Lignée cellulaire HT-29
HT-29 est une lignée cellulaire humaine issue d'un cancer colorectal qui trouve de nombreuses applications dans la recherche sur le cancer et la toxicologie. Ces cellules sont notamment sensibles aux traitements chimiothérapeutiques standard contre le cancer colorectal. De plus, la lignée cellulaire HT-29 constitue un modèle in vitro bien caractérisé pour étudier la réponse de l'épithélium intestinal à une infection bactérienne. Les cellules HT-29 imitent les caractéristiques des cellules intestinales matures, c'est-à-dire des entérocytes, et conviennent donc aux études d'adhérence et aux études mécanistiques.
- Milieu de culture
- Voir la page du produit
- Temps de doublement
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- Type de croissance
- Adhérent
- Niveau de biosécurité
- BSL-1
- Disponible auprès de
- Cytion — Commander HT-29
- Cellules HT-29 : origine et informations générales
- Informations sur la culture cellulaire de la lignée cellulaire HT-29
- Cellules HT-29 : avantages et limites
- Cellules HT-29 : applications
- 5. Publications de recherche sur les cellules HT-29
- Ressources sur les cellules HT-29 : protocoles, vidéos et plus encore
- Références
- Foire aux questions
Cellules HT-29 : origine et informations générales
Avant d'utiliser une lignée cellulaire, il est important de connaître ses caractéristiques générales et son origine. Cette section vous aidera à comprendre : Que sont les cellules HT-29 ? La lignée HT-29 est-elle une lignée cellulaire de cancer colorectal ? Quelle est la morphologie des cellules HT-29 ?
Qu'est-ce que la lignée cellulaire HT-29 ? HT-29 est une lignée cellulaire d'adénocarcinome colorectal établie en 1964 par Trempe et Fogh. Les cellules provenaient à l'origine de la tumeur primaire d'une femme de type caucasien (44 ans) atteinte d'un adénocarcinome colorectal [1]. Depuis sa création, cette lignée cellulaire a été utilisée pour étudier la biologie des cancers.
Morphologie des cellules HT-29 : la lignée cellulaire HT-29 présente généralement une morphologie de type épithélial. Les cellules différenciées se développent en monocouches, forment des jonctions intercellulaires serrées et possèdent une bordure en brosse apicale. Si ces cellules sont cultivées dans un milieu pauvre en glucose ou si on leur administre des inducteurs tels que le butyrate ou de l'acide, elles présentent des caractéristiques de type entérocytes.
Taille des cellules : le diamètre des cellules de la lignée cellulaire HT-29 du cancer colorectal est de 11 μm.
Génome et ploïdie : le nombre modal de chromosomes de la lignée cellulaire HT-29 est de 71. Il peut varier entre 68 et 72. De plus, le nombre de chromosomes simplifié pour les cellules HT-29 est hypertriploïde, la composante 2S se produisant à un taux de 2,4 %.
Qu'est-ce que HT29 MTX ? HT29 MTX est une lignée cellulaire résistante au méthotrexate isolée à partir de la lignée cellulaire originale HT-29 de cancer du côlon humain par adaptation à 10 µM de méthotrexate. Ces cellules présentent les caractéristiques de cellules caliciformes matures sécrétrices de mucus.
Informations sur la culture cellulaire de la lignée cellulaire HT-29
Connaître les conditions de culture de base d'une lignée cellulaire peut vous faciliter la tâche. Vous devez savoir : quel est le temps de doublement de la lignée cellulaire HT-29 ? Quelle est la densité d'ensemencement des cellules HT-29 ? Quel milieu utiliser pour les cellules HT-29 ?
Temps de doublement
Le temps de doublement moyen de la lignée cellulaire HT-29 est de 24 heures.
Adhérente/en suspension
HT-29 est une lignée cellulaire adhérente.
Densité d'ensemencement
La densité d'ensemencement recommandée pour les cellules HT-29 est de 3 x 10⁴ cellules/cm². Les cellules cultivées sont lavées avec du PBS 1X et détachées après incubation avec de l'Accutase pendant 8 à 10 minutes. On ajoute du milieu frais, puis on centrifuge les cellules. Le culot cellulaire est remis en suspension, et les cellules sont réparties dans de nouvelles flacons à la densité cellulaire recommandée.
Milieu de culture
Le milieu minimal essentiel d'Eagle (EMEM) complété par 2,5 mM de L-glutamine et 10 % de FBS est utilisé pour une culture optimale des cellules HT-29. Le milieu doit être renouvelé 2 à 3 fois par semaine.
Conditions de culture
Les cellules HT-29 nécessitent un incubateur humidifié à une température de 37 °C et un apport de 5 % de CO₂ pour leur croissance.
