Ligne cellulaire HT-29

HT-29 est une lignée cellulaire humaine de cancer colorectal qui présente un large éventail d'applications pour la recherche sur le cancer et la toxicologie. Par exemple, ces cellules sont sensibles aux traitements chimiothérapeutiques standard contre le cancer colorectal. En outre, la lignée cellulaire HT-29 est un modèle in vitro bien caractérisé pour étudier la réponse de l'épithélium intestinal à l'infection bactérienne. Les cellules HT-29 imitent les caractéristiques des cellules intestinales matures, c'est-à-dire les entérocytes, et conviennent donc aux études d'attachement et aux études mécanistiques.

Cet article couvre tous les aspects de la lignée cellulaire HT-29 que vous devez connaître avant de travailler avec elle. Il portera principalement sur les points suivants :

Les cellules HT-29 : Origine et informations générales
Informations sur la culture cellulaire de la lignée cellulaire HT-29
Cellules HT-29 : Avantages et limites
Cellules HT-29 : Applications
Publications de recherche sur les cellules HT-29
Ressources sur les cellules HT-29 : Protocoles, vidéos et autres

1. Cellules HT-29 : Origine et informations générales

Avant d'utiliser une lignée cellulaire, vous devez connaître ses caractéristiques générales et son origine. Cette section vous permettra d'en savoir plus : Que sont les cellules HT-29 ? La HT-29 est-elle une lignée cellulaire de cancer colorectal ? Quelle est la morphologie des cellules HT-29 ?

Qu'est-ce que la lignée cellulaire HT-29 ? HT-29 est une lignée cellulaire d'adénocarcinome colorectal créée en 1964 par Trempe et Fogh. Les cellules provenaient à l'origine de la tumeur primaire d'une femme caucasienne (44 ans) atteinte d'un adénocarcinome colorectal [1]. Depuis sa création, cette lignée cellulaire a été utilisée pour étudier la biologie des cancers.

Morphologie des cellules HT-29 : La lignée cellulaire HT-29 présente généralement une morphologie de type épithélial. Les cellules différenciées se développent en monocouche, forment des jonctions cellule-cellule serrées et possèdent une bordure en brosse apicale. Si ces cellules sont cultivées dans un milieu pauvre en glucose ou si elles reçoivent des inducteurs tels que le butyrate ou l'acide, elles présentent des caractéristiques de type entérocytaire.

Taille des cellules : Le diamètre de la lignée cellulaire de cancer colorectal HT-29 est de 11 μm.

Génome et ploïdie : Le nombre modal de chromosomes pour la lignée cellulaire HT-29 est de 71. Il peut varier de 68 à 72. En outre, le nombre de chromosomes rationalisés pour les cellules HT-29 est hyper-triploïde, la composante 2S se produisant au taux de 2,4 %.

Qu'est-ce que le HT29 MTX ? HT29 MTX est une lignée cellulaire résistante au méthotrexate, isolée à partir de la lignée cellulaire originale HT-29 de cancer du côlon humain par adaptation à 10 µM de méthotrexate. Ces cellules présentent les caractéristiques de cellules de gobelet matures sécrétant du mucus.

Division et mouvement des cellules cancéreuses colorectales au microscope.

2. Informations sur la culture cellulaire de la lignée cellulaire HT-29

Connaître les exigences de base de la culture d'une lignée cellulaire peut faciliter votre travail avec elle. Vous devez savoir : quel est le temps de doublement de la lignée cellulaire HT-29 ? Quelle est la densité d'ensemencement des cellules HT-29 ? Quel milieu de culture pour les cellules HT-29 ?

Temps de doublement	Le temps de doublement moyen de la lignée cellulaire HT-29 est de 24 heures.
Adhérence/suspension	HT-29 est une lignée cellulaire adhérente.
Densité d'ensemencement	La densité d'ensemencement recommandée pour les cellules HT-29 est de 3 x¹⁰⁴ ^cellules/cm2. Les cellules cultivées sont lavées avec du PBS 1 X et détachées après incubation avec de l'Accutase pendant 8-10 minutes. Du milieu frais est ajouté et les cellules sont centrifugées. Le culot cellulaire est remis en suspension et les cellules sont réparties dans de nouveaux flacons à la densité cellulaire recommandée.
Milieu de croissance	Le milieu minimum essentiel d'Eagle (EMEM) complété par 2,5 mM de L-glutamine et 10 % de FBS est utilisé pour une culture optimale des cellules HT-29. Le milieu doit être remplacé 2 à 3 fois par semaine.
Conditions de croissance	Les cellules HT-29 nécessitent un incubateur humifié à une température de 37°C et un apport de 5 % de_CO2 pour leur croissance.
Stockage	Ces cellules sont conservées dans la phase vapeur de l'azote liquide à une température inférieure à -195°C.
Milieu de congélation et procédé	Le milieu de congélation utilisé pour la lignée cellulaire HT-29 est le CM-1 ou le CM-ACF. Les cellules sont congelées par un processus de congélation lent qui provoque une baisse de température de 1 °C et protège efficacement la viabilité des cellules.
Processus de décongélation	Les cellules HT-29 congelées sont décongelées dans un bain-marie réglé à 37°C. Ces cellules peuvent être remises en suspension et directement distribuées dans le flacon de milieu de croissance frais. Au contraire, les cellules décongelées peuvent être centrifugées pour éliminer les éléments du milieu de congélation, remises en suspension dans du milieu frais et cultivées dans des flacons.
Niveau de biosécurité	Le niveau de biosécurité 1 est utilisé pour manipuler et maintenir la lignée cellulaire HT-29.

