Cellules HL-60 : Essentiels de la recherche sur la leucémie myéloïde aiguë

HL-60 est une lignée de cellules leucémiques humaines immortelles. Elle est largement utilisée pour étudier la biologie du cancer et explorer l'efficacité des médicaments anticancéreux. En outre, elle peut également être utilisée pour comprendre les différents mécanismes cellulaires et moléculaires impliqués dans la prolifération et la différenciation des cellules leucémiques.

Lignée cellulaire HL-60 : Origine et informations générales

La lignée cellulaire HL-60 est un modèle crucial pour la recherche hématologique, car elle permet de mieux comprendre la nature et le traitement de la leucémie promyélocytaire aiguë. Cet article de blog se penche sur les origines et les caractéristiques de la lignée cellulaire HL-60, mettant en lumière son rôle crucial dans la recherche médicale et les développements thérapeutiques.

La lignée HL-60 a été créée à partir des cellules leucémiques d'une femme caucasienne de 36 ans atteinte d'une leucémie promyélocytaire aiguë. Ce travail de pionnier a été mené par S.J. Collins et son équipe, marquant une avancée significative puisque HL-60 a été la première lignée cellulaire de leucémie myéloïde à être isolée et cultivée avec succès en suspension. Cette réussite a ouvert de nombreuses perspectives de recherche dans l'étude de la leucémie et d'autres maladies apparentées. En termes de caractéristiques physiques, les cellules HL-60 présentent une morphologie lymphoblastique et sont connues pour se développer en suspension, avec une forme arrondie. La taille de ces cellules varie, avec des diamètres allant de 9 à 25 μm, reflétant leur hétérogénéité. Au niveau génomique, la lignée cellulaire HL-60 est majoritairement pseudodiploïde, avec un nombre modal de chromosomes de 43. Il est intéressant de noter qu'un faible pourcentage (6,2 %) des cellules présente une composante 2S, ce qui ajoute une nouvelle couche de complexité à leur composition génétique [1].

La compréhension de ces aspects fondamentaux des cellules HL-60 permet non seulement d'améliorer notre connaissance de la leucémie au niveau cellulaire, mais aussi de soutenir les efforts de recherche en cours pour découvrir de nouvelles modalités de traitement. Dans les sections suivantes, nous examinerons comment les propriétés uniques de la lignée cellulaire HL-60 ont contribué à des avancées significatives dans la recherche médicale.

Tissu de leucémie monocellulaire au microscope.

Informations sur la culture des cellules HL-60

La culture des cellules HL-60 est simple et facile. Cette section vous permettra de vous familiariser avec les principes de base tels que Quel est le temps de doublement de la lignée cellulaire HL-60 ? La culture des cellules HL-60 est-elle adhérente ou en suspension ? Quelle est la densité d'ensemencement de la lignée cellulaire HL-60 ? Quel milieu est utilisé pour la croissance des cellules HL-60 ?

Temps de doublement :

Le temps de doublement des cellules HL-60 est d'environ 36 à 48 heures.

Adhérentes ou en suspension:

Les cellules HL-60 se développent sous forme de cultures en suspension.

Densité d'ensemencement :

Ces cellules sont ensemencées à une densité de 1 x106 cellules/ml lorsqu'elles sont repiquées et à une densité de 2 x105 cellules/ml lorsqu'une nouvelle culture est démarrée.

Milieu de croissance :

Le milieu de croissance RPMI 1640 additionné de 10 % de FBS et de 2,5 mM de L-glutamine est utilisé pour la culture des cellules HL-60. Le milieu doit être renouvelé 2 à 3 fois par semaine.

Conditions de croissance :

Les cellules HL-60 sont cultivées dans un incubateur humidifié à 37 °C et 5 % deCO2.

Stockage :

Les cellules HL-60 sont conservées à une température inférieure à -150 °C ou dans la phase vapeur de l'azote liquide afin de conserver un maximum de cellules viables.

Milieu de congélation et procédé :

Les milieux de congélation CM-1 ou CM-ACF sont utilisés pour la congélation des cellules HL-60. Une méthode de congélation lente est préférable pour la congélation des cellules HL-60.

Processus de décongélation :

Le flacon congelé de cellules HL-60 est agité rapidement dans un bain-marie réglé à 37 °C. Les cellules sont ensuite centrifugées. Les cellules sont ensuite centrifugées pour éliminer le milieu de congélation. Un nouveau milieu de culture est ajouté et les cellules sont remises en suspension pour être distribuées dans un flacon pour la croissance.

Niveau de biosécurité :

Le niveau de biosécurité 1 est recommandé pour la manipulation des cultures HL-60.

Cellules HL-60 en suspension à un grossissement de 10x et 20x.

Cellules HL-60 : Avantages et inconvénients

Avant de travailler avec une lignée cellulaire, il convient de connaître ses avantages et ses inconvénients. Cette section de l'article aborde quelques avantages et inconvénients de l'utilisation des cellules HL-60.