Conservation
Ces cellules sont conservées en phase vapeur d'azote liquide à une température inférieure à -195 °C.
Milieu et procédé de congélation
Le milieu de congélation utilisé pour la lignée cellulaire HT-29 est le CM-1 ou le CM-ACF. Les cellules sont congelées par un processus de congélation lente qui entraîne une baisse de température de 1 °C et préserve efficacement la viabilité des cellules.
Procédé de décongélation
Les cellules HT-29 congelées sont décongelées dans un bain-marie réglé à 37 °C. Ces cellules peuvent être remises en suspension et directement transférées dans un flacon contenant un milieu de culture frais. À l'inverse, les cellules décongelées peuvent être centrifugées pour éliminer les éléments du milieu de congélation, remises en suspension dans un milieu frais, puis cultivées dans des flacons.
Niveau de biosécurité
Le niveau de biosécurité 1 est utilisé pour la manipulation et la conservation de la lignée cellulaire HT-29.
Cellules HT-29 : avantages et limites
Chaque lignée cellulaire présente des avantages et des inconvénients qui la distinguent des autres lignées. Cette section traite des principaux avantages et limites associés aux cellules HT-29.
Avantages
Les principaux avantages des cellules HT-29 sont les suivants :
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Faciles à cultiver
La lignée cellulaire HT-29 est facile à manipuler et à entretenir, sans exigences complexes en matière de culture. Elle est largement cultivée dans les laboratoires de recherche.
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Modèle in vitro de cellules intestinales
Les cellules HT-29 peuvent se différencier en cellules intestinales matures (entérocytes et cellules productrices de mucus) dans des conditions de culture spécifiques. Elles sont utilisées comme modèle cellulaire pour étudier la digestion des aliments et la biodisponibilité.
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Efficacité de transfection élevée
Les cellules de cancer du côlon HT-29 offrent une efficacité de transfection élevée, ce qui les rend adaptées aux études d'expression et de régulation géniques. Des expériences de transfection transitoire et stable peuvent être réalisées à l'aide de diverses méthodes.
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Sensibilité aux médicaments
Les cellules HT-29 sont sensibles aux médicaments chimiothérapeutiques tels que le fluorouracile et l'oxaliplatine, couramment utilisés dans le traitement du cancer du côlon. Elles sont utilisées pour étudier la résistance aux médicaments et cribler des médicaments thérapeutiques potentiels pour le carcinome colorectal.
Limites
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Hétérogénéité
Les cellules HT-29, comme d'autres lignées cellulaires cancéreuses, présentent une hétérogénéité et peuvent ne pas former une population cellulaire uniforme. Cela peut avoir un impact sur la reproductibilité des résultats dans certains tests et entraîner des variations mineures dans les résultats expérimentaux.
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Différenciation limitée
Les cellules HT-29 ont un potentiel de différenciation limité. Elles ne se différencient pas complètement en cellules intestinales ou coliques, mais ne présentent que quelques caractéristiques typiques. Cette limitation peut restreindre leur utilisation dans l'étude de processus biologiques plus complexes.
Cellules HT-29 : applications
La lignée cellulaire HT-29 est largement cultivée dans les laboratoires de recherche en raison de son large éventail d'applications. Cette section ne traitera que de quelques applications significatives des cellules HT-29.
Recherche sur le cancer : HT-29 est une lignée cellulaire d'adénocarcinome colorectal ; elle est donc utilisée pour étudier la progression et le développement du cancer, ainsi que les mécanismes moléculaires sous-jacents. Une étude menée en 2018 a utilisé la lignée cellulaire HT-29 pour étudier les molécules cellulaires responsables des métastases. Cette étude a observé que les gènes de la vimentine et du CXCR4 régulent la métastase cellulaire. La transfection d'un mimétique du microARN-193a-5p peut réduire les niveaux d'ARNm de ces gènes et diminuer efficacement la métastase des cellules cancéreuses [2].
Recherche en toxicologie : la lignée cellulaire HT-29 est largement utilisée dans la recherche en toxicologie. Ces cellules de carcinome colorectal sont utilisées pour évaluer la toxicité de différents candidats-médicaments à l'aide de différents tests. Par exemple, une étude a exploré le potentiel toxique d'un extrait éthanolique de la plante Syzygium cumini sur la lignée cellulaire HT-29. Les résultats ont montré une suppression significative de la croissance des cellules HT-29, indiquant les propriétés anticancéreuses prometteuses de l'extrait [3].
