DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Pyruvate de sodium, w : 1.2 g/L NaHCO3
Le DMEM:Ham's F12 est un milieu de base largement reconnu et très utilisé en culture cellulaire pour la recherche biologique. Il constitue une source fondamentale de nutriments pour la croissance de diverses lignées cellulaires mammifères, en particulier lorsqu'il est complété par du sérum fœtal bovin (FBS).
Cette formulation unique combine le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) et le Ham's F-12 (mélange nutritif F-12 de Ham) dans un rapport précis de 1:1. L'ajout de L-glutamine améliore encore sa composition.
Le DMEM, dérivé du milieu minimal essentiel d'Eagle (EMEM), offre une concentration accrue en acides aminés et en vitamines par rapport à son prédécesseur. En revanche, le Ham's F-12 est basé sur le milieu Ham's F-10, fournissant un ensemble complémentaire de composants essentiels.
Pour favoriser une croissance cellulaire optimale, il est courant de compléter le DMEM:Ham's F12 avec du sérum fœtal bovin (FBS) à une concentration typique de 5 à 10 %. Cet ajout est nécessaire car le milieu manque d'hormones de croissance, de lipides et de protéines essentiels au développement cellulaire.
Le DMEM:Ham's F12 intègre un système tampon de pH et est souvent complété par du rouge de phénol, un indicateur de pH. Les cellules cultivées dans le DMEM:Ham's F12, ou dans tout milieu utilisant le système tampon bicarbonate, nécessitent un environnement à teneur en CO₂ contrôlée de 5 à 10 % pour maintenir des niveaux de pH appropriés.
Contrôle qualité
- Filtré stérile
Conservation et durée de conservation
- Conserver entre +2 °C et +8 °C, à l'abri de la lumière.
- Une fois ouvert, conserver à 4 °C et utiliser dans les 6 à 8 semaines.
Conditions d'expédition
- Température ambiante
Conservation
- Conserver au réfrigérateur entre +2 °C et +8 °C, à l'abri de la lumière. Éviter le gel et les réchauffements fréquents à +37 °C, car cela réduit la qualité du produit.
- Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37 °C ni utiliser de sources de chaleur non contrôlées telles que les fours à micro-ondes.
- Si seule une partie du milieu doit être utilisée, prélever la quantité nécessaire et la réchauffer à température ambiante avant utilisation.
Composition
| Catégorie | Composants | Concentration (mg/L) |
| Acides aminés | Glycine | 18,75 |
| L-alanine | 4,45 | |
| L-Arginine HCl | 147,50 | |
| L-asparagine H₂O | 7,50 | |
| Acide L-aspartique | 6,65 | |
| L-cystéine HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cystine 2 HCl | 31,29 | |
| Acide L-glutamique | 7,35 | |
| L-glutamine | 365,00 | |
| L-histidine HCl H₂O | 31,48 | |
| L-isoleucine | 54,47 | |
| L-Leucine | 59,05 | |
| L-Lysine HCl | 91,25 | |
| L-méthionine | 17,24 | |
| L-phénylalanine | 35,48 | |
| L-proline | 17,25 | |
| L-sérine | 26,25 | |
| L-thréonine | 53,45 | |
| L-tryptophane | 9,02 | |
| L-Tyrosine 2 Na 2 H₂O | 55,79 | |
| L-Valine | 52,85 | |
| Vitamines | D-biotine | 0,0035 |
| Chlorure de choline | 8,98 | |
| D-pantothénate de calcium | 2,24 | |
| Acide folique | 2,66 | |
| Myo-inositol | 12,60 | |
| Nicotinamide | 2,02 | |
| Pyridoxine HCl | 0,031 | |
| Pyridoxal HCl | 2,00 | |
| Riboflavine | 0,219 | |
| Chlorhydrate de thiamine | 2,17 | |
| Vitamine B12 | 0,68 | |
| Sels inorganiques | CaCl₂·2H₂O | 154,50 |
| CuSO4 5 H2O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9H₂O | 0,05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61,20 | |
| MgSO4 7 H2O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO3 | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄·2H₂O | 70,87 | |
| ZnSO4 7 H2O | 0,432 | |
| Autres composants | D-glucose | 3151,00 |
| Hypoxanthine | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Acide linoléique | 0,042 | |
| Acide lipoïque | 0,105 | |
| Sel de sodium du rouge de phénol | 8,63 | |
| Putrescine 2 HCl | 0,081 | |
| Pyruvate de sodium | 55,00 | |
| Thymidine | 0,365 |