °C, karena suhu tinggi dapat mengurangi aktivitas enzim. Setelah dilelehkan, larutan dapat disimpan hingga 2 bulan pada suhu +2 °C hingga +8 °C; jangan disimpan pada suhu ruang. Jangan memanaskan reagen terlebih dahulu hingga 37 °C sebelum digunakan – tambahkan langsung ke sel yang telah dicuci pada suhu kamar. Untuk masa simpan yang lama, disarankan untuk membagi reagen menjadi beberapa bagian sekali pakai untuk menghindari siklus pencairan berulang. Selalu lakukan pekerjaan dalam kondisi aseptik.
Kualitas
Diproduksi di bawah standar kualitas yang ketat. Setiap batch Accutase disaring secara steril dan diuji sterilitas, pH, penampilan, dan aktivitas disosiasi untuk memastikan kinerja yang konsisten dan dapat direproduksi dari lot ke lot.
Spesifikasi Produk
| Spesifikasi | Detail |
|---|---|
| Jenis produk | Reagen pelepasan sel / disosiasi |
| Format | Cairan yang telah disaring secara steril, siap pakai |
| Volume | 100 ml |
| Konsentrasi kerja | 1x (siap pakai) |
| Aktivitas enzim | Kombinasi proteolitik dan kolagenolitik |
| Asal enzim | Non-mamalia dan non-bakteri |
| Sistem buffer | PBS Dulbecco dengan EDTA |
| Indikator pH | Merah fenol |
| Rentang pH | 6,8 – 7,8 |
| Penampilan | Larutan bening, berwarna merah pucat hingga oranye |
| Suhu penyimpanan | -15 °C atau lebih rendah |
| Stabilitas setelah dicairkan | Hingga 2 bulan pada suhu +2 °C hingga +8 °C |
| Volume penggunaan yang disarankan | ~10 ml per 75 cm² permukaan kultur |
| Waktu inkubasi tipikal | 5 – 10 menit pada suhu kamar |
| Kondisi pengiriman | Dibekukan dengan es kering |
| Tujuan penggunaan | Hanya untuk penggunaan penelitian dan produksi lebih lanjut |
Formulasi (Komposisi per Liter)
| Komponen | Konsentrasi (mg/L) |
|---|---|
| Garam Anorganik | |
| Natrium klorida (NaCl) | 8000,00 |
| Disodium hidrogen fosfat (Na₂HPO₄) | 1150,00 |
| Klorida kalium (KCl) | 200,0 |
| Kalium dihidrogen fosfat (KH₂PO₄) | 200,00 |
| Komponen Lain | |
| EDTA · 4Na (EDTA tetrasodium) | 220,00 |
| Fenol merah | 3,00 |
| Campuran enzim eksklusif (aktivitas proteolitik dan kolagenolitik) | 1x |
Accutase adalah merek dagang terdaftar milik Innovative Cell Technologies, Inc.