Cellules HT-29 sous un grossissement de 10x et 20x.

3. Cellules HT-29 : Avantages et limites

Chaque lignée cellulaire présente des avantages et des inconvénients qui la distinguent des autres lignées cellulaires. Cette section présente les principaux avantages et limites des cellules HT-29.

Avantages des cellules HT-29

Les principaux avantages des cellules HT-29 sont les suivants

Facilité de culture
La lignée cellulaire HT-29 est facile à manipuler et à entretenir, sans exigences complexes en matière de culture. Elle est largement cultivée dans les laboratoires de recherche.
Modèle in vitro de cellules intestinales
Les cellules HT-29 peuvent se différencier en cellules intestinales matures (entérocytes et cellules productrices de mucus) dans des conditions de culture spécifiques. Elles sont utilisées comme modèle cellulaire pour étudier la digestion et la biodisponibilité des aliments.
Efficacité de transfection élevée
Les cellules cancéreuses du côlon HT-29 offrent une grande efficacité de transfection, ce qui les rend adaptées aux études sur l'expression et la régulation des gènes. Des expériences de transfection transitoire et stable peuvent être réalisées à l'aide de différentes méthodes.
Sensibilité aux médicaments
Les cellules HT-29 sont sensibles aux médicaments chimiothérapeutiques tels que le fluorouracile et l'oxaliplatine, couramment utilisés dans le traitement du cancer du côlon. Elles sont utilisées pour étudier la résistance aux médicaments et cribler les médicaments thérapeutiques potentiels pour le carcinome colorectal.

Limites

Hétérogénéité
Les cellules HT-29, comme d'autres lignées cellulaires cancéreuses, présentent une hétérogénéité et peuvent ne pas former une population cellulaire uniforme. Cela peut avoir un impact sur la reproductibilité des résultats de certains essais et entraîner des variations mineures dans les résultats expérimentaux.
Différenciation limitée
Les cellules HT-29 ont un potentiel de différenciation limité. Elles ne se différencient pas complètement en cellules intestinales ou en cellules du côlon, mais présentent seulement quelques caractéristiques. Cette limitation peut restreindre leur utilisation dans l'étude de processus biologiques plus complexes.

4. cellules HT-29 : Applications

La lignée cellulaire HT-29 est largement cultivée dans les laboratoires de recherche en raison de son large éventail d'applications. Cette section ne couvrira que quelques applications significatives des cellules HT-29.

Recherche sur le cancer : La lignée cellulaire HT-29 est une lignée cellulaire d'adénocarcinome colorectal. Elle est donc utilisée pour étudier la progression et le développement du cancer, ainsi que les mécanismes moléculaires sous-jacents. Une étude menée en 2018 a utilisé la lignée cellulaire HT-29 pour étudier les molécules cellulaires responsables des métastases. Cette étude a observé que les gènes vimentine et CXCR4 régulent la métastase cellulaire. La transfection de l'imitateur du microARN-193a-5p peut réduire les niveaux d'ARNm de ces gènes et diminuer avec succès la métastase des cellules cancéreuses [2].

Recherche toxicologique : La lignée cellulaire HT-29 est largement utilisée dans la recherche toxicologique. Ces cellules de carcinome colorectal sont utilisées pour évaluer la toxicité de différents médicaments candidats à l'aide de différents tests. Par exemple, une étude a exploré le potentiel de toxicité d'un extrait éthanolique de Syzygium cumini sur la lignée cellulaire HT-29. Les résultats ont montré une suppression significative de la croissance des cellules HT-29, indiquant les propriétés anticancéreuses prometteuses de l'extrait [3].

Microbiologie : HT-29 peut être utilisé comme système cellulaire hôte pour étudier la pathogenèse de microbes potentiels, c'est-à-dire de bactéries et de virus. Les chercheurs peuvent infecter les cellules HT-29 avec des microbes pour étudier leur virulence et la réponse de l'hôte. Une étude a ainsi utilisé des cellules HT-29 pour explorer les propriétés probiotiques des bactéries lactiques [4]. Une autre étude a utilisé des cellules HT-29 pour évaluer l'efficacité et la sécurité des traitements par bactériophage [5].