Avantages

Les principaux avantages de la lignée cellulaire HL-60 sont les suivants :

  • Polyvalence : les cellules HL-60 ont la capacité de se différencier en plusieurs types de cellules, y compris les monocytes, les macrophages et les granulocytes, dans des conditions de croissance appropriées. Elles sont donc utiles pour étudier la différenciation cellulaire et d'autres processus cellulaires
  • Facilité de culture : Les cellules HL-60 sont faciles à cultiver et à maintenir en suspension, ce qui en fait un outil pratique pour l'étude de multiples processus cellulaires
  • Modèle in vitro de leucémie : Ces cellules ont été obtenues à partir d'un patient atteint de leucémie myéloïde aiguë et présentent donc des caractéristiques génétiques et moléculaires similaires à celles de la maladie

Inconvénients

Les inconvénients de la lignée cellulaire HL-60 sont les suivants :

  • Potentiel de différenciation limité : les cellules HL-60 peuvent se différencier en certaines lignées myéloïdes en réponse à des stimuli, mais leur potentiel de différenciation est limité par rapport aux cellules primaires.

Applications de la lignée cellulaire HL-60 dans la recherche : Du cancer à l'immunologie et au-delà

La lignée cellulaire HL-60, dérivée d'un patient atteint de leucémie promyélocytaire aiguë, est devenue une pierre angulaire de la recherche médicale en raison de sa polyvalence et de sa facilité de culture. Ces cultures, qui nécessitent peu d'entretien, jouent un rôle essentiel dans une myriade d'applications de recherche, et nous avons l'intention d'explorer certaines des plus importantes d'entre elles, en incorporant un large éventail de mots-clés d'investigation afin de fournir une vue d'ensemble complète.

Recherche sur le cancer

Dans le domaine de l'oncologie, la lignée cellulaire HL-60 a permis d'élucider les complexités de la signalisation des cellules cancéreuses, de faire progresser notre compréhension de l'expression des oncogènes et de favoriser la découverte de nouvelles cibles thérapeutiques. Cette lignée cellulaire fait partie du panel de lignées cellulaires leucémiques utilisé pour le criblage de nouveaux agents chimiothérapeutiques. Un exemple poignant est l'utilisation de cellules HL-60 pour vérifier les propriétés antileucémiques de composés extraits d'organismes marins, révélant des effets à la fois antiprolifératifs et pro-apoptotiques [2]. En outre, la lignée cellulaire a facilité l'examen de voies de signalisation essentielles telles que JAK/STAT et leur influence sur la prolifération des cellules leucémiques, tout en évaluant les promesses thérapeutiques de composés bioactifs tels que la thymoquinone [3].

Immunologie

Les cellules HL-60 constituent un système in vitro robuste pour étudier diverses réponses immunitaires, y compris le processus complexe de chimiotaxie et la régulation de l'expression de médiateurs immunitaires clés. Ces cellules peuvent se différencier en cellules myéloïdes apparentées aux macrophages et aux neutrophiles, ce qui en fait un modèle polyvalent pour l'étude des voies inflammatoires. Par exemple, des cellules semblables à des macrophages dérivées de HL-60 ont été utilisées pour étudier le potentiel anti-inflammatoire de substances phytochimiques du genre Brassica [4]. Dans une autre étude, la différenciation des cellules HL-60 en cellules de type neutrophile a permis aux chercheurs d'identifier des gènes essentiels à la différenciation cellulaire et aux fonctions immunitaires connexes [5].

Découverte de médicaments

Les capacités de différenciation myéloïde des cellules HL-60 ont également été exploitées pour la découverte de médicaments, en particulier pour l'identification de candidats susceptibles de moduler la voie de différenciation, qui est cruciale dans le traitement de la leucémie. Ceci est illustré par des études qui ont utilisé la lignée cellulaire HL-60 pour évaluer le potentiel anticancéreux de produits naturels [6].

En outre, la lignée cellulaire HL-60 est utilisée pour étudier divers aspects de la biologie des lignées cellulaires myéloïdes, par exemple pour comprendre comment le traitement par des agents tels que l'acide rétinoïque peut conduire à la différenciation monocytaire, ou comment ces cellules imitent les neutrophiles primaires en générant des pièges extracellulaires. L'utilisation du modèle pour élucider les événements moléculaires des hémopathies malignes est encore élargie par son application dans les études de panels de cellules mutantes, en particulier dans le contexte de l'analyse des hotspots p53 de la leucémie.

Pour ceux qui explorent la mécanique cellulaire, le temps de doublement des HL-60 et leur réponse à l'électroporation dans les canaux microfluidiques, la lignée cellulaire offre une plate-forme d'investigation fiable.

Lignée cellulaire HL-60 pour votre recherche

Cellules HL-60 : Publications de recherche

Plusieurs études de recherche sont disponibles sur les cellules HL-60. Nous en présentons ici quelques exemples notables :

Effets apoptotiques et antiprolifératifs du Stigmast-5-en-3-ol de Dendronephthya gigantea sur la leucémie humaine HL-60 et le cancer du sein humain MCF-7

Cet article de recherche propose l'effet anti-tumoral d'un composé, le Stigmast-5-en-3-ol, sur les cellules leucémiques HL-60 et les cellules mammaires cancéreuses MCF7.