Microbiologie : la lignée HT-29 peut être utilisée comme système de cellules hôtes pour étudier la pathogenèse de micro-organismes potentiels, à savoir des bactéries et des virus. Les chercheurs peuvent infecter des cellules HT-29 avec des micro-organismes afin d'étudier leur virulence et la réponse de l'hôte. Une telle étude a utilisé des cellules HT-29 pour explorer les propriétés probiotiques des bactéries lactiques [4]. Une autre étude a utilisé des cellules HT-29 pour évaluer l'efficacité et la sécurité des traitements par bactériophages [5].
5. Publications scientifiques sur les cellules HT-29
Cette section présente quelques publications notables sur les cellules HT-29 qui vous aideront à concevoir votre étude de recherche.
Cette étude a proposé l'extrait éthanolique de Syzygium cumini comme agent anticancéreux potentiel contre la lignée cellulaire colorectale HT-29. L'extrait a considérablement freiné la croissance des cellules cancéreuses.
Cette publication dans Bioscience Reports a évalué l'activité anticancéreuse d'un composé, la tétrandrine, sur les cellules HT-29. Les résultats ont révélé que la tétrandrine inhibe la prolifération et la croissance des cellules cancéreuses en régulant les voies de signalisation cellulaire.
Cette étude a suggéré que le miARN-193a-5p pourrait potentiellement réguler la métastase des cellules HT-29 en régulant les gènes liés à la métastase.
Cet article a été publié dans Nature Scientific Reports en 2018. Cette étude a utilisé la lignée cellulaire tumorigène HT-29 comme modèle cellulaire intestinal pour évaluer l'efficacité du traitement par bactériophages proposé.
Dans cette étude, les chercheurs ont utilisé des cellules HT-29 pour étudier les activités probiotiques des bactéries lactiques. Il est intéressant de noter que l'étude a montré que les lactobacilles empêchent l'adhérence des bactéries pathogènes aux cellules du côlon.
Ressources sur les cellules HT-29 : protocoles, vidéos et plus
Cette section présente certaines ressources en ligne disponibles sur les cellules HT-29 qui vous aideront à apprendre leurs protocoles de maintenance, de culture et de transfection.
Protocoles de culture cellulaire
Les ressources suivantes vous guideront dans la repiquage des cellules HT-29.
- Culture des cellules HT-29 : ce lien fournit des connaissances de base sur le milieu de croissance, la décongélation et la repiquage des cellules HT-29.
- Entretien des cultures de cellules HT-29 : cet article contient toutes les informations utiles sur la culture et l'entretien des cellules HT-29.
Protocoles de transfection
La lignée cellulaire HT-29 présente une excellente efficacité de transfection et est fréquemment utilisée dans les études d'expression génique. Les ressources suivantes décrivent les protocoles de transfection possibles pour ces cellules.
- Transfection des cellules HT-29 : ce lien vers un site web contient le protocole détaillé de transfection des cellules HT-29.
- Transfection de la lignée cellulaire HT-29 : ce document décrit le protocole de transfection de la lignée cellulaire HT-29 avec de l'ADN plasmidique.
Vidéos relatives à la lignée cellulaire HT-29
Voici quelques vidéos sur la culture et l'entretien de cette lignée cellulaire tumorigène.
- Passage des cellules : cette vidéo présente le protocole de passage des cellules pour les lignées cellulaires adhérentes.
- Transfection des cellules HT-29 : cette vidéo vous guidera sur la méthode de transfection utilisée pour les cellules HT-29.
Nous espérons que les informations contenues dans cet article vous seront utiles et suffisantes pour vous permettre de manipuler et d'entretenir la lignée cellulaire HT-29. Si vous prévoyez d'utiliser des cellules HT-29 dans votre étude, passez commande auprès de nous.
Références
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles et I. Recio, Lignée cellulaire HT29. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015 : p. 113-124.
- Shirafkan, N., et al., le microARN-193a-5p inhibe la migration des cellules cancéreuses du côlon humaines HT-29 via la suppression de la voie de métastase. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5) : p. 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean et R. Safaralizadeh, Évaluation de l'effet anticancéreux de l'extrait éthanolique de Syzygium cumini sur la lignée cellulaire colorectale HT-29. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52 : p. 575-581.
- Fonseca, H.C., et al., Propriétés probiotiques des lactobacilles et leur capacité à inhiber l'adhésion des bactéries entéropathogènes aux cellules Caco-2 et HT-29. Probiotics and antimicrobial proteins, 2021. 13 : p. 102-112.
- Shan, J., et al., Les bactériophages sont plus virulents envers les bactéries présentes dans les cellules humaines qu'en culture bactérienne ; observations à partir de cellules HT-29. Scientific reports, 2018. 8(1): p. 5091.
