EMEM (MEM Eagle), w : 2 mM L-Glutamine, w : 2,2 g/L NaHCO3, w : EBSS
Le milieu minimal essentiel d'Eagle (EMEM) est l'un des milieux de base les plus couramment utilisés pour la culture d'un large éventail de cellules mammifères, en particulier les lignées cellulaires adhérentes. Développée à l'origine par Harry Eagle, cette formulation classique contient les acides aminés essentiels, les vitamines et les sels inorganiques nécessaires à la croissance des cellules primaires et des lignées cellulaires établies dans des conditions de culture standard.
Cette formulation liquide prête à l'emploi et filtrée de manière stérile est enrichie en solution saline équilibrée d'Earle (EBSS), en L-glutamine 2 mM, en D-glucose (1,0 g/L) et en bicarbonate de sodium (NaHCO₃) à 2,2 g/L, ce qui la rend adaptée à une utilisation dans une atmosphère d'incubateur à CO₂ contrôlé (généralement 5 % de CO₂). Le rouge de phénol inclus sert d’indicateur de pH, permettant un contrôle visuel pratique de l’état du milieu pendant la culture cellulaire.
Caractéristiques principales
- Formulation MEM classique d’Eagle avec la solution saline équilibrée d’Earle (EBSS)
- 2 mM de L-glutamine inclus – prêt à l'emploi
- 2,2 g/L de bicarbonate de sodium – tamponné pour une incubation à 5 % de CO₂
- Avec du D-glucose (1,0 g/L) comme source principale de carbone
- Avec du rouge de phénol comme indicateur de pH
- Sans HEPES et sans pyruvate de sodium
- Milieu liquide filtré stérile, prêt à l'emploi
- pH 7,0 – 7,6
Applications typiques
L'EMEM permet la culture d'une grande variété de lignées cellulaires mammifères, notamment HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 et de nombreuses cellules primaires. Les applications courantes comprennent :
- L'entretien et la multiplication de routine de lignées cellulaires adhérentes
- Les processus de propagation virale et de production de vaccins
- Applications de cytotoxicité et de bioessais
- Études de transfection et d'expression protéique
- La recherche fondamentale en biologie cellulaire et en biologie moléculaire
Pour une croissance cellulaire optimale, l'EMEM est généralement complété par 5 à 10 % de sérum fœtal bovin (FBS) et, selon la lignée cellulaire, par des acides aminés non essentiels (NEAA) et des antibiotiques tels que la pénicilline/streptomycine.
Manipulation et conservation
Conserver le flacon non ouvert entre +2 °C et +8 °C, à l'abri de la lumière. Après ouverture, utiliser dans des conditions aseptiques. La L-glutamine en solution est sujette à une dégradation progressive ; nous recommandons d'utiliser le milieu dans les 4 semaines suivant l'ouverture pour obtenir les meilleures performances, ou de le compléter avec de la L-glutamine fraîche avant utilisation en cas de stockage prolongé. Laisser le milieu se réchauffer à 37 °C avant de l'ajouter aux cellules.
Qualité
Fabriqué selon des normes de qualité strictes. Chaque lot est testé pour vérifier sa stérilité, son pH, son osmolalité et ses niveaux d'endotoxines afin de garantir des performances constantes dans les applications de culture cellulaire.
Spécifications du produit
| Spécifications | Détails |
|---|---|
| Type de produit | MEM |
| Catégorie de produit | Milieux de culture cellulaire |
| Format | Liquide |
| Stérile | Oui |
| Contenance | 500 ml |
| L-glutamine | Avec L-glutamine (2 mM) |
| Glucose | Avec du glucose (1,0 g/L) |
| Bicarbonate de sodium | Avec NaHCO3 (2,2 g/L) |
| HEPES | Sans HEPES |
| Pyruvate de sodium | Sans pyruvate de sodium |
| Rouge de phénol | Avec rouge de phénol |
| Solution saline | Solution saline équilibrée d'Earle (EBSS) |
| pH | 7,0 – 7,6 |
| Teneur en endotoxines | Non spécifiée |
| Conservation | +2 °C à +8 °C |
Formulation (composition par litre)
| Composant | Concentration (mg/L) |
|---|---|
| Sels inorganiques | |
| Chlorure de calcium · 2H₂O | 265,00 |
| Sulfate de magnésium | 97,72 |
| Chlorure de potassium | 400,00 |
| Chlorure de sodium | 6 800,00 |
| Dihydrogénophosphate de sodium, anhydre | 122,00 |
| Bicarbonate de sodium (NaHCO3) | 2 200,00 |
| Acides aminés | |
| L-Arginine · HCl | 126,00 |
| L-cystine · 2HCl | 31,30 |
| L-Glutamine | 292,00 |
| L-histidine · HCl · H₂O | 42,00 |
| L-isoleucine | 52,00 |
| L-Leucine | 52,00 |
| L-Lysine · HCl | 72,50 |
| L-méthionine | 15,00 |
| L-phénylalanine | 32,00 |
| L-thréonine | 48,00 |
| L-tryptophane | 10,00 |
| L-Tyrosine · 2Na · 2H2O | 51,90 |
| L-Valine | 46,00 |
| Vitamines | |
| D-pantothénate de calcium | 1,00 |
| Chlorure de choline | 1,00 |
| Acide folique | 1,00 |
| Myo-inositol | 2,00 |
| Nicotinamide | 1,00 |
| Pyridoxal · HCl | 1,00 |
| Riboflavine | 0,10 |
| Thiamine · HCl | 1,00 |
| Autres composants | |
| D(+)-Glucose | 1 000,00 |
| Rouge de phénol | 10,00 |