La thymoquinone supprime la prolifération cellulaire et augmente l'apoptose des cellules leucémiques HL60 par la réexpression des régulateurs négatifs JAK/STAT

Cette étude décrit le rôle de la signalisation JAK/STAT dans la prolifération des cellules HL-60. En outre, les chercheurs étudient le potentiel thérapeutique du composé Thymoquinone en utilisant cette lignée cellulaire leucémique. Le composé inhibe la prolifération cellulaire et induit la mort cellulaire en relançant l'expression des régulateurs négatifs de la cascade JAK/STAT.

Analyse du potentiel anti-inflammatoire des composés bioactifs de Brassica dans un modèle cellulaire humain de type macrophage dérivé de cellules HL-60

Cette étude a utilisé des cellules HL-60 pour dériver un modèle cellulaire de type macrophage afin d'étudier l'activité anti-inflammatoire des composés végétaux de Brassica.

ERK est impliqué dans la différenciation et la fonction des cellules HL-60 neutrophiles induites par le sulfoxyde de diméthyle, qui imitent les neutrophiles inflammatoires

Cette étude publiée dans le journal International Immunopharmacology a développé des cellules neutrophiles imitant la lignée cellulaire HL-60 en utilisant du sulfoxyde de diméthyle. L'étude a observé que le gène ERK est impliqué dans la différenciation de ces cellules.

Effets antitumoraux de polyphénols végétaux sélectionnés, l'acide gallique et l'acide ellagique, sur des cellules leucémiques HL60 sensibles et multirésistantes

Ce document de recherche étudie le potentiel anticancéreux des composés polyphénoliques végétaux, à savoir l'acide gallique et l'acide ellagique, sur des cellules leucémiques HL-60 sensibles et résistantes aux médicaments.

Ressources sur la lignée cellulaire HL-60 : Protocoles, vidéos et autres

De nombreuses ressources éducatives en ligne sont disponibles sur la lignée cellulaire HL-60. Cette section présente quelques ressources décrivant la culture et la transfection de cette lignée cellulaire.

Protocoles de culture cellulaire

Les ressources décrivant les méthodes de culture des cellules HL-60 sont les suivantes :

  • Propagation des cellules HL-60: Ce document fournit des informations sur la sous-culture des cellules HL-60.
  • Lignée cellulaire HL-60 : Ce site web contient les informations de base sur les cellules HL-60 et les protocoles, y compris la culture, la congélation et la décongélation des cellules.

Protocoles de transfection

Voici quelques ressources qui décrivent les méthodes de transfection utilisées pour les cellules HL-60.

Vidéos relatives à la lignée cellulaire HL-60

Il existe très peu de ressources vidéo sur les cellules HL-60.

Nous espérons que cet article vous fournira des informations de base sur la culture et le maintien de la lignée cellulaire HL-60. En outre, il peut améliorer vos connaissances sur les avantages de l'utilisation de ces cellules leucémiques dans la recherche. Si vous envisagez d'utiliser cette lignée cellulaire, commandez-la chez nous.

Lignée cellulaire HL-60 : FAQ essentielles pour les chercheurs

Références

  1. Fleck, R., S. Romero-Steiner, et M. Nahm, Use of HL-60 cell line to measure opsonic capacity of pneumococcal antibodies. Clinical and Vaccine Immunology, 2005. 12(1) : p. 19-27.
  2. Fernando, I.S., et al, Effets apoptotiques et antiprolifératifs du Stigmast-5-en-3-ol de Dendronephthya gigantea sur les cellules humaines de leucémie HL-60 et de cancer du sein MCF-7. Toxicologie in Vitro, 2018. 52: p. 297-305.
  3. Almajali, B., et al, Thymoquinone supprime la prolifération cellulaire et améliore l'apoptose des cellules leucémiques HL60 par la réexpression des régulateurs négatifs JAK/STAT. Asian Pacific Journal of Cancer Prevention : APJCP, 2021. 22(3) : p. 879.
  4. Ruiz-Alcaraz, A.J., et al, Analysis of the anti-inflammatory potential of Brassica bioactive compounds in a human macrophage-like cell model derived from HL-60 cells. Biomedicine & Pharmacotherapy, 2022. 149: p. 112804.
  5. Wang, D., et al, ERK est impliqué dans la différenciation et la fonction des cellules neutrophiles HL-60 induites par le sulfoxyde de diméthyle, qui imitent les neutrophiles inflammatoires. International Immunopharmacology, 2020. 84: p. 106510.
  6. Núñez-Sánchez, M.Á., et al, Anti-Leukemic Activity of Brassica-Derived Bioactive Compounds in HL-60 Myeloid Leukemia Cells. International Journal of Molecular Sciences, 2022. 23(21) : p. 13400.

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