DMEM, w : 4,5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 1,5 g/L NaHCO3, w : 1,0 mM Pyruvate de sodium
Le DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) est un milieu de base très polyvalent et largement utilisé, conçu pour favoriser la croissance d'une gamme variée de cellules de mammifères dans la recherche biologique. C'est un milieu idéal pour la culture de fibroblastes primaires, de neurones, de cellules gliales, de HUVEC, de cellules musculaires lisses, ainsi que de lignées cellulaires populaires telles que HeLa, 293, Cos-7 et PC-12.
Le DMEM se distingue des autres milieux par sa composition unique. Il contient une concentration impressionnante d'acides aminés et de vitamines, multipliée par quatre par rapport au milieu minimal essentiel d'Eagle. Initialement développé avec un faible taux de glucose (1 g/L) et du pyruvate de sodium, le DMEM est fréquemment utilisé avec des taux de glucose plus élevés, avec ou sans pyruvate de sodium. Notamment, le DMEM ne contient pas de protéines, de lipides ou de facteurs de croissance, ce qui nécessite une supplémentation. Pour obtenir une croissance optimale, une approche courante consiste à compléter le DMEM avec 10 % de sérum bovin fœtal (FBS). En outre, le DMEM utilise un système tampon de bicarbonate de sodium (3,7 g/L), nécessitant un environnement de 5 à 10 % de CO2 pour maintenir un pH physiologique.
Le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) est très apprécié parmi les milieux définis pour la culture de cellules et de tissus, car il répond aux besoins de croissance de divers phénotypes de cellules adhérentes. Il surpasse le milieu Eagle original, mis au point dans les années 1950 pour la culture de cellules de poulet, grâce à une formulation supplémentaire améliorée connue sous le nom de modification de Dulbecco. Cette modification multiplie par quatre la teneur en certains acides aminés et en vitamines par rapport au milieu d'origine.
Dans le domaine de la culture cellulaire, le DMEM joue un rôle essentiel en tant que milieu de croissance pour différents types de cellules, notamment les cellules primaires, les cellules souches et les cellules transformées. Les chercheurs utilisent également la version modifiée du DMEM pour un large éventail d'applications de recherche, telles que la découverte de médicaments, l'ingénierie tissulaire et l'étude des voies de signalisation cellulaire.
Contrôle de qualité
- pH = 7,2 +/- 0,02 à 20-25°C.
- Chaque lot a été testé pour la stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries.
Entretien
- Conserver au réfrigérateur entre +2°C et +8°C à l'abri de la lumière. La congélation et le réchauffement jusqu'à +37°C réduisent la qualité du produit.
- Ne pas chauffer le milieu à plus de 37° C ou utiliser des sources de chaleur incontrôlables (par exemple, des appareils à micro-ondes).
- Si une partie seulement du milieu doit être utilisée, retirez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante.
- La durée de conservation de tout milieu, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication.
Composition
Composants | mg/L | |
Sels inorganiques | Chlorure de calcium anhydre | 200,00 |
Nitrate de fer (III) x 9H2O | 0,10 | |
Sulfate de magnésium anhydre | 97,66 | |
Chlorure de potassium | 400,00 | |
Chlorure de sodium | 6.400,00 | |
Dihydrogénophosphate de sodium anhydre |
108,69 | |
Autres composants | D(+)-Glucose anhydre | 4.500,00 |
Pyruvate de sodium | 110,00 | |
Rouge de phénol | 15,00 | |
NaHCO3 | 1.500,00 | |
Acides aminés | L-Arginine x HCl | 84,00 |
L-Cystine x 2HCl | 62,58 | |
L-Glutamine | 584,00 | |
Glycine | 30,00 | |
L-Histidine x HCl xH2O | 42,00 | |
L-Isoleucine | 104,80 | |
L-Leucine | 104,80 | |
L-Lysine x HCl | 146,20 | |
L-Méthionine | 30,00 | |
L-Phénylalanine | 66,00 | |
L-Sérine | 42,00 | |
L-Thréonine | 95,20 | |
L-Tryptophane | 16,00 | |
L-Tyrosine x Na | 103,79 | |
L-Valine | 93,60 | |
Vitamines | D-Pantothénate de calcium | 4,00 |
Chlorure de choline | 4,00 | |
Acide folique | 4,00 | |
myo-Inositol | 7,00 | |
Nicotinamide | 4,00 | |
Pyridoxine x HCl | 4,00 | |
Riboflavine | 0,40 | |
Thiamine x HCl | 4,00 |