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5. Publications de recherche sur les cellules HT-29

Cette section présente quelques publications importantes sur les cellules HT-29 qui vous aideront à concevoir votre étude de recherche.

Évaluation de l'effet anticancéreux de l'extrait éthanolique de Syzygium cumini sur la lignée cellulaire colorectale HT-29

Cette étude propose l'extrait éthanolique de Syzygium cumini comme agent anticancéreux potentiel contre la lignée cellulaire HT-29 du cancer colorectal. L'extrait a supprimé de manière significative la croissance des cellules cancéreuses.

La tétranine inhibe la croissance des cellules HT-29 du carcinome du côlon via la voie Bcl-2/Caspase 3/PARP et la phase G1/S

Cette publication dans Bioscience Reports a testé l'activité anticancéreuse d'un composé, la tétrandrine, sur des cellules HT-29. Les résultats ont révélé que la tétrandrine inhibe la prolifération et la croissance des cellules cancéreuses en régulant les voies de signalisation cellulaire.

le microARN-193a-5p inhibe la migration des cellules cancéreuses du côlon HT-29 humaines par la suppression de la voie des métastases

Cette étude propose que le miRNA-193a-5p puisse potentiellement réguler la métastase des cellules HT-29 en régulant les gènes liés à la métastase.

Les bactériophages sont plus virulents pour les bactéries avec des cellules humaines qu'ils ne le sont dans une culture bactérienne ; aperçu des cellules HT-29

Cet article a été publié dans Nature Scientific Reports en 2018. Cette étude a utilisé la lignée cellulaire tumorigène HT-29 comme modèle cellulaire intestinal pour évaluer l'efficacité du traitement bactériophage proposé.

Propriétés probiotiques des lactobacilles et leur capacité à inhiber l'adhésion des bactéries entéropathogènes aux cellules Caco-2 et HT-29

Dans cette étude, les chercheurs ont utilisé des cellules HT-29 pour étudier les activités probiotiques des bactéries lactiques. Il est intéressant de noter que l'étude indique que les lactobacilles empêchent l'adhésion des bactéries pathogènes aux cellules du côlon.

6. Cellules HT-29 Ressources : Protocoles, vidéos et autres

Cette section présente quelques ressources en ligne disponibles sur les cellules HT-29 qui vous aideront à apprendre leurs protocoles de maintenance, de culture et de transfection.

Protocoles de culture cellulaire

Les ressources suivantes vous guideront dans la sous-culture des cellules HT-29.

Culture des cellules HT-29 : Ce lien fournit des connaissances de base sur le milieu de croissance, la décongélation et la sous-culture des cellules HT-29.
Maintien des cultures de cellules HT-29 : Cet article contient toutes les informations utiles sur la culture et la maintenance des cellules HT-29.

Protocoles de transfection

La lignée cellulaire HT-29 présente une grande efficacité de transfection et est fréquemment utilisée dans les études d'expression génique. Les ressources suivantes décrivent les protocoles de transfection possibles pour ces cellules.

Transfection de HT-29 : Ce site web contient le protocole détaillé pour la transfection des cellules HT-29.
Transfection de la lignée cellulaire HT-29 : Ce document décrit le protocole de transfection de la lignée cellulaire HT-29 avec de l'ADN plasmidique.

Vidéos relatives à la lignée cellulaire HT-29

Voici quelques vidéos sur la culture et la maintenance de cette lignée cellulaire tumorigène.

Passage des cellules : Cette vidéo montre le protocole de passage des cellules pour les lignées cellulaires adhérentes.
Transfection des cellules HT-29 : Cette vidéo vous guidera sur la méthode de transfection utilisée pour les cellules HT-29.

Nous espérons que les informations contenues dans cet article sont utiles et suffisantes pour vous permettre de manipuler et d'entretenir les lignées de cellules HT-29. Si vous envisagez d'utiliser des cellules HT-29 dans votre étude, commandez-les auprès de nous.

Références

Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, et I. Recio, HT29 cell line. The Impact of Food Bioactives on Health : in vitro and ex vivo models, 2015 : p. 113-124.
Shirafkan, N., et al, microRNA-193a-5p inhibe la migration des cellules cancéreuses du côlon HT-29 humain via la suppression de la voie de métastase. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5) : p. 8775-8783.
Khodavirdipour, A., R. Zarean, et R. Safaralizadeh, Evaluation of the anti-cancer effect of Syzygium cumini ethanolic extract on HT-29 colorectal cell line. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: p. 575-581.
Fonseca, H.C., et al, Probiotic properties of lactobacilli and their ability to inhibit the adhesion of enteropathogenic bacteria to Caco-2 and HT-29 cells. Probiotics and antimicrobial proteins, 2021. 13: p. 102-112.
Shan, J., et al, Les bactériophages sont plus virulents pour les bactéries avec des cellules humaines qu'ils ne le sont dans la culture bactérienne ; aperçu des cellules HT-29. Scientific reports, 2018. 8(1) : p. 5091.