RPMI 1640, w : 2.1 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3
Le milieu RPMI 1640, également connu sous le nom de milieu RPMI, est un milieu de culture cellulaire très polyvalent, largement utilisé dans la recherche biologique pour cultiver diverses cellules de mammifères. Développé par George E. Moore, Robert E. Gerner et H. Addison Franklin en 1966 au célèbre Roswell Park Comprehensive Cancer Center, ce milieu tire son nom de son origine au Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Initialement conçu pour favoriser la croissance de cellules leucémiques humaines en suspension et en monocouche, le milieu RPMI 1640 a évolué au fil des modifications apportées par les chercheurs et les fournisseurs commerciaux pour convenir à une gamme variée de cellules de mammifères. Il est exceptionnellement compatible avec des lignées cellulaires telles que HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrocytes et carcinomes.
Le milieu RPMI 1640 se distingue des autres milieux de culture cellulaire par sa composition unique. Il contient une quantité substantielle de phosphate, d'acides aminés et de vitamines. Il contient notamment de la biotine, de la vitamine B12 et du PABA, absents du milieu minimal essentiel d'Eagle ou du milieu modifié d'Eagle de Dulbecco. En outre, le milieu RPMI 1640 présente des concentrations significativement élevées de vitamines inositol et choline. Cependant, il ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance. Par conséquent, une supplémentation avec 10% de sérum bovin fœtal (FBS) est généralement nécessaire pour fournir des conditions optimales pour la croissance des cellules.
Le système tampon du milieu RPMI 1640 repose sur le bicarbonate de sodium (2,0 g/L) et nécessite un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir un pH physiologiquement approprié. L'inclusion d'un agent réducteur, le glutathion, distingue encore davantage ce milieu des autres.
La composition unique de cette formule RPMI comprend 2,1 mM de glutamine stable, 2,0 grammes par litre de NaHCO3 et du rouge de phénol.
Contrôle de qualité
- pH = 7,2 +/- 0,02 à 20-25°C.
- Chaque lot a été testé pour la stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries.
Entretien
- Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement jusqu'à +37°C réduisent la qualité du produit.
- Ne pas chauffer le milieu à plus de 37° C ou utiliser des sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes).
- Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, retirez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante.
- La durée de conservation de tout milieu, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication.
Composition
Composants | mg/L | |
Sels inorganiques | Nitrate de calcium x 4H2O | 100,00 |
Sulfate de magnésium anhydre | 48,83 | |
Chlorure de potassium | 400,00 | |
Chlorure de sodium | 5,950.00 | |
hydrogénophosphate de sodium | 800,49 | |
Autres composants | D(+)-Glucose anhydre | 2,000.00 |
Glutathion (rouge) | 1,00 | |
Rouge de phénol | 5,00 | |
NaHCO3 | 2,000.00 | |
Acides aminés | L-Arginine x HCl | 241,86 |
L-Asparagine x H2O | 56,82 | |
Acide L-aspartique | 20,00 | |
L-Cystine x 2HCl | 65,19 | |
L-Alanyl-L-Glutamine | 447,00 | |
Acide L-Glutamique | 20,00 | |
Glycine | 10,00 | |
L-Histidine x HCl x H2O | 20,27 | |
L-Hydroxyproline | 20,00 | |
L-Isoleucine | 50,00 | |
L-Leucine | 50,00 | |
L-Lysine x HCl | 40,00 | |
L-Méthionine | 15,00 | |
L-Phénylalanine | 15,00 | |
L-Proline | 20,00 | |
L-Sérine | 30,00 | |
L-Thréonine | 20,00 | |
L-Tryptophane | 5,00 | |
L-Tyrosine x 2Na | 28,83 | |
L-Valine | 20,00 | |
Vitamines | acide p-aminobenzoïque | 1,00 |
D-(+)-Biotine | 0,20 | |
D-Pantothénate de calcium | 0,25 | |
Chlorure de choline | 3,00 | |
Acide folique | 1,00 | |
myo-Inositol | 35,00 | |
Nicotinamide | 1,00 | |
Pyridoxine x HCl | 1,00 | |
Riboflavine | 0,20 | |
Thiamine x HCl | 1,00 | |
Vitamine B12 | 0.005 |